I. Особливості взяття досліджуваного матеріалу при захворюваннях, викликаних патогенними клостридіями При раневих анаеробних інфекціях досліджують:

♦ Виділення з рани, матки, пупка – відбирають стерильним ватним

тампоном або піпеткою до обробки антисептиками й антибіотиками.

♦ Шматочки тканин, сторонні тіла – беруть з глибоких ділянок рани,

карманів, розчавлених тканин за допомогою стерильного скальпеля та пінцета у широкогорлу банку або флакон.

♦ Кров – беруть з вени у шприц – пробірку або стерильним шприцем

з послідуючим переливанням у герметично закриту пробірку.

♦ Грунт – проби беруть у широкогорлі склянки.

Основні правила роботи з досліджуваним матеріалом:

● оберігати зразки патологічного матеріалу від контакту з атмосферним повітрям;

● транспортувати в анаеробних умовах

● дотримуватись правил техніки безпеки

II. Методи мікробіологічної діагностики:

Мікробіологічні дослідження при захворюваннях, спричинених патогенними клостридіями, проводять у двох напрямках - виділення з досліджуваного матеріалу:

● збудника

●його токсину

Особливості культивування патогенних анаеробів

І. Фізичні – ґрунтуються на механічному видаленні або запобіганні проникнення кисню в навколишній простір або живильне середовище:

1. Вирощування культур в анаеростаті (є стаціонарні і портативні).

2. Метод Віньяла –Вейона – у пробірку з напіврідким агаром (t˚ =43-45˚С) піпеткою вносять досліджуваний матеріал, добре перемішують і заповнюють цією сумішшю стерильну пастерівську піпетку. Нижній кінець піпетки запаюють у полум’ї пальника; верхній закривають корком. Загортають у щільний папір або вміщують у велику пробірку; культивують у термостаті.

3. Культивування у стовпчику агару – у пробірку наливають напіврідкий агар ((t˚ - 43-45˚С) на 2/3 її висоти. Піпеткою до дна вносять патологічний матеріал і ретельно перемішують (прокручують пробірку між долонями), ставлять у банку з холодною водою. Після ущільнення агару поміщають у термостат.

4. Метод Перетца – на чашку Петрі з МПА шпателем сіють досліджуваний матеріал. Посів накривають стерильним предметним склом так, щоб не залишилось пухирців повітря. Вміщують у термостат донизу дном.

5. Рідкі живильні середовища перед посівом регенерують (кип’ятять на водяній бані 20-30хв., потім різко охолоджують). Здійснюють посів і середовище заливають стерильною вазеліновою олією. Інкубують у термостаті.

ІІ. Хімічний – ґрунтується на видалені кисню хімічними речовинами.

1. Метод Арістовського – на дно ексікатора вносять хімічні речовини, які легко поглинають кисень (натрію гідросульфіт, пірогалол). Вміщують чашки Петрі з посівами, закривають кришкою і ставлять у термостат. Для поглинання кисню з живильного середовища до нього додають редукційні речовини: глюкозу, тіогліколеву кислоту, шматочки варених паренхіматозних органів тварин; для адсорбції кисню – кульки вати, пемзу.

ІІІ. Біологічний метод – грунтується на культивуванні анаеробів з аеробами.

1. Метод Фортера – у чашці Петрі з КА по діаметру вирізають стерильним скальпелем смужку шириною 1-1,5см. На одну половину сіють аероби (кишкову паличку), на іншу – досліджуваний матеріал. Чашку Петрі заклеюють клейкою стрічкою і вміщують у термостат.