28. Сущность спектрофотометрии. Схема спектрофотометра.

Сп/ф-я основана на тех же законах светопоглощения, что и фотоэлектроколориметрия (кот основана на измерении интенсивности света видимой части спектра).

Схема спектрофотометра:

1-источник света, 2- зеркало-конденсор, 3- плоское зеркало, 4- кварцевая пластина, 5- монохроматор, 6- коллиматор, 7- диспергирующая призма, 8- фильтр, 9- кювета с анализ-м вещ-вом, 10- линза, 11- фотоэлемент.

Наиболее правильн рез-ты получают, когда оптич плотн-ть ≈ 0,4. Если она > 0,8, то применяют кюветы с меньшим l. При оптич плотн-ти ≤ 0,1 надо применять кюветы с большим l.

29. Задачи, решаемые фотометрическими методами.

1) Определения, основанные на собственном светопоглощении в-в (опред-е кофеина в чае).

2) Определения, связ-е с образов-м интенсивно окраш-х прод-в при добавлении бесцветного или слабоокрашенного реактива к бесцветному р-ру определяемого в-ва (опред-е белков по реакции Несслера)

3) Определения, основанные на измерении интенсивности окраски избытка окрашенного реактива (опред-е сахаров по избытку дихромата калия)

30. Сущность нефелометрического и турбодиметрического методов анализа.

Методы основаны на исследовании мутных рас-ров. В этих методах примен-ся одни и те же реакции. Различие сост в том, что нефелометрия измеряет интенс-ть света, рассеянного тверд частицами взвесей, а в фототурбодиметрии – инт-ть света, прошедщего через суспензию.

При пропускании света через суспензию часть его лучей поглощается, а другая – рассеивается. Рассеивание света наблюд-ся в направлении, перпендик-м направлению входящего света. Инт-ть рассеянного света и r подчин-ся уравнению Релея.

I_r = I₀KN

I – инт-ть вход-го света, F – фактор, зависящ от показатела преломл-я взвеш-х частиц в рас-ре, N – общее число взвеш-х час-ц в 1це Vма р-ра, C – объем взвеш-й частицы (см³), λ длина волны вход-го света (нм), r – расстояние от кюветы до наблюд-м, β- угол между направлениями вход-го и рассеян-го света.

Инт-ть расс-го света Ir проп-на значению N, кот пропорц концен-и анализ-го р-ра С. Из уравн-я Релея следует, что с уменьш-м длины волны вход-го света инт-ть Ir возраст-т.

Основной ист-к погреш-ти метода – трудновоспроизводимый объем взвеш-х частиц и изменение этой величины во времени. Для получения воспроизводимых рез-в необх-мо строго собл-ть усл-я выполн-я экспер-та при приготовл-и станд-х рас-в и при количеств-х опред-х. для стабилиз-и суспензий в анализир-й рас-р вводят желатин, крахмал или агар-агар. Фотонефелометрич метод предназнач для измерения малых конц-й. При большом сод-и в-ва в р-ре образ-ся большие объемы тверд фазы. Такие сис-мы неустойчивы и быстро коагулир-т. Для получения суспензии в разбавл-х рас-рах примен-ся реакции образов-я малорастворимых осадков (хлориды опред-ся при образ-и хлорида серебра). Размеры частиц и оптич св-ва суспензии зависят от конц-и определяемого комп-та, конц-и и скор-ти добавления реактивов, t^о смешиваемых р-в, времени, прошедш от смешивания р-в до измерения Ir, присут-я постор-х вещ-в, порядка смешив-я рас-в.