22Лечебно-профилактические препараты бактериофагов. Бактериальные препараты нормализующие микрофлору кишечника. Колибактерин. Лактобактерин. Бифидумбактерин.

Бактериофаги имеют высокую специфичность к патогенным и условнопатогенным бактериям на много более высокую, чем антибиотики и другие средства, поэтому их так же используют для лечения и профилактики ряда инфекций. Бактериофаги не оказывают влияния на нормальную микрофлору. Они сами фактически относятся к нормальной микрофлоре. Естественной средой обитания многих фагов служат фекалии, речные и сточные воды, куда они попадают вместе с фекалиями и где играют роль одного из факторов самоочищения внешней среды. Наибольший практический интерес для медицины имеют бактериофаги против кишечных инфекций: дизентерийный, брюшнотифозный, сальмонеллезный групп АВСДЕ, коли-протейный. Препараты бактериофагов не вызывают привыкания, наиболее эффективны при раневых инфекциях с осложнениями (синегнойной палочки, стафиллококов и протеев). Широкий спектр хозяев бактериофагов и силы их литического воздействия заставляет систематически подбирать штаммы от больных и бактерионосителей, чтобы проводить постоянное обновление производственных штаммов. Одновременно ведется непрерывная работа по выделению изначально сильных штаммов вирулентных фагов из сточных и речных вод, фекалий, гноя.

На нормальную микрофлору человека и животного влияют внешние факторы. При нарушении саморегуляции возникают заболевания, которые можно предупреждать и лечить с помощью бактериальных препаратов на основе нормальной микрофлоры. На нормальную микрофлору активное влияние оказывает химио- , антибиотикотерапия и т.д. Поэтому дисбактериоз — это сложный процесс, отягощающий многие заболевания. При этом могут наблюдаться различные клинические проявления стафилококковой, протейной, кандидозной и другой этиологии: сепсис, дисфункция кишечника. Общей чертой микроорганизмов, участвующих в развитии патологических процессов при дисбактериозе, является их малая чувствительность к антибиотикам, т.к.они наиболее часто становятся возбудителями болезни именно на фоне применения данных лекарственных препаратов. В этих случаях в комплексе лечебных средств большое значение приобретает метод бактериотерапии — применение препаратов из живых микробов нормальной кишечной микрофлоры, получившее признание абсолютного большинства ученых.

Колибактерин Сухой колибактерин представляет собой лиофилизированную живую культуру кишечной палочки E.coli штамма М-17, расфасованную в ампулы, флаконы или таблетированную. Действующее начало колибактерина — живые клетки данного штамма, обладающие антагонистической активностью в отношения широкого круга патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Для накопления биомассы применяют казеиновые питательные среды, с добавлением 1,25—2,0% пищевого желатина. Накопление биомассы ведут в реакторах при 37°С, в условиях перемешивания и аэрации. рН_опт 7,2—8,0. Продолжительность выращивания 6—7 ч. Получаемая культура содержит 35— 40 млрд, живых бактерий в 1 мл. Суспензию перед замораживанием разливают в стеклянные ампулы или замораживают без предварительной фасовки (для изготовления таблеток). Перед замораживанием добавляют 10% сахарозы. Обезвоживание замороженного субстрата производят в сублимационных камерных установках, обеспечивающих остаточную влажность конечного продукта на уровне 2-4%. Для таблетирования и приготовления других неампулированных форм к сухому полуфабрикату добавляют лактозу (2%), тальк медицинский (до 2 %), стеарат кальция или магния (до 1 %). Колибактерин в таблетках или других готовых лекарственных формах фасуют в герметичную упаковку. Доза сухого колибактерина должна содержать не менее 10 млрд, живых микробных клеток. Контроль качества препарата - определение числа живых клеток в расчете на дозу и учет антагонистической активности к тест-штаммам возбудителей дизентерии Флекснера и Зоние Кроме этого определяют остаточную влажность (не > 4—5%), агглютинабельность культуры специфической антисывороткой, определяют безвредность на лабораторных животных, контролируют отсутствие постоянных микроорганизмов. Противопоказаний для применения колибактерина нет.

Лактобактерин и бифидумбактерин

Бифидумбактерин и лактобактерин представляют собой лиофилизированные культуры соответствующих молочнокислых бактерий, расфасованные в ампулы, флаконы или таблетированные. Технология приготовления препаратов бифидо- и лактобакте-рина в принципе аналогична технологии приготовления колибактерина. Различия относятся к составу питательных сред и условиям культивирования в соответствии с физиологическими особенностями бактерий. Для работы с Bifidobacterium bifidum и накопления биомассы используют питательные среды на основе печеночного бульона с добавлением хлорида натрия, пептона и лактозы. Для лиофилизации препарата применяют сахарозо-желатиновую смесь с добавлением обезжиренного молока (30—40%). Доза сухого бифидумбактерина при выпуске содержит 10⁸ - 10⁹ живых клеток бактерий. Флаконы с сухим бифидумбактерином содержат 5 доз. Контроль препарата проводится на содержание живых микробных клеток, на отсутствие посторонних микроорганизмов, проверяется антагонистическая активность препарата по отношению к дизентерийным тест-штаммам Флекснера и Зонне. Бифидумбактерин назначают детям и взрослым для лечения хронических колитов, кишечных расстройств невыясненной этиологии, дисбактериозов, возникших в результате применения антибиотиков. Особенно рекомендуется бифидумбактерин детям первого полугода жизни.

Для производства лактобактерина используются производственные штаммы молочнокислых бактерий (Lact. fermentii, Lact. plantarum), обладающие высокой антагонистической активностью в отношении возбудителей дизентерии, патогенных энтеробактерий и условно-патогенных микроорганизмов (гемолитического стафилококка, протея и др.). Антагонистическая активность связана с действием молочной кислоты, накапливающейся при сбраживании бактериями углеводов. Выгодным отличием молочнокислых бактерий является устойчивость к антибиотикам. Это позволяет применять их с профилактической целью параллельно с антибиотикотерапией.

Выращиваются молочнокислые бактерии на питательных средах на основе гидролизата молока, солодового экстракта или капустного отвара с добавлением 1,5% желатины глубинным методом с перемешиванием, но без аэрации, при 37° С. Пробы из реактора берут под давлением азота. В процессе культивирования добавляют раствор глюкозы или лактозы. За 8—10 ч культивирования получают микробные взвеси, содержащие 10—15 млрд, живых бактерий в 1 мл. Перед лиофилизацией в суспензию бактерий добавляют в качестве стабилизатора сахарозу, пептон и обрат молока в количестве 5—10%. Ампулы с сухим препаратом запаивают под вакуумом, флаконы укупоривают в атмосфере инертного газа. Одна доза сухого лактобактерина содержит 6—7 млрд, живых клеток бактерий. В ампулах может содержаться I—3 дозы, во флаконах — до 20 доз. Контролируют содержание живых лактобактерий, чистоту, влажность (не > 4%), антагонистическую активность. Микробные препараты, нормализирующие нормальную микрофлору не дают побочных явлений.