Глава 2

ПЕПТИДЫ И СИСТЕМА ИММУНИТЕТА

Многочисленные наблюдения за пожилыми пациентами показывают, что большинство заболеваний, связанных с возрастом, характеризуются ослаблением иммунной системы в процессе старения [23, 24, 33, 36, 43, 56]. Снижение гуморального и клеточного иммунитета делает пожилых людей более чувствительными к инфекциям, аутоиммунным патологиям и канцерогенезу [34, 40]. Частота этих заболеваний и уровень смертности данной группы резко возрастают. Так, смертность от рака различной локализации у мужчин 60 лет и старше в 80.9 раза выше, чем у 20—29 летних [4]. Люди пожилого и старческого возраста в 5—6 раз чаще болеют хроническим бронхитом, пневмококковой пневмонией, гриппом, вызванным вирусом А, столбнячными инфекциями [28, 38, 51]. Наибольшая частота бронхо-легочных заболеваний приходится на возрастной период шестого и седьмого десятилетия, а летальный исход чаще наблюдается в периоде восьмого десятилетия и обусловливается в основном присоединяющимися осложнениями [9]. При этом инфекция не играет ключевой роли в развитии патологии. Основным фактором, определяющим возрастное снижение активности иммунной системы является инволюция тимуса [41, 42, 45].

2.1. Роль тимуса в развитии клеток имунной системы

Тимусу и костному мозгу принадлежит основная роль в развитии клеток иммунной системы. Образовавшиеся из стволовых клеток костного мозга предшественники Т-лим-фоцитов мигрируют в тимус для созревания. Тут происходит ^пРоцессинг лимфоцитов, включающий отбор клеток и их клонов, которые распознают молекулярные конфигурации,

39

значимые для защиты организма, и выбраковка аутореактив-ных клонов. Затем лимфоциты дифференцируются на две субпопуляции: Т-хелперы и Т-киллеры. Процесс созревания Т-лимфоцитов сопряжен с перемещением тимоцитов по компартментам тимуса и взаимодействием с клетками микроокружения [19].

Зрелый тимус покрыт снаружи соединительной капсулой, от которой внутрь отходят перегородки (септы), разделяющие тимус на дольки. Капсула и отходящие от нее септы построены из плотной волокнистой соединительной ткани. Внутри эпителиального каркаса располагаются тимоциты. В дольке зрелого тимуса различают корковый и мозговой слои.

Корковый слой представляет собой эпителиальную ткань сетчатого строения. В субкапсулярном корковом слое располагаются активно делящиеся лимфобласты (ранние проти-моциты). Окружение лимфобластов коркового слоя составляют дендритные эпителиальные клетки, продуцирующие тимозины, тимопоэтин и большое количество молекул главного комплекса гистосовместимости II класса. Кроме того, в корковом слое можно выделить несколько особых вариантов эпителиальных клеток [2]:

• секреторные клетки, вырабатывающие тимозин, тимо поэтин и тимусный сывороточный фактор;

• клетки-няньки, изолирующие делящиеся тимоциты от

окружающих клеток;

— переваскулярные клетки, которые служат элементом гематотимического барьера и защищают созревающие тимо циты от антигенов циркулирующей крови.

Протимоциты начинают свое развитие в верхней части коркового слоя тимуса. Утрачивая дифференцировочный антиген CD1, они приобретают способность к экспрессии CD3, CD4 и СО8-антигенов. Так образуются «тройные положительные клетки» (CD3+, CD4⁺, CD8⁺). Продвигаясь ближе к мозговому слою, они подвергаются последовательно положительной селекции (выживание клеток, способных распознавать собственные белки главного комплекса гистосовместимости) и отрицательной селекции (гибель клеток к собственным антигенам). Погибшие путем апоптоза тимоциты элиминируются макрофагами. Дальнейшая дифференци-ровка тимоцитов на две субпопуляции CD3+, CD4⁺, CD8" (экспрессирующие рецепторы Т-хелперов) и CD3⁺, CD4~, CD8⁺ (экспрессирующие рецепторы Т-киллеров) протекает в мозговом веществе тимуса. Особенностью мозгового слоя являются слоистые эпителиальные тельца Гассаля, образо-

ванные концентрическими наслоениями эпителиальных

клеток.

