- •Генетика бактерии. Внехромосомные носители генетической информации(is – последовательности, транспозоны, плазмиды). Принцип полимеразной цепной реакции.
- •Питание бактерий. Классификация бактерии по типам питания. Транспорт питательных веществ в клетку. Питательные среды. Классификация питательных сред. Примеры.
- •Структура бактериальной клетки(капсулы, жгутики, ворсинки) Микроскопические методы выявления. Споры бактерии. Спорообразования. Клостридии и бациллы.Примеры.
- •Структура бактериальной клетки(цпм, цитоплазма, нуклеоид, рибосомы, включения) Микроскопические методы выявления.
- •Морфология бактерий: актеномицетов, спирохет, риккетсий, микоплазм. Методы окрашивания. Примеры, названия бактерии на латинским языке. Роль в патологии человека.
- •Химический состав бактериальной клетки. Дыхание бактерий, классификация бактерии по типу дыхания. Ферменты мо. Особенности культивирования облигатных анаэробов.
- •Морфология и структура вирусов. Современные принципы классификации и номенклатуры вирусов. Вирусологические методы исследования.
- •Методы лабораторной диагностики инфекционных заболевании(перечислить). Микроскопический метод: … Общее увеличение и предельная разрешающая способность микроскопа.
Химический состав бактериальной клетки. Дыхание бактерий, классификация бактерии по типу дыхания. Ферменты мо. Особенности культивирования облигатных анаэробов.
По хим.составу больших отличий между прокариотами и эукариотами нет. В состав бакт.кл-ки входят:
1.биогенные хим.элементы. На их долю приходится 95% сухого остатка. Это С- 50%, О – 20%, N – 15%, Н – 10%.
2.макроэлементы. около 5%.Это Са,Na,Mg,K,Cl,P,S.
3.микроэлементы.приходятся доли%. Это Fe,Cu,I,Co и др.
Они входят в состав воды, белков, липидов, углеводов, нуклеиновых кислот, нейтрал.жиров. Их синтез контролируется генами.
Многие вещ-ва клетка получает извне, а другие – из организма хозяина.
В состав бакт.клетки входит вода 70-90% биомассы. Больше воды в капс.МО, меньше – у споровых МО.
Белки встречаются во всех структурных элементах клетки.В состав белков входят как обычные для эукариотов аминокислоты, так и входят оригинальные – Д-аланин, Д-глутамин, диаминопимилиновая кислота и др. Они входят в состав капсул и пептидогликана. Жгутики имеют белок плагелин, а пили – белок пилин.
Липиды. В основном это фосфолипиды. Они есть в ЦМ и в наружной мембране грамм»-» бактерий. Есть МО(возбудитель туберкулеза), которые содержат в клеточной стенке большое количество липидов до 40% сухого остатка. Это делает такие МО устойчивыми к кислотам, спиртам, щелочам.
Углеводы. Чаще встречаются в виде полисахаридов. Входят в состав капсул и клеточной стенки грамм «-» бактерий(ЛПС).
НК. Бактерии содержат ДНК и РНК. РНК находится в рибосомах – 80-85%. Есть т-РНК – 10% и м-РНК – 1-2% - в основном в одноцепочной форме. ДНК находится в ядерном аппарате(это хромосом.ДНК) или в цитоплазме – в плазмидах (это плазмидное ДНК). МО отличаются по структуре НК и содержанию азаотистых оснований. Генетический код состоит из 4 букв(А.Т.Г.Ц)
Дыхание, или биологическое окисление, основано на окислительно-восстановительных реакциях, идущих с образованием АТФ-универсального аккумулятора химической энергии. Энергия необходима микробной клетке для ее жизнедеятельности. При дыхании происходят процессы окисления и восстановления: окисление — отдача донорами (молекулами или атомами) водорода или электронов; восстановление — присоединение водорода или электронов к акцептору. Акцептором водорода или
электронов может быть молекулярный кислород (такое дыхание называется аэробным) или нитрат, сульфат, фумарат (такое дыхание называется анаэробным — нитратным, сульфатным, фумаратным).
