5. Определение групп крови

Определяют группы системы АВ0 с помощью реакции агглютинации эритроцитов.

1. С помощью стандартных сывороток

И спользуют следующие реактивы: стандартные сыворотки групп 0αβ (I), Аβ (II), Вα (III), а также АВ (IV) — контроль; стандартные эритроциты групп А (II), В (III), а также 0 (I) — контроль. Метод устанавливает какие групповые антигены (А или В) находятся в эритроцитах исследуемой крови и на основании этого сделать заключение о ее групповой принадлежности. На пластинку наносят по 0,1 мл (по одной большой капле) стандартной сыворотки каждого образца двух разных серий каждой группы так, что образуются два ряда капель. Рядом с каждой каплей наносят по маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови. Наличие агглютинации оценивается как положительная реакция, отсутствие ее — как отрицательная. Трактовка результатов:

1. Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь I(0) группы.

2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой II(А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I(0) и III(В) групп. Исследуемая кровь II(А) группы.

3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III(В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I(0) и II(А) групп. Исследуемая кровь III(В) группы.

4. Сыворотки I(0), II(А), III(В) групп дают положительную реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит 1У(АВ) группе. Но, прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV(АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV(АВ) группе. Выявление других комбинаций говорит о неправильном определении групповой принадлежности крови больного.

2. Определение с помощью моноклональных тел (цоликлонов).

Цоликлоны - это растворы, содержащие аналоги агглютининов ά и β. При этом методе агглютинация происходит между одноименными агглютиногенами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов. Для определения группы крови применяются реагенты групп анти-А и анти-В.

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0,1), рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл). Оценка результатов:

3. Определние резус-фактора

Резус-фактор в повседневной практике определяется при помощи антирезусных сывороток или моноклинальными анти-D-антителами. Используется универсальная антирезусная сыворотка для экспресс-метода.

Rh+ - при наличии агглютинатов на фоне просветленной жидкости;

Rh- - при гомогенно окрашенной жидкости (отсутствие агглютинации).