Регуляция функций тимуса осуществляется вырабатываемыми эпителиальными клетками нейропептидами и рядом не связанных уникальных тимусных гормонов (тимопоэтин, тимулин, тимозины и др.), которые управляют некоторыми ступенями интра- и экстратимусной дифференцировки Т-клеток (табл. 1). Кроме того, под действием нейропепти-дов и пептидных гормонов, а также при взаимодействии тимусных эпителиальных клеток и тимоцитов продуцируется специфический набор цитокинов, играющий важную роль в развитии Т-лимфоцитов [50].

2.2. Возрастные изменения иммунной системы и их коррекция

Начиная с первого года жизни тимус млекопитающих постепенно претерпевает измения, выражающиеся в экспоненциальном уменьшении массы органа за счет коркового и в меньшей степени мозгового слоев с замещением их соединительной и жировой тканью. Имеются данные о том, что замещение паренхимы тимуса жировой тканью представляет собой непрерывный процесс, достигающий максимума у людей в возрасте около 50 лет и более уже не прогрессирующий. Более того, количество нежировой ткани в тимусе может больше не снижаться после достижения 30-летнего возраста. При этом исчезают тельца Гассаля, нарушается правильное расположение эпителиальных клеток, уменьшается общее число лимфоцитов, накапливаются макрофаги, содержащие различные включения и обломки клеток, плазматические и тучные клетки. Клеточное микроокружение тимуса у человека До достижения среднего возраста уменьшается на 3—5 % в год, а затем менее чем на 1 % ежегодно. Методами электронной микроскопии на мышах было показано, что на поздних стадиях (мыши в возрасте 18—20 месяцев) наблюдаются исчезновение органной архитектуры и резкое снижение количества лимфоцитов тимуса. Отмечена потеря клеточной целостности микроокружения с лизисом клеточных мембран и формированием большого и просветленного цитоплазмати-ческого слоя, захватывающего немногие остающиеся лимфо-Циты. Многочисленные липидные включения, окружающие °ставщиеся эпителиальные клетки, группируются в округлые образования и/или граничат с полостями, которые при-

41

40

сутствуют в тимусах старых мышей. Показано, что необратимые измениения клеток тимусной микросреды играют ключевую роль в возрастной дисфункции тимуса [48, 53].

С возрастом изменяются характер и ультраструктура секреторных клеток и лимфоцитов [19]. Падает уровень тимус -ных гормонов, циркулирующих в крови и оказывающих выраженное влияние на развитие и функционирование Т- и В-лимфоцитов, а также на различные виды иммунологических реакций. С 20-летнего возраста в сыворотке человека начинается постепенное снижение тимического сывороточного фактора, завершающееся его полным исчезновением к 50—60 годам. В отличие от этого, уровень тимозина-la и ти-мопоэтина, по-видимому, падает значительно раньше. Этот процесс начинается с 10-летнего возраста [19].

Возрастное истощение иммунной системы в первую очередь проявляется как в уменьшении общего количества Т-лимфоцитов, так и в развитии существенных изменений в функционировании и фенотипическом профиле Т-кле-ток. Одним из наиболее существенных возрастных изменений в популяции Т-клеток является дисбаланс их соотношения: снижение доли естественных Т-клеток и увеличение доли сопутствующих Т-клеток, обладающих иммунной памятью.

Снижению иммунной функции Т-клеток способствуют дефекты стволовых клеток, инволюция тимуса, дефекты в вырабатывающих антигены клетках, старение покоящихся иммунных клеток, репликативное истощение клонально размножающихся клеток [22, 49].

Следует отметить, что быстрая регрессия тимуса наблюдается у молодых пациентов, получающих химиотерапев-тическое лечение и жесткое радиационное облучение. Наблюдаемые клинические проявления этого синдрома имеют сходство с возрастной инволюцией тимуса: снижение уровня нейрогуморальных медиаторов, вырабатываемых интрати-мическими клетками автономной нервной системы, снижение цитокинового профиля и хемоаттрактантов, контролирующих наполнение пула пре-Т-лимфоцитов, их рост и диф-ференцировку [25, 26, 39].

На мышах линии C57BL/6 было показано, что длительный стресс также вызывает снижение массы тимуса, активности естественных киллеров, снижение выработки интер-лейкина-2 и увеличение интерлейкина-1. Наблюдается дисбаланс в соотношении Т-хелперных и Т-киллерных клеток с уменьшением количества последних [44].

