
- •Руководство для самостоятельной работы студентов по санитарной микробиологии воды, почвы, лечебно-профилактических организаций
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию.............................................7
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды......................................................13
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы....................................................35
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.................45
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологическое исследование лпо.....................49
- •Раздел 6.Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии ….................................................................................................................................61
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию
- •1.1 Критерии санитарной микробиологии
- •1.2 Требования к санитарно-показательным микроорганизмам (спм)
- •1.3 Методы санитарной микробиологии
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды
- •2.1 Санитарно-микробиологическое исследование питьевой воды централизованного водоснабжения
- •Нормативы по микробиологическим и паразитологическим показателям для воды питьевой водопроводной (СанПиН 2.1.4.1074-01).
- •2.1.1 Отбор проб воды
- •2.1.2 Определение общего числа микроорганизмов
- •(Омч или кмАиФам)
- •Исследование общего микробного числа в питьевой воде
- •2.1.3 Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •(Основной метод)
- •Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •2.1.4 Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий титрационным методом
- •Определение окб и ткб титрационным методом
- •2.1.5 Определение спор сульфитредуцирующих клостридий
- •2.1.6 Определение колифагов
- •Определение колифагов в питьевой воде прямым методом
- •2.1.7 Проведение количественного анализа
- •2.1.8 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования питьевой водопроводной воды
- •2.2 Вода питьевая расфасованная в ёмкости
- •2.2.1 Метод определения Pseudomonas aeruginosa
- •2.3 Вода нецентрализованного водоснабжения
- •Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения (микробиологические показатели)
- •2.4 Санитарная микробиология поверхностных водных объектов
- •2.4.1 Правила забора проб воды из поверхностных водоемов (гост р 51592-2000)
- •Требования к составу и свойствам воды водных объектов
- •2.4.2 Подготовка проб воды к анализу
- •2.4.3 Определение омч
- •2.4.4. Определение окб и ткб
- •2.4.5. Определение колифагов
- •2.4.6 Определение бактерий рода Salmonella
- •Определение бактерий рода Salmonella
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы
- •Критерии оценки степени эпидемической опасности почвы
- •Отбор и подготовка проб почвы
- •Определение общего количества бактерий в почве
- •Определение числа (индекса) термофилов в почве
- •Определение титра нитрифицирующих бактерий
- •3.5 Определение титра аммонификаторов
- •3.6 Определение коли-титра почвы (индекса бгкп)
- •3.6.1 Титрационный (бродильный) метод.
- •Титрационный метод определения бгкп в почве
- •3.6.2 Метод мембранной фильтрации
- •3.6.3 Прямой посев на плотные дифференциально-диагностические среды
- •3.7 Определение количества энтерококков в почве
- •3.8 Определение титра c. Perfringens
- •3.9 Определение сальмонелл в почве
- •Анализ результатов исследования почвы
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха
- •4.1 Особенности и методы отбора проб воздуха
- •4.2 Определение омч воздуха послеродовой палаты аспирационным методом
- •4.3 Определение омч воздуха бактериологического бокса седиментационным методом
- •4.4 Определение количества s. Aureus в воздухе помещений класса чистоты а (операционные, родильные залы) аспирационным методом
- •4.5 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования воздуха помещений
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологические исследования в лечебно-профилактических организациях
- •5.1 Контроль стерилизации
- •5.1.1 Объекты контроля стерильности и объем исследований
- •5.1.2 Подготовка бокса, инструментов, питательных сред и персонала к работе
- •5.1.3 Исследование на стерильность хирургических инструментов
- •5.1.4 Особенности исследования на стерильность лигатурного шовного и перевязочного материала
- •5.1.5 Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •5.2 Контроль качества дезинфекции изделий медицинского назначения
- •5.3 Контроль обработки рук медицинского персонала
- •Контроль эффективности хирургической обработки рук
- •Раздел 6. Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии
- •1. Среды для определения омч и кмафам:
- •2. Среды для выделения кишечной группы бактерий:
- •3. Среды для выделения Pseudomonas aeruginosa
- •4. Среды для выделения анаэробов
- •5. Среды для выделения грибов
- •6. Среды для выделения кокков
- •Нормативные документы общего характера
- •Нормативные документы по качеству воды
- •Нормативные документы по воздуху
- •Нормативные документы по почве
- •Нормативные документы по санитарному режиму в лечебно-профилактических организациях
- •Тестовые задания
- •Эталоны ответов на тестовые задания:
- •Ситуационные задачи Задача № 1
- •Задача № 2
- •Задача № 3
- •Задача № 9
- •Задача № 10
- •Задача № 11
- •Задача № 12
- •Задача № 13
- •Задача № 23
- •Задача № 24
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи Ответ на задачу № 1
- •Ответ на задачу № 2
- •Ответ на задачу № 3
- •Ответ на задачу № 4
- •Ответ на задачу № 5
- •Ответ на задачу № 6
- •Ответ на задачу № 7
- •Ответ на задачу № 8
- •Ответ на задачу № 9
- •Ответ на задачу № 10
- •Ответ на задачу № 11
- •Ответ на задачу № 12
- •Ответ на задачу № 13
- •Ответ на задачу № 14
- •Ответ на задачу № 15
- •Ответ на задачу № 16
- •Ответ на задачу № 17
- •Ответ на задачу № 18
- •Ответ на задачу № 19
- •Ответ на задачу № 20
- •Ответ на задачу № 21
- •Ответ на задачу № 22
- •Ответ на задачу № 23
- •Ответ на задачу № 24
- •Список рекомендуемой литературы
Нормативы по микробиологическим и паразитологическим показателям для воды питьевой водопроводной (СанПиН 2.1.4.1074-01).
