
- •Бактериологическая диагностика при стафило-, стрептококковой, синегнойной, шигеллезной инфекциях.
- •2.Микроскопический метод диагностики при менингококковой, гонорейной инфекции, туберкулезе, при гнойно-воспалит заболеваниях (клебсиелла, синегнойная палочка, протей, кишечная палочка)
- •3.Определение чувствительности к химопрепаратам и антибиоткам методом бумажных дисков и серийных разведений.
- •4.Иммунологические реакции при серологической диагностике инфекционных заболеваний: рск, рнга, ртга , инфекционный и поствакцинельный Видаль, реакция Вассермана.
- •6.Определение токсигенности дифтерийной палочки с помощью реакции преципитации в геле
- •7.Колицинотипирование с целью определения источника инфицирования.
- •8.Реакция нейтрализации ботулинистического токсина антитоксической сывороткой.
- •10.Методы индикации и титрования вирусов при культивировании их в культуре клеток или курином эмбрионе: рга, цветная проба.
- •11.Вирусолигический метод диагностики: идентификация вирусов с помощью рск, ртга, рнга с учетом по цветной пробе.
- •12.Серологические методы диагностики вирусных инфекций: рск, рн, ртга.
3.Определение чувствительности к химопрепаратам и антибиоткам методом бумажных дисков и серийных разведений.
На культуру бактерий накладывают бумажные диски, пропитанные разными антибиотиками и там б где появилось зона гемолиза более 1 см-чувствителен. Серийные разведения-часто после бум.дисков ,например ряд пазведений пенициллина и добавляют определенное количество бактерий, на сутки в термостат.
4.Иммунологические реакции при серологической диагностике инфекционных заболеваний: рск, рнга, ртга , инфекционный и поствакцинельный Видаль, реакция Вассермана.
РСК- не протекает в организме. Использ. для обнаруж Ат. Опытная система-Аг Ат и С. Индикаторная система-гем сыв и эр барана. титр Аг-наиб кол Аг при котором гемолиз. Титр С –мин кол-во при котором полн гемолиз.Исполз для клещ энцеф .Если р-я при 0.2-это титр а 0.25-рабочая доза, т.е. 25% от титра. При наличии свобод С-гемолиз, а положит рез-т отстствие видимых измен . Интенсивность задержки гемолиза обозначают знаками ++++.Реакция специфична и чувств, использ для серодиагност.
РНГА(непрямой)-нагружают эритроциты, можно латекс или уголь и белок А стафилококка., ищут Ат. Нагруженные Аг эритроциты+исследуемая сыв=агглютинация.
РТГА (торможение) для обнаружения Ат в сыворотке вольного и типа вируса. Сыв разводят 1:5 +в каждую по 0,25 мл суспензии вируса, содержащей 4 гемагглютинирующие дозы вируса(1 ед-наибольшее разведение которое возвают полную агглютинацию эритроцтов.) +эритроциты. Если сыв нейтр. вирус то + р-я задержки.
Видаль- берут 4 ряда пробирок по 6 в каждом. По 1 мл сыв разведения 1:100 наливают в первую пробирку каждого ряда, 1:200 во ворую, 1:400, и т.д. в шестую-1 мл физиологич р-ра. Во все пробирки 1 ряда по 1-2 капле брюшнотфозного Н-диагностикума, 2 по брюшнотифозного О –дагностикума, 3-А-паратифозеой и В- паратифозый диагносткуумы. В термостат на 2 часа. Взбудитель-тот котрый агглютинирует, р-я положит если агглют-я хотя бы в 1:100.если агглют-я с несколькими то возбудитель тот где агглют-я с большим разведением.если агг-я с одинаковыми титрами, тонужна р-я адсорбции аглюининов по методу Кастеллани. Для дифферинциации прививочного и анамнестического прибегают к повторной постановке через 5-6 дней, если болен-то кол-во Ат увеличится, если нет останется прежним. Вассерман –сифилис, сыв больного(Ат)+известный Аг(липоидные экстракты из ор-в животных)+комплемент + гемолит сыв+эр барана+физ раствор. Неспецичич Аг-вытяжки из органов, неспецифич Аг-из больного органа. Если нет гемолиза то,,+,, и чем больше плюсов тем боьше вероятность болезни.
6.Определение токсигенности дифтерийной палочки с помощью реакции преципитации в геле
.
Засев дифтерийной палочки на среду. Метод на агаре-преципитация, для обнаруж экзотоксина у токсигенных культур-диф. пал. на ч.Петри со средой Макклаута кладут бумагу с антитоксмч. сыв. Культуру засевают штрихами , если культура токсигенна-токсин переходит в агар и место соед-я-,,стрелки,, или ,,усы,,. Так больны 1 и 3 человек.
7.Колицинотипирование с целью определения источника инфицирования.
Берут мазки от больных детей, врачей, мед сестер и определяют Аг в мазках и смотрят, где такие же результаты как у ребенка, раковина не является источником.
Фаготипирование. Бактериофаги – вирусы, поражающие бактерий и, в некоторых случаях, вызывающие их лизис. Действие фагов специфично. Только отдельный фаг или группа фагов поражают конкретный штамм бактерий, что позволяет использовать фаги для типирования бактерий (фаготипирование). С этой целью взвесь известного фага вносится в чашку со свежей культурой микроба, подлежащего типированию. Если этот микроб чувствителен к действию данного фага, он лизируется и роста на среде не дает. На чашке появляются прозрачные зоны, так называемые "бляшки" или "негативные колонии".
Фаготипирование стафилококков заслуживает специального упоминания. Было установлено, что специфические бактериофаги (стафилофаги, табл.1) реагируют с 60% коагулазо+ стафилококков. Коагулазо‑ стафилококки не так чувствитекльны. Поскольку этот процесс специфический, он используется для определения фаговароввыделенных стафилококков. Для удобства бактериофагам присвоены определенные номера, и штаммы стафилококка, лизирующиеся определенным фагом имеют номер этого фага и обозначаются как соответствующий фаговар. Это касается только штаммов S.aureus. Большинство других стафилококков относятся к нетипирующимся.
По решению международного подкомитета по фаготипированию стафилококков, предложена международная классификация фаговаров S.aureus (табл.1)
Таблица 1
Международная классификация фаговаров S.aureus
Группы |
Отдельные фаги |
Общие фаговары S.aureus |
I |
29, 52, 52А, 79, 80 |
29, 52/52А; 52/52А/80/81; 80 |
II |
3А, 3В, 3С, 55, 71 |
3А/3В/3С; 3С/55 |
III |
6, 7, 42Е, 47, 53, 54, 75 |
6/7/47/53/54/75/77 |
IV |
42D |
|
Смешанная |
81, 187 |
|
Фаготипирование используется в эпидемиологических целях для выявления источника инфекции, так как фаготипирование высокоспецифичный процесс. В случаях, например, внутрибольничных инфекций, метод может точно указать на носителя патогенного штамма (один и тот же фаговар).