42

Инволюция тимуса влечет за собой тяжелые последствия _в функционировании иммунной системы, но ни в коей мере не является необратимым феноменом. Различные нейроэн-докринные манипуляции (интратимическая имплантация пинеальной железы или обработка мелатонином, имплантация клеточных линий, продуцирующих ростовые факторы, кастрация или введение LH-RH, введение экзогенного тироксина или трииодотиронина) и диеты (применение пищевых добавок, содержащих аргинин и цинк) могут восстанавливать тимус даже на поздних этапах развития патологии [29, 30]. Современными иммуноцитохимическими методами показано, что фактор роста нервов (полипептид с известной нейротрофической активностью) продуцируется клетками тимуса и вовлекается в пролиферацию, рост и созревание клеток иммунной системы. Его концентрация максимальна в пренатальном периоде и убывает в соответствии с возрастными изменениями [54]. Такая же закономерность обнаружена ранее для тимусных пептидных гормонов и окситоцина, продуцируемого тимусными эпителиальными клетками (ТЭК) [27, 47]. Поэтому, хотя механизм инволюции тимуса неясен, очевидно, что в его основе лежит ослабление нейро-эндок-ринных взаимодействий [34, 35].

Участие нейрогуморальных пептидных факторов, вырабатываемых клетками тимусного микроокружения в процессах гемопоэза и формировании иммунного ответа, послужило предпосылкой к созданию на их основе лекарственных препаратов.

Впервые биологические регуляторы, оказывающие влияние на защитные функции организма, гемопоэз и репроду-тивную систему, были получены методом кислотной экстракции из тимуса и эпифиза [1, 12]. Выделенные препараты содержали комплекс пептидов с молекулярной массой до 10 кДа, включающий, вероятно, нейропептиды, тимусные гормоны, цитокины и продукты их энзиматического гидролиза.

Комплексные препараты тимуса в экспериментах in vitro способствовали приобретению клетками-предшественниками мембранных маркеров зрелых Т-клеток. При иммуноде-фицитных состояниях, вызванных действием ионизирующего излучения, лучевой и химиотерапии у онкологических больных, введение пептидных препаратов тимуса приводило к восстановлению структуры и функций тимуса, увеличению количества и функций клеток тимуса, селезенки и лимфатических узлов [12].

43

Комплексные препараты пептидов эпифиза стимулировали пролиферацию и созревание кортикальных лимфоцитов тимуса, гиперплазию и медуллярную дифференцировку эпителиальных клеток в тимусе и эпителиальных клеток в селезенке мышей.

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии из природного препарата тимуса выделен биологически активный дипептид Glu-Trp, получивший название тимоген. По своей активности на реакции клеточного и гуморального иммунитета, а также на неспецифическую резистентность организма тимоген до 1000 раз превосходит нативную фракцию.

Феномен резкого возрастания биологической активности при переходе от нативных белков к высокоочищен-ным пептидным фрагментам обнаружен для тимопоэтина и его активного сайта пентапептида тимопентина (Arg-Lys-Asp-Val-Tyr) [32], миелопептидов костного мозга [8]. Такие пептиды, вероятно, составляют активные сайты, участвующие во взаимодействии молекулы гормона с поверхностными рецепторами клеток-мишеней. Так, иммуномодулирую-щее действие тимогена на переферические Т-клетки опосредуется увеличением концентрации вторичного мессинджера внутриклеточного циклического ГМФ.

Последние исследования показывают, что регуляторные низкомолекулярные пептиды могут образовываться в результате специфического ферментного расщепления цитокинов, у-интерферона, лимфотоксина-р и некоторых нейропеп-тидов протеиназами плазматической мембраны лимфоид-ных клеток [6]. Обнаружено по крайней мере пять разновидностей таких протеиназ — NEP, AP-N, АР-А, DPP-IVh AD-MP. Их относят к дифференцировочным антигенам, так как они появляются только на определенных стадиях созревания или активации отдельных клеток гемопоэтического ряда. Предполагают, что указанные протеиназы определяют физиологический ответ клетки на меняющиеся внешние условия. Участвуя в образовании и инактивации ростовых факторов и регуляторных пептидов, протеиназы регулируют локальную концентрацию эффекторов на поверхности клетки. Катализируя образование рецепторов — определяют порог чувствительности «акцепторной системы». Удаляя лиган-ды или лиганд-рецепторные комплексы с поверхности клетки — регулируют продолжительность действия эффектора.

