Емкость

Емкость хроматографического сорбента для РЦП может быть рассчитана определением «емкость проскока». Эта величина представляет собой максимально допустимое количество материала, которое хроматографический сорбент может адсорбировать до того, как материал пройдет через весь его слой при используемых условиях разделения, т.е. при используемых рН, ионной силе, концентрациях нежелательных веществ. Емкость на единицу объема сорбента ограничивается площадью поверхности сорбента, пространственно адаптированного к РЦП и концентрации лиганда.

Целевой продукт может быть потерян при очень высоких нагрузках, и, поэтому, рекомендуется проверить зависимость выделения активного материала от нагрузки. Кроме того, поскольку форма пика обычно становится более асимметричной при высоких нагрузках, т.е. наблюдается хвост, это будет снижать степень разделения. В таком случае более целесообразным будет работать при немного меньшей нагрузке. Симметричные пики обычно наблюдаются при нагрузке колонки до 30% максимальной емкости.

В заключение следует отметить, что наиболее выверенный способ определить емкость заключается в использовании стандартного потока РЦП (включая примеси) для получения 5%-ного уровня проскока. Затем проверяют величину извлечения продукта, рассчитывают массовый баланс для гарантии количественного выделения при выбранных условиях. Необходимо также учитывать изменения свойств потока РЦП.

Производительность.

Проскок равен количеству очищенного продукта за единицу времени, а производительность является проскоком, отнесенным к объему хроматографического сорбента (т.е. г на л за 1 час).

Важным является оптимизация этой зависимости на разных стадиях, т.е.

(а) подбор хроматографического сорбента с максимальной емкостью, деленную на объем сорбента;

(б) выбор условий, максимально увеличивающих относительное извлечение и

(в) максимальное увеличение разрешение за время одного цикла.

Время, затрачиваемое на нанесение пробы, на отмывку, чистку колонки и регенерацию, снижает производительность.

Для оптимизации разных стадий разделения существенным является основное понимание разных традиционно используемых методов и их практических преимуществ и ограничений. Например, использование гранул малого размера может в некоторых случаях быть полезным благодаря пониженному коэффициенту разброса и менее полезным в других случаях вследствие пониженной емкости, обусловленной малой площадью внутренней поверхности.

16