Лабораторная работа №1. «Качественные реакции на отдельные гормоны»

1.1. Цель работы: Изучить химические методы обнаружения гормонов в биологических жидкостях.

1.2 Реактивы: водный раствор адреналина; 0,1н раствор йода; 3% р-р хлористого железа (111); 10% р-р едкого натра; 1% р-р сернокислой меди; 0,5% р-р уксуснокислого свинца; концентрированная азотная кислота; 10% р-р бикарбоната натрия; 10% р-р серной кислоты; 1% р-р крахмала; йодноватый калий 2% р-р; таблетки тиреодина; дистиллированная вода; фолликулин, (эстрон) - спиртовый или масляный раствор; концентрированная серная кислота.

1.3. Оборудование: штатив с пробирками, пипетки, спиртовки или электроплитки, ступка, колбы для гидролиза, воронки, водяная баня, лакмусовая бумага.

1 .4. Ход работы: Гормон поджелудочной железы - инсулин

ОПЫТ. 1. - реакция Геллера: к 1 мл концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке пробирки прилить равный объем раствора инсулина. Пробирку наклонить под углом 45° так, чтобы жидкости не смешивались. На границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок в виде небольшого

ОПЫТ. 2. - биуретова реакция: к 1 мл инсулина добавить равный , объем 10%

р-р едкого натра и 1 - 2 капли р-ра CuSO₄, жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.

ОПЫТ. 3. - реакция Фоля: к 1 мл. р-ра инсулина прилить 1 мл. уксуснокислого свинца, несколько капель 10% р-ра едкого натра (до исчезновения мути) и нагреть до потемнения раствора. Сделать вывод о химической природе инсулина.

Гормон мозгового слоя надпочечников - адреналин

ОПЫТ. 1. - реакция с йодом: в пробирку налить 1 мл водного раствора адреналина, добавить несколько капель 0,1н раствора йода и нагреть. Содержимое пробирки окрашивается в розовый или красный цвет вследствие образования окрашенных продуктов окисления адреналина.

ОПЫТ. 2. - реакция с хлорным железом: в пробирку налить 1мл адреналина и добавить несколько капель хлорного железа. Жидкость окрашивается зеленый цвет, который при добавлении 1 капли 10%-ного раствора едкого натрия переходит в вишнево красное окрашивание. Реакция с хлорным железом характерна для пирокатехинового кольца, входящего в молекулу адреналина.

Гормон щитовидной железы - тироксин

Качественная реакция на тироксин - открытие йода. При разрушении тироксина образуется йодистый калий, из которого йод легко вытесняется йодноватым калием. Выделившийся свободный йод дает синее окрашивание с крахмалом.

ОПЫТ. 1. - щелочной гидролиз тиреодина: поместить в ступку 5 таблеток тиреодина и тщательно их растереть. Растертую массу перенести в колбочку для гидролиза, добавит 5 мл. 10% р-ра NaHCO₃ и 5 мл. дистиллированной воды. Содержимое колбы прокипятить в течение 10 минут.

ОПЫТ. 2. - открытие йода в полученном гидролизате: к 2 мл охлажденного гидролизата прибавить 10% р-р серной кислоты до кислой

реакции на лакмус. После подкисления добавить 3 капли 1% р-ра крахмала и 5-10 капель 25 р-ра йодноватого калия (не допускать избытка). Выделившийся йод дает синее окрашивание с крахмалом.