С другой стороны, пептидная химия предоставляет широкие возможности комбинаторного синтеза, что позволяет

44

осуществлять поиск основополагающих структур для новых лекарственных веществ [7]. Таким образом, кроме тимогена на базе анализа аминокислот, активных фракций, входящих в состав природных препаратов тимуса и эпифиза, были сконструированы синтетические пептиды «вилон» — Lys-Gly и «эпиталон» — Ala-Glu-Asp-Gly.

Все три препарата, полученные с помощью химического синтеза, обладали выраженными иммуномодулирующими свойствами, оказывали детоксицирующее и репаративное действие, восстанавливали кроветворение после облучения и химиотерапии [14].

На самцах мышей линии СВА, которым препараты вводили внутрибрюшинно в дозе 0.1 мкг/кг в течение 6 дней, было показано, что тимоген вызывает снижение массы тимуса, селезенки и уменьшает общее число перитониальных макрофагов, не влияя на функции нейтрофилов. Вилон в той же дозе увеличивает массу селезенки и процентное содержание Т-лимфоцитов в ней. При этом он оказывает стимулирующее действие на обе популяции фагоцитов — макрофаги и ней-трофилы. Полученные результаты демонстрируют стимулирующее, но разнонаправленное по механизму действие препаратов на процессы созревания Т-лимфоцитов, заселение ими лимфоидных органов и активацию переферических клеток иммунной системы [3].

2.3. Механизмы иммуномодулирующего действия пептидов

Изучение механизмов действия синтетических пептидов проводили в культурах лимфоидной ткани тимуса и селезенки 1- и 21-дневных крыс, а также в трех монослойных индивидуальных (изолированных) клеточных культурах: тимоци-тах, ТЭК, полученных из абортного материала, и мононукле-арах периферической крови человека.

При культивировании исследуемых тканей с вилоном проявлялись сходные закономерности: вилон угнетающе действовал на рост эксплантантов тимуса и селезенки 1-дневных крыс и усиливал рост эксплантантов 21-дневных крыс. Тимоген действовал подобно вилону и лишь в случае эксплантантов селезенки 1-дневных крыс оказывал выраженное сти-^мУлирующее действие [18].

При сочетанном действии пептидов тимуса с циклофос-фаном, ингибитором синтеза ДНК, выявлено, что тимоген и

45

вилон могут отменять его действие на разных этапах развития ткани. По-видимому, исследуемые пептиды могут служить эффективными агентами для снятия угнетающего влияния иммунодепрессантов.

Можно предположить, что вилон и тимоген регулируют рост культур тканей разного возраста. В условиях изоляции эксплантантов от внешнего нейрогуморального влияния пептиды ограничивают бесконтрольный рост тканей новорожденного животного и восстанавливают рост лимфоидных тканей тимуса селезенки, подавленный в процессе возрастной инволюции [16, 17].

В настоящее время не вызывает сомнений тот факт, что все этапы развития Т-лимфоцитов (начиная от заселения клетками-предшественниками тимуса, формирование на поверхности антиген-распознающих рецепторов, положительная и отрицательная селекция клонов) контролируются посредством контактов тимоцитов с тимусными эпителиальными клетками (ТЭК) и специфическим набором вырабатываемых при этом нейро-гуморальных факторов, включающих интерлейкины и тимические пептиды [37]. Многочисленные исследования показывают, что большинство возрастных патологий, в том числе инволюция тимуса, связаны с изменениями в тимусном микроокружении и часто сопровождаются снижением уровня интерлейкина-7 [21, 46, 52].

Интерлейкин-7 вырабатывается стромальными клетками тимуса (фибробласты, эндотелиальные клетки) в ответ на контактные взаимодействия с кроветворными клетками. Его функциональная роль заключается в стимуляции пролиферации и колониеобразования CD4⁺CD8⁺ — двойных положительных тимоцитов, а также в их дальнейшей диффе-ренцировке, завершающейся образованием CD4+CD8" — единичных положительных клеток [55, 57]. Функции интерлейкина-7 не дублируются другими цитокинами, а удаление 1 ена интерлейкина-7 приводит к опустошению тимуса и развитию тяжелого иммунодефицитного состояния. Введение рекомбинантного человеческого интерлейкина-7 и нативно-го интерлейкина-7 могут восстанавливать атрофию тимуса, увеличивать пул наивных Т-лимфоцитов, обедняющийся в процессе старения [21, 31].

