- •2.Разрушение кл. И экстракция. Центр-е
- •3. Разделение белков путем осаждения
- •4.Буферные растворы и специальные добавки. Ультрафильтрация.
- •5.Общие принципы хроматографии, классификация хр. Методов
- •6.Материалы матриц сорбентов и обменников. Техника колоночной хр.
- •7.Адсорбционная и распределительная хр.
- •9. Ионообменная хр.
- •10.Аффинная хроматография
- •11. Гель-фильтрация
- •12.Теоретические и методические основы электрофореза
- •13.Обнаружение, количественное определение и характеристика макромолекул после электрофореза
- •14.Принцип иммунного электрофореза. Иммунофиксация
- •15. Электросинерез. Электроиммуноанализ
- •17. Спектрофотометрические методы анализа
- •20.Радиометрический анализ. Масс-спектроскопия
- •21. Блоттинг-анализ
- •22.Влияние рН на биологические процессы и применние буф р-ов для б-х исследований
- •24.Исследования на уровне целого организма.
- •25.Перфузия изолированных органов
- •26.Приготовление срезов органов и тканей
- •27. Использование растительного материала
- •28.Культуры тканей и клеток
- •29.Фракционирование клеток
- •30.Приготовление гомогенатов тканей и клеток
- •31.Выбор среды суспендирования
13.Обнаружение, количественное определение и характеристика макромолекул после электрофореза
На электрофоретически разделенные антигены наносят иммунные сыворотки, содержащие различные специфические антитела. При встрече соответствующих антигена и антитела в зоне оптимального их соотношения наблюдается реакция преципитации невооруженным глазом. Иммунный электрофорез объединяет преимущества электрофореза и иммунной реакции: высокая разрешающая способность метода, разделяющая компоненты анализируемой системы на основе электрофоретической мобильности и высокая специфичность иммунных антисывороток.
14.Принцип иммунного электрофореза. Иммунофиксация
Эл-ф с иммунофиксацией - это двухступенчатый процесс, использующий эл-ф протеинов на первом этапе и иммунопреципитацию на втором. При этом исследованию может быть подвергнута сыворотка крови, моча, спинномозговая или другая жидкость организма. Эл-форез с иммунофиксацией - один из современнейших методов в кинической лаборатории для получения характеристик моноклональных иммуноглобулинов.
15. Электросинерез. Электроиммуноанализ
ЭЛЕКТРОСИНТЕЗ способ получения хим. соед. в процессе электролиза. В качестве анодов обычно используют оксиды Pb(IV), Ni, Mn(IV) и др. металлов, благородные металлы (Pt, Ir, Ru), графит и его модификации (стеклоуглерод, пирографит). Катодами чаще всего служат Pb, Hg, Cu, Zn, Ni, Fe или др. металлы. Исходное в-во -растворяют в полярном р-рителе (вода, низшие алифатич. спирты, ацетонитрил, ДМФА, диоксан). Наиб. эффективны процессы электросинтеза, если молекулы исходного в-ва диссоциируют в р-ре на ионы, а также если исходное в-во - орг. соед., в молекулах к-рого имеются полярные функц. группы. Если исходное в-во не является электролитом, необходимо добавление в-ва, придающего системе электропроводящие св-ва, но не участвующего в электродном процессе (фоновый электролит). Если исходное в-во не растворяется в используемом полярном р-рителе (напр., в воде), вводят дополнит. сорастворитель- в-во, растворимое в воде и растворяющее исходное в-во. Этот прием часто используют при электросинтезе орг. в-в. Осн. характеристики пром. электросинтеза следующие: 1) токовая нагрузка на электролизер. 2) Напряжение -разность электрич. потенциалов, прикладываемая к клеммам электролизера. 3) Плотность тока. Электродная плотность тока выражается отношением тока к площади пов-сти контакта электрода сэлектролитом, на к-рой происходит электродный процесс
Электрофорез с иммунофиксацией (JFE) - это двухступенчатый процесс, использующий электрофорез протеинов на первом этапе и иммунопреципитацию на втором. При этом исследованию может быть подвергнута сыворотка крови, моча, спинномозговая или другая жидкость организма. Электрофорез с иммунофиксацией - один из современнейших методов в кинической лаборатории для получения характеристик моноклональных иммуноглобулинов. Моноклональная гаммопатия характеризуется неконтролируемой пролифирацией одного клона плазменных клеток за счет других клеток. Эта дисфункция часто приводит к синтезу большого количества одного иммуноглобулина или его субъединицы со снижением нормальных уровней иммуноглобулинов. При этом на электрофореграмме выявляется один резко увеличенный пик в бета-гамма-области.
16. Методы меченых атомов
Меченые атомы (изотопные индикаторы) содержат изотопы, которые по своим свойствам (радиоактивности, атомной массе) отличаются от других изотопов данного элемента. Их добавляют к химическому соединению или смеси, где находится исследуемый элемент; поведение меченых атомов характеризует поведение элемента в исследуемом процессе. В качестве меченых атомов используют как стабильные (устойчивые) изотопы, так и радиоактивные (неустойчивые) изотопы. Для регистрации радиоактивных меченых атомов применяют счетчики, ионизационные камеры; нерадиоактивные изотопы регистрируют с помощью масс-спектрографов. позволяют проследить круговорот какого-либо элемента в природе, в процессе обмена веществ в организме, в химических реакциях, в производственных процессах.