Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Культивирование микроорганизмов в ферментере BioFlo115.pdf
Скачиваний:
49
Добавлен:
29.11.2019
Размер:
2.07 Mб
Скачать

1.3. Содержание технологического процесса

1.3.1. Подготовка технологических сред

1.3.1.1. Получение сжатого воздуха

Воздух используется как источник кислорода в процессах ферментации. Воздух подаётся компрессором СБ4/Ф-150.OL150II давлением 0,8 МПа по трубопроводу условным диаметром 20 мм, материал полипропилен.

Подготовка компрессора к работе Перед началом работы компрессора необходимо проверить:

-наличие визуальных повреждений;

-правильность подключения к питающей сети и заземлению;

-целостность и надёжность крепления защитного ограждения клиноременной передачи;

-надёжность крепления опор компрессора;

-целостность и исправность предохранительного клапана, органов управления и контроля.

Начало и завершение работы Пуск и останов компрессора должны производиться только

выключателем на прессостате. После пуска компрессора, по мере расхода воздуха потребителем, реле давления прессостата автоматически выключает и включает его, поддерживая давление сжатого воздуха в ресивере.

При эксплуатации ресивера необходимо:

-правильно использовать ресивер в пределах давления и температуры, указанных на табличке технических данных заводаизготовителя;

-постоянно контролировать исправность и эффективность устройств защиты и контроля (прессостат, предохранительный клапан, манометры);

-по окончании работы полностью выпускать воздух из ресивера;

-сливать конденсат.

При эксплуатации ресивера необходимо соблюдать требования "Правил устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением".

8

При эксплуатации компрессора должны соблюдаться "Общие правила пожарной безопасности для промышленных предприятий", а также проводиться своевременное техническое обслуживание.

1.3.1.2. Получение воды очищенной

Для получения воды очищенной и дальнейшего ее асептического хранения используется установка arium® comfort I и arium® bagtank «Sartorius Weighing Technology» (Германия). Для разбора очищенной воды необходимо на дисплее установки:

-включить установку кнопкой «Включение»;

-нажать кнопку «Меню»;

-с помощью кнопок «Вверх, Вниз, Вправо» выбрать необходимый объем разбора очищенной воды и нажать кнопку «Старт».

После окончания заданного разбора очищенной воды, установка выключится автоматически.

1.3.1.3Подготовка питательных растворов

В качестве минеральной среды используется смесь из четырёх маточных растворов: А, Б, В, Г (таблица 3). Растворы готовятся из расчёта на производственную программу.

Таблица 3 – Состав питательных сред

Раствор

Компонент

Концентрация, г/л

А

Na2HPO4×12H2O

9,0

KH2PO4

1,5

 

Б

MgSO4×7H2O

0,2

В

С6Н5О7Fe×H2O

5,0

 

H3BO3

0,228

 

COCl2×6 H2O

0,03

 

CuSO4×5H2O

0,008

Г

MnCl2×4H2O

0,008

 

ZnSO4×7H2O

0,176

 

NaMoO4×H2O

0,05

 

NiCl2

0,008

Карбамид

(NH2)2CO

20

Глюкоза

C H O

250

 

9

 

Раствор А – расчётное количество фосфорнокислого калия и фосфорнокислого натрия растворяют в дистиллированной воде при перемешивании.

Раствор Б – навеску сульфата магния растворяют в дистиллированной воде, после растворения доводят водой до метки.

Раствор В – навеску железа лимоннокислого вносят в мерный стакан, заливают дистиллированной водой и кипятят до полного растворения. Затем раствор переносят в мерную колбу и доводят водой до метки.

Раствор Г – в мерную колбу объёмом 2 л вносят поочередно навески солей, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного растворения. Хранят в холодильнике.

Раствор карбамида – расчётное количество карбамида растворяют в дистиллированной воде.

Раствор глюкозы – расчётное количество глюкозы растворяют в дистиллированной воде при перемешивании.

Раствор хлорида натрия (2,5 %) – навеску 2,5 г помещают в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

Пептонный агар – 10 г агара, 5 г пептона, 5 мл раствора хлорида натрия (2,5 %), заливают 0,5 л водопроводной водой, закрывают ватномарлевыми пробками, стерилизуют при 1 атм., 121 °С, 30 мин. Стерильный агар разогревают в микроволновой печи до полного расплавления, оставляют при комнатной температуре на 20 минут и затем наливают по 15 мл в стерильные пробирки, дают испариться конденсату.

Растворы: карбамида; А; Б; В; Г; стерилизуются при температуре плюс 120 °С, давлении 1 атм. в течение 45 минут. Для стерилизации лабораторной посуды, инструментария и материалов используется стерилизатор паровой MLS 3781L.

Раствор глюкозы, насосом ISM 1020A, прокачивают через стерильный фильтр Millipore Express SHC со скоростью не более 5 л/мин в стерильный бутыль.

Работу со стерильными растворами и посудой проводят только в асептических условиях в ламинарном шкафу MB 602WSL. Перед работой ламинарный шкаф в течение 15 минут следует обработать ультрафиолетом.

При подготовке среды для ферментации (полная среда Шлегеля) к одному литру раствора A следует добавить 5 мл раствора Б, 3 мл раствора В, 10 мл раствора Г.

10