Транспорт и метаболизм связанного билирубина

БР-ГК активно против градиента концентрации перемещается через мембраны гепатоцитов в желчь с помощью специальных полиферментных систем (при их недостатке - синдром Дабина-Джонсона и Ротора) → поступление БР-ГК в просвет тонкого кишечника → превращение БР-ГК в свободный БР → мезоБР →мезобилиноген→уробилиноген →

частично всасывается через слизистую тонкого кишечника → поступает в печень → возвращение вместе с желчью в просвет тонкого кишечника (энтеро-гепатальный круговорот).

N.B! Уробилиноген в общий ток кровообращения (и в мочу) в норме не попадает (подвергается распаду в печени с образованием дипирролов). Появление уробилиногена в моче является ранним (доклиническим) признаком поражения паренхимы печени.

Распад уробилиногена

вкишечнике

Впросвете толстого кишечника уробилиноген восстанавливается в стеркобилиноген под действием кишечной флоры (при подавлении кишечной флоры антибиотиками, СА и другими препаратами этот процесс нарушается) → большая часть превращается в стеркобилин и выделяется из кишечника с калом → некоторое количество стеркобилиногена всасывается через слизистую оболочку толстого кишечника, попадая в систему нижней полой вены, минуя печень идет в почки и выделяется с мочой.

N.B! В норме в моче содержится стеркобилиноген (за сутки выделяется 1-6 мг у взрослых). Используемые в КДЛ методы не позволяют дифференцировать стерко- и мезобилиноген. Поэтому о наличии мезобилиногена в моче судят по возрастанию общего количества экскретируемых с мочой пигментов и с учетом клиники

Определение уровня билирубина

Клинические показания:

1.Выявление увеличенного содержания БР в тех случаях, когда при осмотре больного желтуха не выявляется или ее наличие вызывает сомнение.

2.Объективная оценка степени билирубинемии.

3.Дифференциальная диагностика различных видов желтух.

4.Оценка течения заболевания путем повторных исследований.

Определение билирубина – преданалитический этап

Липемия и гемолиз сыворотки искажают материалы исследования. Липемия приводит к ошибочно завышенному результату. Гемолиз сыворотки – ошибочно заниженные результаты.

Материал нельзя держать на свету. Воздействие прямого солнечного света уже к исходу первого часа может снижать на 50% уровень БР(на этом основано фотолечение новорожденных).

Проба должна анализироваться в течение 2 часов с момента взятия при хранении при комнатной температуре в темноте, или в течение 12 часов при хранении в холодильнике в темноте.

Выражена интерференция лекарств - на общий БР- левомицетин, тетрациклин, аспирин, акрихина (за счет гемолиза), на конъюгированный БР - препараты, вызывающие холестаз: никотиновая кислота, а также пенициллин, эритромицин, СА, пероральные контрацептивы, эстрогены, андрогены, инсулин и др.

Общий БР в сыворотке крови

Норма -3-20,5 мкмоль/л.

Метод Индрашика – цветная реакция с диазофенилсульфоновой кислотой (диазореактивом).

Прямые спектрофотометрические методы (λ=450нм) применяются как экспресс-методы для диагностики гипербилирубинемий новорожденных (у взрослых -интерференция небилирубиновых пигментов сыворотки (каротиноидов).

Неконъюгированный БР (гидрофобное вещество) дает трудную – непрямую реакцию с диазореагентом. Поэтому его называют непрямой. Конъюгированный БР (хорошо растворим в воде) дает быструю прямую реакцию с диазореактивом и называется прямой билирубин.

N.B! Неконъюгированный БР = непрямой БР Конъюгированный БР = прямой БР

Определение конъюгированного и неконъюгированного БР

Прямой (конъюгированный) БР в сыворотке –норма – 0-3,4 мкмоль/л – определяют в прямой реакции с диазореактивом (розово-фиолетовое окрашивание). Позволяет проводить дифдиагностику желтух. Повышается при паренхиматозной и механической желтухе (одновременно несколько повышается и неконъюгированный). При гемолитической – не изменяется.

Непрямой (неконъюгированный) БР определяют расчетным путем - общий минус прямой. Норма – 3,4- 16 мкмоль/л (составляет 75% от общего). Играет важную роль в диагностике гемолитических анемий.

Зависимость выраженности желтухи от концентрации БР

Конъюгированный и неконъюгированный БР обладают интенсивно красящей способностью. Появление желтухи отмечается при уровне БР 34 мкмоль/л и более. При концентрации общего БР до 85 мкмоль/л – легкая желтушность, 86- 169 – средне-тяжелая, 170 и более – тяжелая.

Определение содержания билирубина в моче

1)Качественные пробы (БР под действием окислителя превращается в изумрудно-зеленый биливердин). Проба Розина – наслаивают спиртовой раствор йода на мочу → при наличиии БР на границе – зеленое кольцо. Проба Гаррисона-Фуше – мочу смешивают с хлоридом бария, перемешивают, фильтруют, затем на фильтр наносят 2-3 кп реактива Фуше (водный раствор ТХУ с хлорным железом) → зеленое пятно.

2)Полуколичественные методы - сухая химия.

Норма – БР не определяется. Увеличение – при паренхиматозных и обтурационных желтухах (БР-ГУ).

Определение содержания уробилиноидов в моче

Нормальные уробилиноиды в моче – это стеркобилиноген.

1)Качественные – проба Флоранса, проба Богомолова

Норма: следы уробилиноидов – у взрослых до 6мг/сут стеркобилиногена, у детей – до 2 мг/сут.