Работа 15. Обнаружение фотосинтеза методом крахмальной пробы.

Материалы и оборудование: 1) растение пеларгонии (желательно пестролистной), выдержанное в течение трех суток в темноте, 2) спирт, 3) раствор иода в йодистом калии (кон­центрированный раствор, разбавленный в 3 раза водой). 4) крепкий раствор щелочи, 5) лампа электрическая на 200—300 ватт, 6) ножницы, 7) пинцет, 8) штатив с двумя про­бирками, 9) спиртовка, 10) коническая колбочка, 11) фарфо­ровая чашка, 12) водяная баня, 13) 2 пробковых кружка (диаметром 1 — 1, 5 см) с булавкой, 14) электроплитка. 15) колпак стеклянный, 16) тарелка, 17) маленькая стеклян­ная баночка, 18) тигелек широкий для раствора щелочи. 19) бутылка для отработанного спирта, 20) воронка, 21) дер­жалка деревянная для пробирок, 22) спички, 23) ланолин.

Известно, что образующийся при фотосинтезе сахар сра­зу переводится в первичный крахмал, который легко обнару­жить по реакции с иодом. Задача данной работы — выяснить значение света, углекислоты и хлорофилла для -процесса фо­тосинтеза.

Ход работы: Выдержать растение (или отдельные ли­стья) в течение нескольких дней в темноте. За это время крахмал, имевшийся в листьях, гидролизуется, и сахар ча­стично оттекает в стебель, частично расходуется на дыхание клеток листа.

Проверить полноту обескрахмаливания листа, для чего отрезать кусочек листа, поместить в пробирку и кипятить его с водой (чтобы убить клетки). Воду слить, прилить спирт и кипятить на водяной бане до полного извлечения пигментов. Слить спирт, размягчить кусочек, наливая на него небольшое количество воды (после действия спирта ткани становятся хрупкими), поместить кусочек в фарфоровую чашку и облить раствором иода. Отсутствие синего окрашивания покажет, что крахмала в листе нет

(если же проба с иодом окажется положительной, то с данным листом ставить опыт не сле­дует).

Срезать лист, обновить срез под водой и опустить чере­шок в пробирку с водой. Затемнить часть листовой пластинки, для чего наложить на верхнюю и нижнюю поверхности листа пробковые кружки, точно один против другого, и закрепить их на листе, проколов булавкой.

(Можно поставить опыт и иначе: покрыть лист с обеих сторон кусками картона с вырезанной в них фигурой или при­ложить-сверху листа контрастный, не очень темный фотонегатив).

Другой лист (также проверенный на отсутствие крахма­ла) поставить черешком в баночку с водой и поместить в ат­мосферу, лишенную углекислоты, для чего поставить рядом с листом сосуд с крепким раствором щелочи и закрыть стеклян­ным колпаком. Для полной герметичности поставить баночку с листом и сосуд со щелочью на кусок стекла, смазав края колпака ланолином.

Выставить оба листа на яркий солнечный или электриче­ский свет.

Через час обработать листья так же, как и кусочки, в ко­торых проверяли полноту обескрахмаливания: убить кипящей водой, обесцветить спиртом, размягчить погружением в воду и облить раствором иода.

Записать результаты, отмечая, в каких частях листа об­разовался крахмал (для пестрого листа обратить внимание на белые участки). Зарисовать лист после обработки его иодом или сохранить лист в загербаризированном виде.

В выводах указать, какие условия необходимы для процесса фотосинтеза.