
- •Руководство для самостоятельной работы студентов по санитарной микробиологии воды, почвы, лечебно-профилактических организаций
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию.............................................7
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды......................................................13
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы....................................................35
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.................45
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологическое исследование лпо.....................49
- •Раздел 6.Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии ….................................................................................................................................61
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию
- •1.1 Критерии санитарной микробиологии
- •1.2 Требования к санитарно-показательным микроорганизмам (спм)
- •1.3 Методы санитарной микробиологии
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды
- •2.1 Санитарно-микробиологическое исследование питьевой воды централизованного водоснабжения
- •Нормативы по микробиологическим и паразитологическим показателям для воды питьевой водопроводной (СанПиН 2.1.4.1074-01).
- •2.1.1 Отбор проб воды
- •2.1.2 Определение общего числа микроорганизмов
- •(Омч или кмАиФам)
- •Исследование общего микробного числа в питьевой воде
- •2.1.3 Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •(Основной метод)
- •Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •2.1.4 Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий титрационным методом
- •Определение окб и ткб титрационным методом
- •2.1.5 Определение спор сульфитредуцирующих клостридий
- •2.1.6 Определение колифагов
- •Определение колифагов в питьевой воде прямым методом
- •2.1.7 Проведение количественного анализа
- •2.1.8 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования питьевой водопроводной воды
- •2.2 Вода питьевая расфасованная в ёмкости
- •2.2.1 Метод определения Pseudomonas aeruginosa
- •2.3 Вода нецентрализованного водоснабжения
- •Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения (микробиологические показатели)
- •2.4 Санитарная микробиология поверхностных водных объектов
- •2.4.1 Правила забора проб воды из поверхностных водоемов (гост р 51592-2000)
- •Требования к составу и свойствам воды водных объектов
- •2.4.2 Подготовка проб воды к анализу
- •2.4.3 Определение омч
- •2.4.4. Определение окб и ткб
- •2.4.5. Определение колифагов
- •2.4.6 Определение бактерий рода Salmonella
- •Определение бактерий рода Salmonella
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы
- •Критерии оценки степени эпидемической опасности почвы
- •Отбор и подготовка проб почвы
- •Определение общего количества бактерий в почве
- •Определение числа (индекса) термофилов в почве
- •Определение титра нитрифицирующих бактерий
- •3.5 Определение титра аммонификаторов
- •3.6 Определение коли-титра почвы (индекса бгкп)
- •3.6.1 Титрационный (бродильный) метод.
- •Титрационный метод определения бгкп в почве
- •3.6.2 Метод мембранной фильтрации
- •3.6.3 Прямой посев на плотные дифференциально-диагностические среды
- •3.7 Определение количества энтерококков в почве
- •3.8 Определение титра c. Perfringens
- •3.9 Определение сальмонелл в почве
- •Анализ результатов исследования почвы
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха
- •4.1 Особенности и методы отбора проб воздуха
- •4.2 Определение омч воздуха послеродовой палаты аспирационным методом
- •4.3 Определение омч воздуха бактериологического бокса седиментационным методом
- •4.4 Определение количества s. Aureus в воздухе помещений класса чистоты а (операционные, родильные залы) аспирационным методом
- •4.5 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования воздуха помещений
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологические исследования в лечебно-профилактических организациях
- •5.1 Контроль стерилизации
- •5.1.1 Объекты контроля стерильности и объем исследований
- •5.1.2 Подготовка бокса, инструментов, питательных сред и персонала к работе
- •5.1.3 Исследование на стерильность хирургических инструментов
- •5.1.4 Особенности исследования на стерильность лигатурного шовного и перевязочного материала
