Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Лекции по биофизике

.pdf
Скачиваний:
102
Добавлен:
12.02.2015
Размер:
12.59 Mб
Скачать

Ингибиторный анализ

Источник

Детектор

Контроль

радикалов

радикалов

 

 

 

Источник

Ингибитор

Детектор

 

радикалов

Опыт

радикалов

радикалов

 

 

 

 

Пример 1

Ксантиноксидаза (генератор супероксида)

Цитохром с (детектор супероксида)

Ксантиноксидаза

Цитохром с

(генератор супероксида)

(детектор супероксида)

Супероксиддисмутаза (перехватчик супероксида)

Пример 2

 

Измерение

Индукторы

диеновых

ПОЛ

конъюгатов

 

 

 

 

 

Измерение

Индукторы

 

Антиоксиданты

диеновых

ПОЛ

конъюгатов

 

 

 

Антиоксиданты, и способы их изучения

Кафедра общей и медицинской биофизики А.Н. Осипов

2014

Антиоксиданты - соединения, тормозящие процессы оксидативного стресса

Оксидативный стресс - процесс, повреждения биологических структур, протекающий с участием свободных радикалов и/или активных форм кислорода

Процесс последовательного одноэлектронного восстановления молекулы кислорода:

Fe2+

O-O HO-O• HO-OH HO• H2O

(RO-O) (RO-OH) (RO•)

 

Перехватчики

 

радикалов

Антиоксидантные ферменты

Хелаторы металлов

Антиоксидантная система водной фазы

Доноры электронов (восстановители, митохондрии)

е- ОО-

О2 ОО-

Fe3+

НОН О2

Каталаза

Супероксиддисмутаза

НООН

Fe2+ Fe3+

Хелаторы

НО

Инициация

ПОЛ

металлов

 

 

Антиоксиданты могут предотвращать окисление, реагируя с водорастворимыми радикалами или их предшественниками. Такие антиоксиданты называются - антиоксидантами водной фазы (АВФ). Супероксиддисмутаза, каталаза и хелаторы ионов железа, а также карнозин относятся к классу АВФ.

Процесс последовательного одноэлектронного восстановления молекулы кислорода:

Fe2+

O-O HO-O• HO-OH HO• H2O

(RO-O) (RO-OH) (RO•)

СОД

Метаболизм супероксида в биологических системах

HO2

СОД

O2

Каталаза + Глутатион-пероксидаза

H2O

H2O2

H2O

GSH

GSSG

Глутатион-редуктаза

НАДФ

НАДФН

Глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназа

Супероксиддисмутаза

Супероксиддисмутаза (СОД) - единственный известный в настоящее время фермент, субстратом которого являются свободные радикалы.

Супероксиддисмутаза катализирует следующую реакцию:

2HO2O2 + H2O2

Фермент, обнаруженный МакКордом и Фридовичем, имеет молекулярную массу 32 кД и состоит из двух субъединиц, каждая из которых содержит по одному атому Сu и одному атому Zn:

Сu2+

Сu2+

Zn2+

Zn2+