40. Условия и методы культивирования микроорганизмов в лабораторной обстановке

Культивирование микроорганизмов – это один из основных приемов в микробиологии. Для роста и развития микроорганизмов в природе и в лабораторных условиях необходимо наличие питательных веществ для энергетических и конструктивных реакций. Требования разных групп микроорганизмов к источникам энергии и химическим элементам определяются их метаболическими возможностями. Выращивание и поддержание микробных культур в лаборатории основано на моделировании естественных условий обитания данного организма в лаборатории, а также на знании особенностей обмена веществ.

МЕТОДЫ  КУЛЬТИВИРОВАНИЯ  И  ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ БАКТЕРИЙ  Для успешного  культивирования, помимо правильно подобранных сред и  правильно произведенного  посева, необходимы оптимальные условия:  температура, влажность, аэрация  (снабжение воздухом). Культивирование   анаэробов сложнее, чем аэробов, для удаления воздуха из питательной  среды  используют различные способы.  Выделение  отдельных видов бактерий (чистой культуры) из исследуемого  материала, содержащего, как правило, смесь различных микроорганизмов, является  одним из этапов любого бактериологического исследования. Чистой культурой  микробовполучают из изолированной  микробной колонии.  При выделении  чистой культуры из крови (гемокультуры) ее предварительно «подращивают» в жидкой среде: 10-15 мл стерильно взятой крови  засевают в 100-150 мл жидкой среды. Соотношение засеваемой крови и питательной  среды 1:10 не случайно - так  достигается разведение крови (неразведенная кровь губительно действует на  микроорганизмы). Этапы выделения чистой культуры бактерий  I этап (нативный материал)  Микроскопия  (ориентировочное представление о микрофлоре).  Посев на плотные  питательные среды (получение колоний).  II этап (изолированные  колонии)  Изучение колоний  (культуральные свойства бактерий).  Микроскопическое изучение микробов в окрашенном мазке  (морфологические свойства бактерий).  Посев на скошенный питательный агар для выделения чистой  культуры.  III этап  (чистая культура)  Определение культуральных, морфологических, биохимических   и других свойств   для идентификации культуры бактерий

41 .Принципы санитарно-микробиологического нормирования объектов внешней среды

42 .Санитарно-показательные микроорганизмы (СГГМО), требования предъявляемые к ним. Группировка СГГМО

САНИТАРНО - ПОКАЗАТЕЛЬНЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ , микроорганизмы, постоянно обитающие в естеств. полостях тела человека и животных. Различают С.-п. м. кишечника (группа А) и верхних отделов дыхат. путей (группа Б). К группе А относятся кишечная палочка, энтерококк, Clostridium регfringens, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Lactobacterium bifidum, Lactobacterium plantarum, кишечный и дизентерийный бактериофаги, Bacteroides (Risiella). Присутствие С.-п. м. указывает на фекальное загрязнение воды, почвы, пищевых продуктов, а также посуды и инвентаря пищевых предприятий. Группа Б включает зеленящий (a ) стрептококк, гемолитич. (b ) стрептококк, стафилококк, к-рые учитывают преим. при исследовании воздуха для косвенной индикации возможного наличия в нём возбудителей воздушно-капельных инфекций. Обнаружение С.-п. м. во внешней среде свидетельствует о загрязнении сё выделениями человека или животных. С помощью количеств. учёта С.-п. м. выявляют степень загрязнения исследуемого объекта, его эпидемиол. и эпизоотол. опасность.

Патогенные микроорганизмы попадают в почву, воду, воздух, на пищевые продукты из выделений больных людей и животных, а также выделений бактерии - и вирусоносителей. Непосредственно обнаружить патогенные микробы в объектах внешней среды чрезвычайно трудно ввиду их малой концентрации. Кроме того, их наличие, как правило, не удается зафиксировать в межэпидемическом периоде. Выявлению патогенных микроорганизмов препятствуют также сапрофитные микроорганизмы, обитающие во внешней среде в большом количестве. Поэтому делались попытки найти косвенные показатели загрязнения внешней среды патогенными микроорганизмами. Для этих целей оказалось возможным использовать микроорганизмы, постоянно обитающие в организме человека и животных (толстом отделе кишечника и верхнем отделе дыхательных путей). Такие микроорганизмы были названы санитарно-показательными. В основном они являются комменсалами и только при изменении условий проявляют условно-патогенные свойства. Из постоянных обитателей толстого отдела кишечника в качестве санитарно-показательных микроорганизмов приняты следующие: бактерии группы кишечных палочек, энтерококки, сульфатредуцирующие анаэробы (преимущественно Cl. perfringens), бактерии рода Proteus, кишечные бактериофаги; из постоянных обитателей слизистых оболочек верхнего отдела дыхательных путей стрептококки (зеленящий стрептококк Streptococcus viridans и гемолитический стрептококк Streptococcus haemolyticus); стафилококки гноеродный, или золотистый Staphylococcus pyogenes (aureus).