В своей работе мы исследовали действие вилона и эпита-лона на выработку основного гормона тимуса тимулина, а также двух цитокинов, продуцируемых ТЭК, — интерлейки-на-lp и интерлейкина-7 в монокультуре ТЭК и их совмест-

46

ной культуре с тимоцитами, так как контакт с тимоцитами усиливает выработку ТЭК гуморальных продуктов. Было показано, что исследуемые пептиды практически не влияют на спонтанную выработку тимулина, но полностью отменяют ее усиление, вызванное контактом ТЭК с тимоцитами. Напротив, оба пептида существенно усиливают выработку интер-лейкина-ip и интерлейкина-7 в монокультуре ТЭК. Что касается секреции этих цитокинов в ко-культуре ТЭК и тимоцитов, то ингибирующее действие в этих системах проявлял лишь эпиталон. Вероятно, внутритимусные пептиды, в частности вилон, могут выступать в роли физиологических стимуляторов выработки интерлейкина-ip и интерлейкина-7, очень важных для осуществления контроля развития (диф-ференцировки и пролиферации) тимоцитов. В тоже время в отношении тимулина они являются, скорее, ограничителями, сдерживающими чрезмерную выработку этого гормона ТЭК, постоянно контактирующими с тимоцитами.

Кроме того, очень важным элементом функционирования тимуса стареющего организма является сохранение про-лиферативной способности ТЭК. Действие пептидов вилона и эпиталона на их пролиферацию оценивали радиометрически по включению ³Н-тимидина. Клетки ТЭК, выделенные из культуры тимуса ребенка, подвергали 1, 4 и 7 пассажам в присутствии пептидов и без них. Существенного влияния на включение метки в 1-суточные культуры ТЭК 1-го и 4-го пассажей не наблюдалось. Эпиталон в дозах 20 и 200 мг/мл усиливал пролиферацию ТЭК 7-го пассажа. В тоже время, все три испытанные дозы вилона существенно усиливали их пролиферацию. Причем, наиболее выраженный эффект проявлялся при дозе 400 мг/мл. Полученные данные свидетельствуют о способности вилона усиливать пролиферацию ТЭК в «старых» культурах и, таким образом, повышать активность иммунной системы стареющих организмов. С другой стороны, более выраженное влияние вилона на пролиферацию ТЭК подтверждает представления о ткане-специфичности эффекта действия синтетических пептидов тимуса. Ранее, в широком эксперименте на 600 эксплантатах четырех функционально различающихся типах тканей (коры, подкорковых структур головного мозга в области эпифиза, печени и тимуса крыс Вистар) нами было показано, что синтетический пептид мозга кортаген — Ala-Glu-Asp-Pro — Достоверно стимулировал рост только эксплантантов коры головного мозга (140.1 ±4.7 % от контроля), эпиталон — А1а-Glu-Asp-Gly — только подкорковых структур (127.6±3.1 %),

47

ливаген — Lys-Glu-Asp-Ala — только печени (121.1±2.5 %) и вилон — Lys-Glu —только тимуса (115.7±0.4 %) [11]. Таким образом, сконструированные синтетические пептиды возможно обладают тканеспецифическим действием.

Непосредственное влияние синтетических пептидов вилона и эпиталона на предшественники Т-клеток оценивали цитофлуориметрически по экспрессии мембранных молекул CD-69, HLA-DR и CD54 тимоцитами человека в 1-суточной культуре. Кроме того, изучали влияние пептидов на активацию и апоптоз тимоцитов, индуцированные контактом с ТЭК.

Действие обоих пептидов в указанных системах было кон-кордантным. И вилон, и эпиталон усиливали экспрессию на тимоцитах двух изученных молекул активации — HLA-DR и CD54 и ослабляли экспрессию раннего активационного антигена CD69. Действие вилона на экспресию CD54 выражено сильнее. Наоборот, более выраженным эффектом на эксп-• рессию молекул главного комплекса гистосовместимости класса II, HLA-DR, оказывает эпиталон. Известно, что способность клеток тимуса контактировать друг с другом обеспечивает необходимые условия для развития предшественников Т-клеток и выработки нейрогуморальных ре-гуляторных сигналов. Развитие тимоцитов сопровождается повышением их адгезивной способности как в отношении стромальных клеток, так и самих тимоцитов, которые эксп-рессируют интегрин LFA-1. Рецептором последнего является молекула CD54 (ICAM-1). Экспрессия молекул главного комплекса гистосовместимости класса II на поверхности тимоцитов и связанная с ней супрессорная активность, возможно, имеют отношение к регуляции развития предшественников антигенпрезентирующих Т-лимфоцитов.