- •5.1.5 Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •5.2 Контроль качества дезинфекции изделий медицинского назначения
- •5.3 Контроль обработки рук медицинского персонала
- •Контроль эффективности хирургической обработки рук
- •Раздел 6. Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии
- •1. Среды для определения омч и кмафам:
- •2. Среды для выделения кишечной группы бактерий:
- •3. Среды для выделения Pseudomonas aeruginosa
- •4. Среды для выделения анаэробов
- •5. Среды для выделения грибов
- •6. Среды для выделения кокков
- •Нормативные документы общего характера
- •Нормативные документы по качеству воды
- •Нормативные документы по воздуху
- •Нормативные документы по почве
- •Нормативные документы по санитарному режиму в лечебно-профилактических организациях
- •Тестовые задания
- •Эталоны ответов на тестовые задания:
- •Ситуационные задачи Задача № 1
- •Задача № 2
- •Задача № 3
- •Задача № 9
- •Задача № 10
- •Задача № 11
- •Задача № 12
- •Задача № 13
- •Задача № 23
- •Задача № 24
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи Ответ на задачу № 1
- •Ответ на задачу № 2
- •Ответ на задачу № 3
- •Ответ на задачу № 4
- •Ответ на задачу № 5
- •Ответ на задачу № 6
- •Ответ на задачу № 7
- •Ответ на задачу № 8
- •Ответ на задачу № 9
- •Ответ на задачу № 10
- •Ответ на задачу № 11
- •Ответ на задачу № 12
- •Ответ на задачу № 13
- •Ответ на задачу № 14
- •Ответ на задачу № 15
- •Ответ на задачу № 16
- •Ответ на задачу № 17
- •Ответ на задачу № 18
- •Ответ на задачу № 19
- •Ответ на задачу № 20
- •Ответ на задачу № 21
- •Ответ на задачу № 22
- •Ответ на задачу № 23
- •Ответ на задачу № 24
- •Список рекомендуемой литературы
2.2.1 Метод определения Pseudomonas aeruginosa
Исследуемую воду объемом 1000 мл делят на две емкости по 500 мл и в каждую добавляют по 50 мл среды Бонде, перемешивают и инкубируют при температуре 37±1 оС в течение 24-48 часов.
При наличии роста происходит помутнение и образование плёнки, пересевают на среду «Блеск» на 2 чашки Петри, на одну штрихом, на другую бляшками (3-4). Посевы инкубируют при t 37±1 оС 24 часа. Затем отмечают харктер роста на среде «Блеск». Вырастают темнокрасные колонии с золотистым блеском. При отсутствии характерного блеска, подозрительные колонии пересевают на косяк с МПА, на котором через 24 часа при t 37 оС вырастают колонии с сине-зеленым пигментом.
При отсутствии роста на среде Бонде через 24 часа, пробы оставляют инкубировать до 48 часов. При отсутствии роста на среде Бонде или среде «Блеск», выдают отрицательный результат ( схема № 6 ).
СХЕМА № 6
Схема анализа воды на Pseudomonas aeruginosa.
1
.
+
по 50 мл ср.Бонде
500 мл 500 мл
исследуемая вода Инкубация 24-48 часов при t 37oC
2. Пересев пленки со среды Бонде на среду «Блеск» из каждой пробы на 2 чашки
1 2
«штрихом» «уколом и бляшками»
Темно-красные (вишневые) колонии с
золотистым блеском
Инкубация 24 часов при t 37oC
При росте без блеска, пересев на скошенный питательный агар
Сине-зеленые
колонии
Положительный ответ: Pseudomonas aeruginosa обнаружена в 1000 мл воды.
2.3 Вода нецентрализованного водоснабжения
Около 10% населения России пользуется местными источниками водоснабжения, колодцами, артезианскими скважинами и др. (в Кузбассе – 6,7%). Вода нецентрализованного водоснабжения по своему составу и свойствам также должна соответствовать определенным органолептическим, химическим и микробиологическим показателям.
В марте 2003 года введены в действие санитарные правила «Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников. СанПиН 2.1.4.1175-02».
Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения (микробиологические показатели)
ОМЧ (КМАиФАМ) КОЕ в 1 мл - 100
ОКБ КОЕ в 100 мл - отсутствие
ТКБ КОЕ в 100 мл - отсутствие
Колифаги БОЕ в 100 мл - отсутствие
При отсутствии ОКБ проводится определение глюкозоположительных колиформных бактерий с постановкой оксидазного теста.
Колифаги считаются дополнительным показателем, который определяют по постановлению Главного санитарного врача с учетом местных санитарных условий и эпидситуации.
В СанПиНе 2.1.4.1175-02 определены требования к содержанию и эксплуатации водозаборных сооружений нецентрализованного водоснабжения.
В радиусе 20 м от колодца не допускается устройство фермерских хозяйств, выгребных ям и другие виды деятельности (мытье автомашин, стирка белья), способствующие загрязнению воды.