Министерство образования Российской Федерации
Волгоградский государственный технический университет
Кафедра «Промышленная экология и безопасность жизнедеятельности»
Лабораторная работа № 1 по курсу «Основы биотехнологии»
ПОДГОТОВКА ЛАБОРАТОРНОГО ОБОРУДОВАНИЯ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Методические указания
Волгоград 2003
УДК 576.6:579.6
Методические указания к лабораторной работе по курсу «Основы биотехнологии»
/Cост. И.В.Владимцева, Т.В.Хохлова, О.В.Колотова, Л.В.Федотова
Волгоградский государственный технический университет.
Волгоград, 2003. - 12 с.
Методические указания включают сведения о методах подготовки лабораторной посуды к работе с микроорганизмами в стерильных условиях, видах питательных сред и методах стерилизации, применяемых в микробиологическом производстве.
Печатаются по решению редакционно-издательского Совета Волгоградского государственного технического университета.
Табл. 1. Библиография 6 назв.
Рецензент
д.т.н., проф. О. И. Тужиков
С Волгоградский
государственный
технический
университет, 2003
Цель работы:
Ознакомиться с особенностями подготовки лабораторной посуды для работы с микроорганизмами в стерильных условиях. Подготовить пипетки, пробирки, флаконы и чашки Петри к стерилизации. Изготовить ватно-марлевую пробку.
Изучить принципы составления питательных сред для микробиологической работы. Приготовить физиологический раствор и плотную питательную среду для выращивания бактерий.
Ознакомиться с методами стерилизации посуды и питательных сред. Провести стерилизацию приготовленной питательной среды дробным методом.
2. Теоретическая часть
2.1. Лабораторное оборудование, используемое для микробиологических исследований
Для работы с микроорганизмами в лабораторных условиях используют стеклянную посуду: пробирки, флаконы, колбы, бактериологические матрацы (плоские бутыли). Новая посуда часто имеет щелочную реакцию. Поэтому новое стекло заливают 1-2% соляной кислотой и кипятят в ней в течение 2 часов или выдерживают в автоклаве при 120º в течение 40 мин.. Посуда при такой обработке частично теряет щелочность и питательные среды. приготовленные в ней, не изменяют свою реакцию. Бывшую в употреблении посуду моют теплой водой с помощью ерша или щетки, после чего ополаскивают 2-3 раза дистиллированной водой и сушат. Лабораторная посуда после обработки должна быть прозрачной, нейтральной реакции, хорошо обеззаражена, высушена, без следов дезинфицирующих растворов и сильно действующих веществ (кислот, щелочей). Для работы в стерильных условиях посуду необходимо подготовить - укупорить ватно-марлевыми пробками (пробирки, флаконы, матрацы) или завернуть в плотную бумагу (чашки Петри, ампулы).
Ватно-марлевые пробки готовят следующим образом. На стол кладут продолговатую четырехугольную пластинку ваты соответствующей величины, загибают внутрь все четыре края (рис.1) так, чтобы получилась ленточка, по ширине равная длине пробки, и скатывают валик по диаметру пробирки или колбы. Валик должен быть достаточно плотным и не сминаться при нажатии. Пробку обертывают кусочком марли в один слой, края марли связывают над пробкой ниткой.
Рис.1. Скатывание ватно-марлевой пробки.
В микробиологической лаборатории широко пользуются стеклянными пипетками. Пипетки бывают пастеровские и градуированные. Первые не имеют делений, и расчет жидкости при работе с ними ведется на капли; вторые имеют деления, и количество вытекающей из них жидкости определяется в миллилитрах и десятых долях миллилитра. Один конец пипетки широкий, другой – узкий. Для набирания жидкости и регулирования быстроты ее вытекания на широкий конец пипетки надевают резиновый шланг, снабженный грушей. Широкое отверстие пипетки закрывают ватным тампоном. Комочек ваты не должен быть очень плотным, но и не должен свободно двигаться в пипетке. Волокна ваты не должны торчать из-за края пипетки. Подготовленные пипетки по одной или по несколько штук заворачивают в бумажную ленту шириной 2,5 см, длиной до 70 см.