Визначення вмісту загального холестеролу

Принцип методу. Використовують реакцію, яка ґрунтується на здатності холестеролу давати смарагдово-зелене забарвлення з оцтовим ангідридом і концентрованою сірчаною кислотою.

Хід роботи. Ліпідний екстракт, взятий в кількості, що відповідає 2 мл молока, переносять у пробірку. До сухого залишку до 5 мл хлороформу і ретельно струшують. Тоді додають 1 мл оцтового ангідриду і 4 краплі концентрованої Н₂SО₄. Суміш ретельно перемішують і ставлять у тепле місце на 20-25 хв. для розвитку забарвлення. Інтенсивність забарвлення визначають на фотоелектроколориметрі або спектрофотометрі при довжині хвилі 656 мкм. Контролем служать 5 мл хлороформу, 1 мл оцтового ангідриду і 4краплі концентрованої Н₂SО₄. Одночасно досліджують стандарт 1000 мг холестеролу, розчиненого в 100 мл хлороформу. Кількість холестеролу у молоці визначають за формулою:

Холестерол, мг % = (1000 мг х Екст. проби х 500) / Екст. стандарту

Результати досліджень:_______________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Висновки: ________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Виявлення молочного цукру в молоці та кількісне його визначення

Матеріали і обладнання: перекристалізована сірчанокисла мідь, дистильована вода, сегнетова соль, розчин СuSО₄ (34,63 г на 500 мл водного розчину), розчин NаОН (10,2 г на 1л водного розчину), фелінговий розчин, 0,5 розчину КМпО₄,розчин залізоамонійних квасців FeNH₄ (SО₄)₂ (86 г квасців розчинити в 250 мл води, відфільтрувати в літрову мірну колбу, додати 25 мл концентрованої Н₂SО₄, охолодити, долити до мітки водою і перемішати), безводний кристалічний щавлевокислий амоній (NаН₄)₂С₂О₄, концентрована Н₂SО₄ (х.ч.) густиною 1,84 г/см³,фільтри паперові, мірна колба на 1 л.

Якісна реакція з фелінговим реактивом на лактозу

Принцип методу. Лактоза володіє відновлюючими властивостями завдяки наявності в її молекулі альдегідної групи При кип'ятінні розчинів, в яких є лактоза, з фелінговим розчином відбувається відновлення окису міді і випадає яскраво-червоний осад закису міді.

Приготування фелінгового розчину.

1-й розчин: 69,25 г перекристалізованої сірчанокислої міді розчинити в дистильованій воді у мірній колбі на 1 л

2-й розчин: 346 г сегнетової солі розчинити в 600 мл дистильованої води при слабому нагріванні, профільтрувати: до фільтрату додати 103,2 NaОН, розчиненого в 200 мл дистильованої води. Розчини перемішати в мірній літровій колбі, долити до мітки водою.

Перед використанням 1 і 2 розчини змішують у рівних об'ємах.

Техніка визначення. В пробірку налити близько 5 мл фільтрату, одержаного після осадження білків, додати 1-2 мл фелінгового розчину і кип'ятити суміш протягом 3 хв.

Спостерігати за появою червоного осаду закису міді Сu₂О, що свідчить про наявність у фільтраті лактози.