16

Занятие № 23

МИКОБАКТЕРИИ. АКТИНОМИЦЕТЫ. ЛИСТЕРИИ

Микробиологическая диагнос тика туберкулеза, проказы, актиномикоза, листериоза

Общая характеристика микобактерий

Отличия микобактерий от других прокариот:

Микобактерии составляют особую группу прокариот, которая отличается от других бактерий следующими основными свойствами:

• кислото-, спирто- и щелочеустойчивость

• высокое (до 60%) содержание в клеточной стенке липидов

• очень медленный рост

Кислотоустойчивость микобактерий:

Обуславливается высоким содержанием липидов в клеточной стенке. На этом свойстве основана дифференцирующая микобактерии от других прокариот окраска их по Цилю-Нильсену в розовый цвет. Вместе с тем необходимо иметь в виду, что встречаются и кислотоподатливые (окрашивающиеся по Цилю-Нильсену в синий цвет) микобактерии.

Возбудители туберкулеза Туберкулезная палочка

Классификация:

Отдел: Firmicutes

Порядок: Actinomycetales

Семейство: Mycobacteriaceae

Виды:

1. M. tuberculosis

1. M. bovis

1. M. africanum.

Морфологические свойства:

Окраска по Граму	Грамположительные (этот метод окраски применяется в данном случае редко из-за плохого восприятия микобактериями анилиновых красителей)
Форма	Тонкая и стройная («швейная игла») прямая или слегка изогнутая палочка. Обладает большим полиморфизмом. В старых культурах наблюдаются нитевидные, ветвящиеся формы, нередко – зернистые (зерна Муха); в организме больных под влиянием химиопрепаратов часто образуются ультрамалые формы, способные проходить через бактериальные фильтры («фильтрующиеся формы»)
Размер
Эндоспора	Не образует
Макрокапсула	Не образует
Жгутики	Атрих
Расположение в мазке	В мазках из патологического материала располагается преимущественно одиночно
Другие морфологотинкториальные особенности	Кислото-, спирто- и щелочеустойчивость

Культуральные свойства:

Питательные потребности	Сложные (используются среды преимущественно на яичной основе или картофельно-глицериновые)
Оптимальная температура	37оС
Условия аэрации	Любые
Скорость роста	Растет очень медленно (одно деление клетки происходит за 14-18 часов), поэтому вывод об отрицательном результате при выделении туберкулезной палочки из питательного материала можно сделать лишь после трехмесячного культивирования. На жидких средах вырастают за 5 - 7 дней, на плотных - в течение 14 - 40 суток.
Характер роста	а) на жидких средах - морщинистая пленка; б) на плотных средах - R-формы колоний (похожие на бородавки или цветную капусту) с желтым пигментом
Селективная питательная среда	Лучшей средой считается свернутая среда Левенштейна-Йенсена в разных модификациях (включает картофельный экстракт, различные соли, яйца, глицерин и малахитовый зеленый как агент, ингибирующий рост контаминирующей микрофлоры)

Биохимические свойства: основной биохимический тест, используемый для идентификации – ниациновая проба.

Серологические свойства:

Антигенами являются

1. Туберкулин (белок).

2. Полисахариды.

3. Фосфатиды.

4. Корд-фактор

Антигены всех видов микобактерий схожи между собой, вследствие чего серологический метод их идентификации практически не используется.

Факторы патогенности:

1. Сульфатиды (серосодержащие гликопротеиды):

• снижают активность фагоцитов

• усиливают действие корд-фактора

• ингибируют фагосомо-лизосомальное слияние в фагоцитирующих клетках

2. Корд фактор (гликолипид, располагающийся на поверхности и в толще клеточной стенки) - главный фактор патогенности, лишенные его туберкулезные палочки являются непатогенными или слабопатогенными для человека:

• поражает мембраны митохондрий (в том числе макрофагов), блокируя в них процессы окислительного фосфорилирования

• тормозит миграцию фагоцитов

3. липиды:

• оказывают повреждающее действие на ткани

• обуславливают кисло-, спирто- и щелочеустойчивость микобактерий

• обуславливают высокую устойчивость микобактерий к другим факторам внешней среды

4. белки (составляющие основу туберкулина):

• вызывают сенсибилизацию организма

• оказывают повреждающее действие на ткани.

Токсические липиды:

Состоят из:

• нейтральных жиров,

• восков,

• стеринов, фосфатидов,

• жирных кислот (фтиоидной, миколовой, туберкулостеариновой, пальмитиновой),

• корд-фактора.

1. Фосфатидная фракция (содержит фтиоидную кислоту) - наиболее активная из всех липидов. Вызывает специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидных клеток.

2. Жировая (нейтральные жиры) фракция (также содержит фтиоидную кислоту). Вызывает образование туберкулоидной ткани.

3. Восковая фракция (содержит миколовую кислоту). Вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток.

Резистентность во внешней среде:

Устойчивы во внешней среде. При кипячении погибают через 5 минут. Прямой солнечный свет убивает их в течение часа. Химические дезинфектанты по отношению к микобактериям малоэффективны (5% раствор фенола убивает их только через 5 - 6 часов). 0,05% раствор бензилхлорфенола убивает микобактерии через 15 минут.

Туберкулезная палочка способна вырабатывать устойчивость ко многим антибактериальным средствам.