По отношению к молекулярному кислороду бактерии можно разделить на три основные группы: облигатные, т.е. обязательные аэробы, облигатные анаэробы и факультативные анаэробы. Облигатные аэробы могут расти только при наличии кислорода. Облигатные анаэробы (клостридии ботулизма, газовой гангрены, столбняка, бактероиды и др.) растут только на среде без кислорода, который для них токсичен. Факультативные анаэробы могут расти как при наличии, так и при отсутствии кислорода, поскольку они способны переключаться с дыхания в присутствии молекулярного кислорода на брожение в его отсутствие. Факультативные анаэробы способны осуществлять анаэробное дыхание, называемое нитратным: нитрат, являющийся акцептором водорода, восстанавливается до молекулярного азота и аммиака
Ферменты
В состав бакт.клетки входят специфические белковые катализаторы – ферменты, которые синтезируют МО.
У МО есть ферменты 6 основных классов, которые есть и у людей: оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы, лиазы, лигазы, изомеразы.
В соответствии с механизмами генетического контроля у МО выделяют 3 группы ферментов:
1.Конститутивные, синтез которых происходит постоянно
2.Индуцибельные, синтез которых индуц-ся наличием субстрата
3.Репресибельные, синтез которых подавляется избытком продуктов реакции
МО вырабатывают эндоферменты. Они есть у всех МО и вырабатываются во внутрь клетки, а при ее гибели – в организм человека.
Экзоферменты. Их вырабатывают только микробы-патогены(во внешн.среду). Болезни, вызванные микробами-патогенами, продуцирующими экзотоксины - токсигенные (холера, дифтерия, столбняк, ботулизм, идр.)
В зависимости от «точки приложения» экзотоксины делятся на: гуалуронидаза, лецитиназа, ДНК-аза и др. Они являюся ферментами патогенности и они помогают МО проникать через слизистые, тканные и другие барьеры; они облегчают преодоление слоя слизи и распространение МО в межклет.пространстве.
В практике баклабароторий пользуются микробиологической (рабочей) схемой классификация ферментов, основанных на биохимических свойствах МО и продуктах ферментирования сахаров, белков, это:
1.сахаролитическая
2.протеолитическая
3.аутолитическая
4.окислительно-восстановительная
5.ферменты патогенности
Ферменты находятся в лизосомах и ЦМ. Ферментный состав клетки определяется геномом и является постоянным признаком, что используется для диагностики.
Для культивирования анаэробных микроорганизмов необходимо создание бескислородных условий, достигаемое различными методами. Физические методы основаны на создании вакуума в специальных аппаратах — анаэростатах. Иногда воздух в них заменяют каким-либо другим газом, например СО2. Доступ кислорода в питательную среду можно затруднить, если культивировать анаэробов в глубине столбика сахарного агара или среды Вильсона — Блера, налитых в пробирки в расплавленном состоянии и остуженных до 43°С. По методу Вейона — Виньяля расплавленный и остуженный агар с посевным материалом набирают в стеклянные трубочки, которые запаивают с двух концов.
Химические методы заключаются в том, что при культивировании исследуемого материала на плотных средах в эксикатор помещают химические вещества, например пирогаллол и щелочь, реакция между которыми идет с поглощением кислорода. В жидкие питательные среды можно добавлять различные редуцирующие вещества: аскорбиновую или тиогликолевую кислоту.
Биологический метод основан на одновременном культивировании аэробов и анаэробов на плотных питательных средах в чашках Петри, герметически закупоренных. Вначале кислород поглощается растущими аэробами, посеянными на одной половине среды, а затем начинается рост анаэробов, посев которых сделан на другой половине. Наиболее удобна для культивирования анаэробов специальная среда Китта — Тароцци. В нее входят сахарный МПБ, который наливают в пробирки в количестве 10—12 мл, и кусочки вареных паренхиматозных органов. Перед употреблением среду Китта ,— Тароцци кипятят на водяной бане для удаления растворенного в ней кислорода. Среду заливают сверху стерильным вазелиновым маслом. Заметный рост анаэробов (помутнение) может наблюдаться через 48 ч и более в зависимости от количества посевного материала.