Глава 2. Материалы и методы. Материалы:

Контрастные средства:

1) Примовист

Действующее вещество: гадоксетовая кислота (Gadoxetic acid). Состав и форма выпуска: раствор для внутривенного введения 1 мл динатриевая соль гадоксетовой кислоты (Gd-EOB-DTPA)181,430 мг (соответствует концентрации 0,25 ммоль/мл)

 вспомогательные вещества: калоксетовой кислоты тринатриевая соль; трометамол; хлористоводородная кислота; натрия гидроксид; вода для инъекций.

Форма выпуска: предварительно наполненных шприцах из бесцветного стекла типа 1 (Евр.Фарм. или USP) объемом 10 мл с наполнением 10 мл.

2) Гадовист

Действующее вещество: гадобутрол* (Gadobutrol*) Состав и форма выпуска: раствор для внутривенного введения (1 ммоль/мл)

1 мл гадобутрол 604,72 мг

вспомогательные вещества: калкобутрол натрия; трометамол; хлористоводородная кислота (0,1 М); вода для инъекций.

Форма выпуска: в стеклянных шприцах по 7,5 мл; в герметичном контейнере из ПВХ и ламинированной бумаги 1 шприц.

3) Магневист

Действующее вещество: гадопентетовая кислота* (Gadopentetic acid*) Состав и форма выпуска: раствор для внутривенного введения 1 мл гадопентетат димеглумина 469,01 мг (соответствует 0,5 ммоль/мл)

вспомогательные вещества: меглумин; пентетовая кислота (ДТПА); вода для инъекций

Форма выпуска: флакон 20 мл.

Реактивы:

Натрия хлорид раствор для инфузий 0,9%. Концентрация  натрия (Nа+) - 145 ммоль/л ; концентрация хлорида (Сl-) - 101 ммоль/л («Биосинтез»,Россия).

Бычий сывороточный альбумин кристаллизованный в концентрации (2,4,6 г/дл).

Билирубин (С₃₃Н₃₆N₄O₆) («Риахим», Россия)- взяты навески 0,001г

Методы:

Методика получения МРТ изображения

Технические характеристики томографа:

Данное исследование проводились на магнитно-резонансном томографе «MAGNETOM Verio» (рис. 7) с напряженностью поля 3Тл (фирма «Siemens»).

Сверхпроводящий магнит с центральным отверстием. Диаметр круглого отверстия 70 см.

32 - канальная Tim (Total imaging matrix) технология, благодаря которой формируется единая виртуальная катушка.

Tim - передовая технология организации радиочастот­ного тракта, повышающая как диагностическое качество изображений, так и клиническую производительность.

Система электрооборудования - источник питания, блок фильтров, градиентные катушки и щит питания.

Радиочастотный комплекс –передатчик РЧ - импульсов, передающая катушка и РЧ – приемник.

Система управления – блок радиоэлектроники, блок управления и видеоадаптер.

Система экранирования.

Длина магнита 173 см.

Вес 6300 кг.

Магнит с нулевым показателем испарения гелия не требует регулярного пополнения запаса этого дорогостоящего вещества, при этом система готова к работе постоянно.

Рисунок 7. Внешний вид МР томографа «MAGNETOM Verio»

Syngo- это программно-аппаратный комплекс, который представляет собой мультимодальную станцию для просмотра, анализа и объемного представления данных МР исследования .

Средства МР просмотра – используется для просмотра изображения и работы с ним. В окне просмотра может содержаться одно большое изображение, оно также может быть разбито на несколько кадров для одновременного просмотра нескольких изображений. Изображение можно загрузить с любого локального или удаленного устройства хранения данных. С изображением или группой изображений можно работать индивидуально при помощи таких функций, как изменение масштаба и настройка окна. Кроме того, можно прокручивать изображение и создавать снимки.

Для исследования применялась аксиальная проекция, так как это дает максимальное количество одинаковых срезов и позволяет полностью прорезать пробирку, что исключает сомнения в негомогенности полученного образца. Все результаты были обработаны в программе Statistica.

Регламент эксперимента.

Главной задачей эксперимента было сравнение контрастных средств. Все эксперименты проходили в одинаковых условиях при одинаковой комнатной температуре 24 градуса.

Каждая серия измерений Т1(табл. 2) повторялась по 8 раз, что дало возможность проверить достоверность данного эксперимента. Все пробирки, использованные в эксперименте на 4 мл, содержание их было 2мл, диаметр пробирок по 10мм, что позволяет точно визуализировать изображение (Рис. 3).

В первой серии были проверены все контрастные средства при их исходных концентрациях в разведении на воде для инъекции. Все полученные R1 (это релаксирующая способность МРКС влияет на времена релаксации протонов, нормированная на концентрацию МРКС вычисляется по формуле ((1/Т1с МРКС – 1/Т1 без МРКС)/(1/концентрацию))), соответствовали приведенных в литературе, что говорит о качественности и подлинности тех контрастных средств, которые использовались.

Рисунок 8. Внешний вид пробирок

Для первой серии были взяты все средства в исходных концентрациях и разведены в 10, 100, 1000 и 10000 раз и одна пробирка была контроля.

В следующей серии были взяты контрастные средства в исходных концентрациях и доведены были до одинаковой концентрации, для этого потребовалось развести Магневист в 2 раза, а Гадовист в 4 раз. Затем так же как и в предыдущей серии все контрастные средства были разведены в 10,100,1000 и 10000 раз. Таким образом, мы получили концентрации исследуемых средств 25, 2,5, 0,25 и 0,025 ммоль/л. Затем вместо воды для инъекции контрастные средства развели в физиологическом растворе, содержащим белок - сывороточный альбумин. Для изучения концентрационной зависимости белок был взят в трех различных концентрациях: 20,40 и 60 г/л.

В последней серии эксперимента в пробирки с содержанием белка в концентрации 40 и 60 г/л, был добавлен билирубин в количестве 0,001г (что составляет 160 мкмоль/л - рассчитано на пробирку 2мл).

В ходе эксперимента были использованы следующие импульсные последовательности для оценки эффективности контрастных средств.

Т1 –взвешенное изображение с помощью импульсной последовательности спин-решетчатой релаксации, которая реализована в томографе как Т1-anatomical,для измерения сигнала Т1 в конкретной точке.

Т2 –взвешенное изображение с помощью импульсной последовательности мульти спин-эхо, которая реализована в томографе как Т2-anatomical,для измерения сигнала Т2 в конкретной точке.

Параметры использованных импульсных последовательностей представлены в таблице 2.

Таблица 2. Основные параметры исследованных импульсных последовательностей.

Методика обработки МРТ изображений В качестве инструмента для визуализации МРТ изображений и измерений исследуемых характеристик использовался программный пакет Syngo. Syngo-прикладная компьютерная программа, разработанная компанией Siemens. Продается со всей продукцией Siemens и не реализуется свободно. Имеет обширный арсенал возможностей работы с изображением: Для открытия серии изображений, полученных с томографа MAGNETOM Verio, необходимо выбрать пункт в меню «File/Import/Image Sequence», далее открываем подкаталог с реконструированными изображениями нашего файла. Для вычисления интересующих параметров использовался метод полуавтоматической сегментации. Сперва производится разделение серии на отдельные изображения «Image/View/Stripe». Далее отбирались изображение, которые захватывали центральные части пробирки. Затем во вкладки Tools выбиралась окружность, как зона измерения, в каждой пробирки было измерено 0,13 квадратных сантиметров. Автоматически программа выдавала подсчитанный сигнал Т1 и стандартное отклонение в выделенной зоне на выбранном срезе (см. схема 1).