
- •Оглавление
- •Основная литература
- •Дополнительная литература
- •Тематический план лекций для до
- •Тематический план лекций для озо
- •План лабораторных занятий для озо
- •Возможные темы рефератов
- •Занятие 1. Организация работ в лаборатории
- •Правила выживания в лаборатории
- •1.2. Дополнительная литература
- •1.4. Вопросы для самоконтроля
- •1.5. Задание на дом
- •Занятие 2. Вода, ее свойства и методы измерений рН
- •2.1. Физико-химические свойства и роль воды в биосфере
- •2.2. Дополнительная литература
- •2.3. Экспериментальная часть
- •2.3.1. Приготовление ацетатных буферных растворов
- •2.3.3. Электрометрические измерения
- •2.4. Вопросы для самоконтроля
- •2.5. Задание на дом
- •Занятие 3. Типы, дозировка и способы анализа растворов
- •3.2. Дополнительная литература
- •3.3. Экспериментальная часть
- •3.3.3. Сравнительный качественный анализ аминокислот
- •3.4. Вопросы для самоконтроля
- •3.5. Задание на дом
- •Занятие 4. Методы спектроскопии в анализе биомолекул и клеток
- •4.2. Дополнительная литература
- •4.3. Экспериментальная часть
- •4.3.2. Определение концентрации гемоглобина (Hb) в крови
- •4.3.3. Определение количества эритроцитов в крови с помощью турбидиметрии
- •4.4. Вопросы для самоконтроля
- •4.5. Задание на дом
- •Занятие 6. Основные приемы препаративной биохимии
- •6.2. Дополнительная литература
- •6.3. Экспериментальная часть
- •6.3.2. Разделение гемоглобина и теней эритроцитов
- •6.3.3. Высаливание белковых фракций плазмы крови и их
- •6.4.Вопросы для самоконтроля
- •6.5. Задания на дом
- •Занятие 7. Методы количественного анализа белков
- •7.2. Дополнительная литература
- •7.3. Экспериментальная часть
- •7.3.1. Количественное исследование белковых фракций крови биуретовым методом
- •7.4. Вопросы для самоконтроля
- •7.5. Задание на дом
- •Занятие 8. Деление молекулярных смесей методами хроматографии
- •8.2. Дополнительная литература
- •8.3. Экспериментальная часть
- •8.3.1. Хроматография аминокислот и пептидов на бумаге
- •8.3.2. Гель-хроматография смеси на колонке Сефадекса g – 50
- •8.4. Вопросы для самоконтроля
- •8.5. Задание на дом
- •Занятие 9. Итоговое № 1. Статическая
- •9.2. Задание на дом
- •Занятие 10. Разделение биополимеров методами электрофореза
- •10.2. Дополнительная литература
- •10.4. Вопросы для самоконтроля
- •10.5. Задание на дом
- •Занятие 11. Количественный анализ и свойства ферментов
- •11.2. Дополнительная литература
- •11.3. Экспериментальная часть
- •11.3.1. Получение разведенного препарата амилазы слюны
- •11.3.2. Количественное определение активности амилазы слюны способом Вольгемута
- •11.3.3. Выявление специфичности амилазы
- •11.3.4. Зависимость активности амилазы от температуры
- •11.3.4. Зависимость активности амилазы от величины рН инкубационной смеси. 1. В соответствии с таблицей протокола опыта,
- •11.4. Вопросы для самоконтроля
- •11.5. Задание на дом
- •Занятие 12. Брожение как модель изучения процессов метаболизма
- •12.2. Дополнительная литература
- •12.3. Экспериментальная часть
- •12.3.2. Количественное определение ортофосфата
- •12.4. Вопросы для самоконтроля
- •12.5. Задание на дом
- •Занятие 13. Углеводы. Методы определения и диагностическая роль глюкозы
- •13.2. Дополнительная литература
- •13.3. Экспериментальная часть
- •13.3.1. Глюкозооксидазный метод определения глюкозы в био-жидкостях с помощью тест-наборов фирмы Lachema (Чехия)
- •12.3.2. Определение глюкозы в крови с помощью экспресс-анализатора Эксан-г (Литва)
- •12.3.3. Определение глюкозы в крови с помощью автономного экспресс-измерителя пкг-02-«Сателлит» (Россия)
- •13.4. Вопросы для самоконтроля
- •13.5. Задание на дом
- •Занятие 14. Основы химии и метаболизма липидов и биомембран
- •14.2. Дополнительная литература
- •14.3 Экспериментальная часть
- •14.3.2. Метод определения общего холестерола в биожидкостях, с помощью тест-набора реагентов «Новохол» (зао «Вектор-Бест»)
- •14.4. Вопросы для самоконтроля
- •14.5. Задание на дом
- •Занятие 16. Основы метаболизма азотистых соединений
- •Варианты азотистого баланса
- •Потребность животных в аминокислотах (По р. Марри и др., 1993, с изменениями)
- •16.2. Дополнительная литература
- •16.3 Экспериментальная часть
- •16.3.1. Определение количества мочевины в биожидкостях с помощью тест-набора фирмы Lachema (Чехия)
- •16.3.2. Определение концентрации креатинина в биожидкостях с помощью тест-набора фирмы Lahema (Чехия)
- •16.4. Вопросы для самоконтроля
- •16.5. Задания на дом
- •Занятие 17. Семинар по интеграции метаболизма
- •17.2. Темы реферативных сообщений
- •17.3. Обсуждение рефератов
- •17.4. Задания на дом
- •Занятие 18. Контрольные вопросы к итоговому № 2. Способы управления метаболизмом
- •Приложение
4.2. Дополнительная литература
4.2.1. Спектроскопические методы исследований в физиологии и биохимии. – Л.: Наука, 1987. – 204 с.
