- •По форме выделяют следующие основные группы микроорганизмов.
- •Методы окраски
- •Клеточные стенки прокариот
- •Техника окрашивания
- •Метод выявления капсулы по Бурри-Гинса
- •Ворсинки (фимбрии, пили)
- •Микроскопия в тёмном поле.
- •Фазово-контрастная микроскопия.
- •Окраска по методу Циля-Нильсена
- •Цпм и Цитоплазма
- •Метод окраски по Нейссеру
- •Метод Ожешки
Метод окраски по Нейссеру
Фиксированный мазок окрашивают уксуснокислой синей 4 мин, затем сливают краску.
Промывают водой и наливают раствор Люголя на 20-30 сек.
Не промывая водой, окрашивают везувином 1-3 мин.
Промывают водой, высушивают.
Тела бактерий окрашиваются в нежный светло-коричневый цвет, зерна волютина - в темно-синий, почти черный цвет.
Споры
Спорообразующие палочки называются бациллами.
Споры бактерий представляют собой бактериальные клетки в состоянии анабиоза и образуются при неблагоприятных условиях внешней среды (располагаются внутри клетки терминально, субтерминально или центрально).
В процессе спорообразования клетка почти полностью теряет воду, сморщивается, клеточная стенка уплотняется. Появляется новое вещество – дипиколинат кальция, которое образует комплексы с биополимерами клетки, устойчивые к действию температуры и ультрафиолетовых лучей. В окружающей среде споры бактерий могут сохраняться годами, но при попадании в благоприятные условия спора впитывает влагу, комплексы распадаются, дипиколинат разрушается, и спора превращается в вегетативную клетку.
Таким образом, спору следует рассматривать не как способ размножения, а только как форму существованиябактериальной клетки в неблагоприятных условиях. При этом преобразования идут по следующей схеме: 1 клетка – 1 спора – 1 клетка, и увеличения количества бактериальных клеток не происходит.
Спорообразование характерно в основном для грамположительных бактерий. У грамотрицательных бактерийэквивалентом спорообразования является переход в так называемое некультивируемое состояние. В такой форме они также длительно сохраняются в окружающей среде.
При использовании окраски по Граму споры красители не воспринимают, поэтому на окрашенном фоне они бесцветны.Окрашиваются споры с помощью специальных методов окраски, например, по Ожешко или Клейну.
Метод Ожешки
На нефиксированный мазок наливают 0,5 % раствор соляной кислоты и подогревают над огнем 1 -- 2 мин. С препарата сливают кислоту, тщательно промывают проточной водой, высушивают и после высыхания фиксируют на пламени. Фиксированный препарат окрашивают по методу Циля -- Нильсена.
Результат: тела бактерий окрашиваются в синий цвет, споры -- в красный.