Полученные данные свидетельствуют о том, что вилон и эпиталон могут оказывать влияние на процессы селекции тимоцитов, индуцируемые контактом с ТЭК. С положительной селекцией предшественников Т-клеток связана экспрессия на поверхности тимоцитов молекулы CD69. К отрицательной селекции имеет прямое отношение апоптоз тимоцитов. В экспериментах с использованием ко-культур клеток тимоцитов и ТЭК нами было показано, что исследуемые пептиды несколько ослабляли апоптоз тимоцитов, индуцированного контактом с ТЭК. При этом наиболее выраженное антиапоп-тотическое действие проявил эпиталон. Элиминация образующихся в процессе созревания Т-лимфоцитов аутореактив-ных и функционально неактивных клонов предшественни-

48

ков путем апоптоза играет важную роль не только в регуляции отрицательной селекции, но и гомеостаза тимуса в целом. Возрастная инволюция тимуса, эпифиза и других органов и тканей млекопитающих сопровождается апоптозом их паренхимы, а патологическая индукция апоптоза может приводить к развитию тяжелых дегенеративных заболеваний (болезнь Альцгеймера) и преждевременному старению. Отмеченный нами эффект стабилизации физиологической гибели клеток путем апоптоза под действием пептидов вилона и эпиталона демонстрирует перспективность их использования для коррекции возрастных патологий [13].

Как было отмечено ранее, возрастные изменения иммунной системы включают не только снижение продукции наивных Т-лимфоцитов в тимусе, но и сопровождаются уменьшением объема интактной периферической лимфоидной ткани, ростом концентрации Т-клеток памяти и смещением баланса Т-хелперных и Т-киллерных клеток в популяции периферических Т-лимфоцитов [10]. Действие пептидов вилона и эпиталона на клетки периферической крови оценивали по экспрессии цитоплазматических цитокинов — интерферона (ИФН) у, интерлейкина-4 (ИЛ-4) и по соотношению ИФНу⁺ и ИЛ-4+клеток в культуре мононуклеаров человека, стимулированных комбинацией иономицина и форболмири-статацетата.

Хорошо известно, что Т-хелперы в процессе дифферен-цировки вырабатывают специфические цитокины, которые могут быть маркерами каждого отдельного этапа развития Т-клеток: «наивные» СО4⁺-клетки в ответ на стимуляцию вырабатывают лишь интерлейкин-2, затем они превращаются в хелперы ThO типа, продуцирующие в малом количестве широкий спектр цитокинов. Образующиеся при этом ТЫ- и Т112-хелперы продуцируют ИЛ-2, ИФНу, ФНОа (р) и ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-9, ИЛ-10, ИЛ-13 соответственно [19]. Из перечисленных цитокинов ИФНу и ИЛ-4 являются главными продуктами хелперов первого и второго класса и по своему действию противоположны друг другу. Присутствие ИЛ-4 необходимо для пролиферации и дальнейшей диффе-Ренцировки В- и Т-лимфоцитов, кроветворных клеток, мак-Рофагов, NK-клеток, базофилов. Кроме того, ИЛ-4 обладает противовоспалительным и противоопухолевым действием, однако способствует развитию аллергических реакций. ИФНу снижает секреторную активность Тп2-клеток. В опы-ах in vitro нами было показано, что пептиды вилон и эпита-°н могут участвовать в регуляции дифференцировки пере-

49

ферических Т-лимфоцитов. Так, ранее нами было установлено, что вилон стимулирует синтез ИЛ-2 мРНК в лимфоцитах селезенки мышей in vitro [15]. Кроме того, пептиды вилон и эпиталон оказывают некоторое влияние на экспрессию внутриклеточных цитокинов в активированных Т-клетках. Оба пептида ослабляют экспрессию внутриклеточного ИЛ-4, а высокие дозы эпиталона — также внутриклеточного ИФНу. Таким образом, при низких и средних дозах пептидов создаются условия для сдвига в пользу ИФНу, что, очевидно, отражает преобладание дифференцировки активированных Т-лимфоцитов в ТЫ-клетки. Ослабление выработки ИЛ-4 периферическими Т-лимфоцитами в присутствии вилона и эпиталона дает основание использовать их при лечении аллергических заболеваний.