4.2.2. Физико-химические методы молекулярной биологии. – М.: Изд-во Моск. ун-та., 1978. – С. 65 – 95; 127 –173.
4.2.3. Бурштейн Э. А. Люминесценция белковых хромофоров. – М.: ВИНИТИ «Итоги науки и техники». Серия БИОФИЗИКА. – Т. 6, 1976. – 216 с.
4.2.4. Черницкий Е. А. Люминесценция и структурная лабильность белков в растворе и клетке. – Минск.: Наука и техника, 1972. – 280 с.
4.2.5. Эккерт Р. и др. Физиология животных. – М.: Мир, 1991. – Т. 1. Фоторецепторы. – С. 239 – 250.
4.2.6. Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии. – М.: Мир, 1986. – 496 с.
4.3. Экспериментальная часть
4.3.1. Инструкция по эксплуатации фотоэлектроколориметра = ФЭКа, модели КФК-2
1. За 15 мин. до начала фотометрии, под контролем лаборанта или преподавателя, дежурный убеждается, что стрелка гальванометра находится в положении «механический 0», открывает крышку кюветного отделения прибора, вставляет его вилку в сетевую розетку и, тумблером на задней панели слева, включает прогрев ФЭКа.
2. Перед началом измерений, вращая рукоять светофильтра, на передней панели прибора слева, установить нужный диапазон светового потока = пучка.
3. Убедиться, что рукоять чувствительности прибора на передней панели справа, соответствует цветовому диапазону рукояти светофильтра.
4. Подготовить фотометрические кюветы нужной толщины, насухо протереть марлевой салфеткой их оптические грани и, убедиться в отсутствии на них пятен и др. грязи. ВНИМАНИЕ! Поскольку каждый ФЭК оснащен лишь одним набором кювет, изготовленных из полированного оптического стекла, пользоваться ими можно лишь над рабочим столом и брать рукой, только за боковые грани, оберегая от царапин и ударов.
5. Убедиться, что стрелка включенного гальванометра находится в положении «электрический 0».
6. Заполнить контрольную кювету дистиллятом или, указанным в соответствующей методике контрольным раствором, убедиться в отсутствии капель и потеков на ее оптических гранях, строго вертикально вставить ее в дальнее гнездо кюветодержателя и, рукояткой в центре передней панели ФЭКа, до упора ввести кювету в световой пучок.
7. В соответствии с п. 6, заполнить вторую кювету исследуемым раствором и вставить ее в свободное гнездо кюветодержателя, примерно на том же расстоянии от источника света. ВНИМАНИЕ! При анализе серии однотипных образцов, избегая излишних промывок кюветы, начинать фотометрию с наиболее разбавленных проб.
8. Закрыть крышку кюветного отделения до звяка шторки и, вращая на передней панели вверху рукояти грубой, а затем и тонкой настройки, установить стрелку гальванометра на 0 шкалы D = А. ВНИМАНИЕ! При положении стрелки между делениями шкалы - округлять цифру до целого значения.
9. Не открывая крышки кюветного отделения, переместить до упора рукоять кюветодержателя в противоположение, заменив тем самым в световом потоке, контрольную кювету исследуемой.
10. Убедиться, что стрелка гальванометра успокоилась и занести показания ФЭКа в протокол опыта.
11. Открыть крышку кюветного отделения, вынуть из кюветодержателя кювету с исследуемым раствором и, декантировать ее содержимое обратно в соответствующую пробирку. ВНИМАНИЕ! Для последующих измерений, во избежание потеков на стенках, кювету не переворачивать, а удерживая вверх дном, осушить ее торец фильтровальной бумагой.
12. При последующих измерениях, руководствоваться пп. 6-11 данной инструкции.