Показатели |
Единицы измерения |
Нормативы |
Общее микробное число (КМАиФАМ) |
число КОЕ в 1 мл |
Не более 50 |
Общие колиформные бактериии (ОКБ) |
число бактерий в 100 мл |
отсутствие |
Термотолерантные колиформные бактерии |
число бактерий в 100 мл |
отсутствие |
Споры сульфитредуцирующих клостридий |
чило спор в 20 мл. |
отсутствие |
Колифаги |
число БОЕ в 100 мл |
отсутствие |
Цисты лямблий |
число цист в 50 л |
отсутствие |
Примечание: при определении проводится трехкратное исследование по 100 мл отобранной пробы воды.
Определение колифагов и цист лямблий проводится перед подачей воды в распределительную сеть.
Определение спор клостридий проводится при оценке эффективности обработки воды.
По эпидпоказаниям определяют патогенные микроорганизмы.
2.1.1 Отбор проб воды
1. Для микробиологического анализа пробы воды отбирают по «ГОСТ Р 51593-2000. Вода питьевая. Отбор проб».
Для отбора проб воды используют стерильную одноразовую посуду или ёмкости многократного применения (не менее 300 см3), стерилизованные сухим жаром или автоклавированием. Для нейтрализации дезинфектанта в ёмкость до стерилизации вносят серноватистокислый натрий из расчёта 10 мг на 500 см3 воды. Кран обжигают, полностью открывают и спускают воду в течении 10 мин, для слива застоявшейся воды. При отборе проб воды напор можно уменьшить. Пробы забирают с соблюдением стерильности. После отбора пробы, емкость сразу закрывают стерильными крышками и колпачками. Маркируют, сопровождают актом отбора проб воды с указанием места, даты, времени забора и фамилии, имени, отчества специалиста. Микробиологический анализ воды должен быть произведен в течение 2-х часов после отбора. При невозможности соблюдения сроков исследования, пробы воды допускается хранить в течение 6 часов в контейнерах –холодильниках при температуре +4-10оС.
Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды проводится согласно методическим указаниям МУК 4.2.1018-01 «Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды», Минздрав РФ, М. 2001.
2.1.2 Определение общего числа микроорганизмов
(Омч или кмАиФам)
ОМЧ – общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов в 1 мл воды, способных образовывать колонии в/на питательном агаре при температуре 37оС в течение 24 часов, видимые при увеличении в 2 раза. ОМЧ воды обозначают и как КМАиФАМ.
Из каждой пробы воды делают посев по 1 мл в две стерильные чашки Петри, заливают 8-12 мл расплавленного и остуженного до 45о питательного агара, быстро смешивают, распределяя по всему дну до застывания агара. Чашки с посевами помещают в термостат вверх дном и инкубируют при t 37оС в течение 24±2 ч (схема № 1 ).
Учитывают все выросшие колонии, наблюдаемые при увеличении в 2 раза. Количество колоний суммируют, делят на 2. Результат выражают в КОЕ в 1 мл исследуемой воды.
Если на одной из чашек подсчет невозможен (сплошной рост или > 300 колоний) выдают результат по одной чашке.
Согласно СанПиНу 2.1.4-1074-01 ОМЧ не должно превышать 50 КОЕ в 1 мл воды.
СХЕМА № 1