7. Заключение среза

задачи:

- сохранение среза, достигается:

- изоляция от внешней среды

• удаление воды (спирты)

реализация:

- капля канадского (пихтового) бальзама

- покровное стекло

Виды микропрепаратов:

1. гистологические срезы тканей органов

2. мазки (кровь человека)

3. отпечатки ( с опухоли)

4. пленки (РСТ)

Морфометрия

- метод определения числа и размеров структур

Разновидности:

1. ручная морфометрия

2. автоматизированная морфометрия

Виды морфометрических исследований:

1. подсчет индексов

2. измерение размеров структур

Индексы:

а. митотический индекс (ИМ) - число митозов на 100 (1000) клеток

б. индекс меченых ядер (ИМЯ)– при радиоавтографии – % клеток, включивших исследуемое вещество, меченное радиоизотопной меткой

г. статмокинетический индекс (СКИ) - накопление митозов в течение определенного времени после разрушения веретена деления (колхицин)

в. индекс апоптоза – частоты гибели клеток

Измерение размеров структур

1. окулярной микролинейкой (или окуляр-микрометра)

- позволяет получать абсолютные значения размеров

структур

- в мкм

2. морфометрических сеток

- позволяет определять относительные показатели –

долю объема, занимаемую структурой в срезе

- в %

Автоматизированные системы обработки изображений

Состоят из трех частей:

1. воспринимающая часть - сканирующий микроскоп

2. регистрация сигнала – фотометрический (ФЭУ) или видеокамера

3. ЭВМ (электронно-вычислительная машина) – цифровые массивы или гистограммы распределения изучаемого признака.

Задачи:

1. Морфометрическая - оценка морфометрических показателей (количество объектов в определенной площади среза, размеры объектов, отношения показателей). Регистрация сигнала - видеокамера.

2. Денситометрическая - оценка количества вещества в структуре (содержания ДНК в ядре клетки и т.д.). Регистрация сигнала – фотоэлектронный умножитель.

Пример морфометрической задачи - изучение ядерно-цитоплазматического отношения.

Ядерно-цитоплазматическое отношение –

- относительный показатель

- отношение объема (размера) ядра клетки к объему

(размеру) ее цитоплазмы

- является величиной постоянной (константой) для

каждого вида ткани

• константа достигается после окончания процесса

дробления в эмбриогенезе (процесс дробления

осуществляется до достижения клетками данной

ткани определенного ядерно-цитоплазматического

отношения, после чего начинается деление клеток

путем митоза)

- анализ показателя возможен только в пределах

одного вида клеток – т.е. невозможно сравнивать между собой лимфоциты и гепатоциты

Задачи исследования ядерно-цитоплазматического отношения:

1. оценка константы данной ткани

- лимфоциты – высокое ядерно-цитоплазматическое отношение (приближается к единице – малые лимфоциты – 0,9; средние – 0,7)

- гепатоциты – низкое ядерно-цитоплазматическое

отношение (0,45-0,55)

2. оценка функционального состояния клеток одной ткани

а. нормофункция - ядерно-цитоплазматическое

отношение, характерное для данной ткани,

константа – так в щитовидной железе тироциты

стенки фолликулов – однослойный кубический

эпителий

б. гиперфункция - сопровождается клеточной

гипертрофией – увеличением клеточных разме- ров за счет объема цитоплазмы, т.к. не происходит

изменений количества ДНК в ядре, а значит и

его размеров. Т.о. при гиперфункции ядерно-

цитоплазматическое отношение снижается,

становится более низким.

в. гипофункция - сопровождается клеточной

гипотрофией - атрофией - уменьшением

размеров клеток. При этом ядерно-цитоплаз- матическое отношение увеличивается.

Т.о. увеличение ядерно-цитоплазматического отноше-

ния в ткани свидетельствует о развитии гипофункции, а уменьшение - о

гиперфункции ее клеток.