21.5. Механизмы резистентности бактерий к антибиотикам

Механизм резистентности бактерий к антибиотикам может быть первичным и вторичным.

А. По первичному механизму развивается естественная, или видовая, резистентность к антибиотику. Например, микоплазмы устойчивы к беталактамам, потому что они не обладают клеточной стенкой (отсутствует мишень действия антибиотика).

Б. Вторичный механизм приводит к развитию приобретенной резистентности.

1. Приобретенная резистентность к антибиотику может быть следствием мутации в генах или переноса генов, контролирующих синтез клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, рибосомальных или транспортных белков.

2. Приобретенная резистентность может быть также следствием переноса r-генов R-плазмидами (резистентность к нескольким антибиотикам сразу) или транспозонами (резистентность к одному антибиотику).

21.6. Борьба с развитием антибиотикоустойчивости у микроорганизмов

Чтобы свести к минимуму развитие у микробов антибиотикоустойчивости, следует придерживаться шести принципов.

А. Применять антибиотики строго по показаниям.

Б. Избегать применения антибиотиков с профилактической целью.

В. Через 10 – 15 дней антибиотикотерапии производить смену препарата.

Г. По возможности использовать антибиотики направленного или узкого спектра действия.

Д. Через определенное время производить смену применяемых антибиотиков не только в отделении, больнице, но и в регионе.

Е. Ограниченно применять антибиотики в ветеринарии.

22. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам

22.1. Метод дисков

Наиболее простой и поэтому распространенный метод определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Метод является полуколичественным, с его помощью можно определить устойчивость тестируемого штамма к конкретному антибиотику лишь как низкую, среднюю, высокую, полную. Осуществляется он следующим образом.

А. Сначала тестируемый штамм засевается газоном на чашку Петри.

Б. Затем на засеянную поверхность накладываются стандартные диски с антибиотиками.

В. Чашку инкубируют в термостате необходимое для появления видимого роста время.

Г. Замеряют зону задержки роста (т.е. ее диаметр) вокруг дисков.

Рис. 22.1-1. Зоны задержки роста вокруг дисков с антибиотиками

Д. По величине этих зон делают вывод о чувствительности тестируемого штамма к каждому из применяемых антибиотиков (это и есть антибиотикограмма).

22.2. Метод серийных разведений

Этот метод более трудоемкий и затратный, но более точный. Кроме этого, он является количественным, а также позволяет определить минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) конкретного антибиотика на тестируемый штамм. Осуществляется он следующим образом.

А. Готовятся серии (обычно 8) двойных разведений антибиотиков в питательной среде.

Б. Проводится засев сред с разведениями антибиотика тестируемым штаммом.

В. Посевы инкубируют в термостате необходимое для появления видимого роста время.

Г. Проводят учёт бактериостатической концентрации (МИК) антибиотика по отношению к тестируемому штамму (максимальное разведение, в котором еще не наблюдается рост тестируемого штамма).

Д. Производится высев из разведений, в которых не наблюдается рост тестируемых штаммов, на питательную среду без антибиотика.

Е. Посевы инкубируют в термостате необходимое для появления видимого роста время.

Ж. Проводится учёт бактерицидной концентрации (МБК) антибиотика по отношении к тестируемому штамму (максимальное разведение, высев из которого на питательную среду без антибиотика не дал роста).