Тема 9. Методы определения молока от коров, больных маститом.

Цель занятия:

Освоить методики определения молока от коров, больных маститом.

Задания:

1. Провести учет материалов предыдущего занятия, сделать анализ и занести полученные данные в протокол

2. Провести микроскопическое исследование различных проб молока: пробы разливают в центрифужные пробирки, уравновешивают, центрифугируют при 3000 оборотах 10-15 минут, из осадка готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют и делают заключение в наличии стафилококков и стрептококков

3. Поставить каталазную, лейкоцитную, бромтимоловые пробы и пробу отстаивания по Мутовину, пробу со щелочью.

4. Провести анализ полученных данных и занести результаты в протокол.

Оборудование и материалы:

Пробы молока, центрифужные пробирки, центрифуга, предметные стекла, наборы красителей для окраски по Граму, биологические микроскопы, каталазник, 1% раствор перекиси водорода, водяная баня, градуированные центрифужные пробирки, 1% водный раствор метиленовой синьки, 0,2% раствор бромтимолового синего в 60% спирте, пробирки бактериологические, 1Н раствор NaOH.

Методика проведения занятия и методические указания по теме:

1. Объяснение преподавателя: характеристика основных возбудителей мастита, методы определения молока от маститных коров.

2. Самостоятельная работа студентов в соответствии с заданиями.

Возбудителями воспалительного процесса вымени могут быть различные микроорганизмы, в результате действия которых секреция молока отклоняется от нормы и реакция молока из слабокислой переходит в щелочную.

Молоко становится солено-горьким, в нем появляются хлопья или тянущиеся нити. Позднее выделяется гнойная жидкость, иногда с неприятным запахом.

Наиболее опасное поражение вымени вызывают патогенные стрептококки - Sir. mastitidis, Str. agalactiae и стафилококки -Staph. aureus.

Молоко от маститных коров непригодно для молочной промышленности, кроме того, оно может быть источником пищевых токсикозов у потребителей.

При субклиническом течении мастита у коров, молоко почти не отличается от нормального. Поэтому применяют специальные методы определения молока от маститных коров.

Для распознавания маститного молока:

1. Проводят микроскопическое и бактериологическое исследование.

2. Ставят специальные пробы /каталазную, лейкоцитную, бромтимоловую, отстаивания /пробу Мутовина/ и пробу со щелочью/.

Каталазная проба:

В каталазник вносят 15 мл молока, подогретого до 25°С и 5 мл 1% раствора перекиси водорода. Жидкость перемешивают и внутреннюю трубку каталазника вставляют так, чтобы уровень жидкости был на нулевом делении. Каталазник ставят на водяную баню при температуре 25°С на 2 часа. Затем отсчитывают высоту уровня жидкости, которая соответствует объему выделившегося кислорода. При выделении свыше 2 мл кислорода молоко считается подозрительным на мастит.

Лейкоцитная проба:

В ценрифужные градуированные пробирки вносят по 10 мл молока от каждой пробы и центрифугируют 5 минут при 1500 оборотах. При наличии в пробирке осадка, достигающего делений 0,5-1 молоко считается подозрительным, наличие осадка, достигают делений 1-2, указывает на то, что молоко получено от маститных коров.

При микроскопировании осадка - обнаруживается большое количество многоядерных лейкоцитов и стрептококков.

Бромтимоловая проба:

В углублениях на фарфоровой пластинке 5 капель молока смешивают с 1 каплей 0,2% раствора бромтимолового синего в 60° спирте. Молоко, полученное от здоровых коров окрашивается в желтый цвет /рН - 6,3-6,5/, от маститных - в зеленый /рН - 6,5-7,0/, и даже в синий /рН - 7,0-7,5/.

При тяжелых формах мастита реакция молока может быть кислой и оно окрашивается в желтый цвет.

Проба отстаивания /проба Мутовина/:

Из каждого соска /каждой доли вымени/ выдаивают 10-15 мл молока в пробирки и оставляют их в штативе при температура 4-8°С. Пробирки просматривают через 2-3 часа и вторично - через 16-24 часа. При этом определяют цвет молока. наличие осадка, примесей, высоту слоя сливок и их внешний вид.

Маститное молоко бывает синеватым, водянистым. Слой сливок менее 0,5 мм указывает на заболевание. Признаком заболевания является также розовый цвет сливок /наличие в них эритроцитов/. Хлопья указывают на большое количество лейкоцитов.

Проба с щелочью:

На предметное стекло наносят 5 капель молока и добавляют 2 капли 1Н раствора NaOH и смешивают в течение 20 секунд. Если молоко доброкачественное, образуется прозрачная смесь, если маститное - наблюдаются хлопья и нити.