
- •Лабораторная работа № 2
- •По курсу «Основы биотехнологии»
- •Микроскопический метод исследования морфологии микроорганизмов.
- •Методические указания
- •Волгоград 2003
- •1. Цель работы
- •2. Микроскоп и техника микроскопирования
- •Общие правила работы с микроскопом
- •3. Приготовление препарата
- •4. Окрашивание препарата
- •Окраска клеток микроорганизмов го граму
- •5. Порядок проведения работы
- •6. Приборы и реактивы для выполнения лабораторной работы
- •1) Цель работы.
- •7. Техника безопасности
- •8. Контрольные вопросы
- •9. Список используемой литературы
5. Порядок проведения работы
1) На предметных стеклах приготавливают мазки двух различных культур микроорганизмов (по указанию преподавателя). Мазки сушат и фиксируют над пламенем спиртовки.
2) Производят окрашивание препаратов микроорганизмов по Граму в модификации Синева.
3) Просматривают препараты в поле зрения оптического микроскопа под сухие (х8 и х40) и иммерсионным объективами.
4) По результатам окраски делают выводы о принадлежности исследуемых микроорганизмов к группе грам (+) или грам (-) бактерий.
6. Приборы и реактивы для выполнения лабораторной работы
1) Оптический микроскоп "Биолан".
2) Предметные стекла.
3) Покровные стекла.
4) Пробирки с культурами исследуемых микроорганизмов.
5) Бактериологическая петля.
6) Спиртовка.
7) Препаратодержатель
8) Полоски фильтровальной бумаги, пропитанные 1% спиртовым раствором кристаллического фиолетового.
9) Раствор Люголя
10) 96% спирт.
11) Фуксия Пфейфера.
12) Дистиллированная вода.
Отчет студента по выполненной работе должен содержать:
1) Цель работы.
2) Этапы выполнения работы.
3) Результаты микроскопических исследований культур микроорганизмов.
4) Выводы о возможности дифференциации исследуемых бактерий по результатам окраски.
7. Техника безопасности
Осторожно обращайтесь с оптическим микроскопом. Приступайте к микроскопированию только после тщательного изучения правил обращения с микроскопом и только в присутствии преподавателя.
Приготовление препаратов микроорганизмов необходимо проводит после инструктажа преподавателя и под его контролем.
Особую осторожность необходимо проявлять при работе со стеклянными пробирками с живой культурой и зажженными спиртовками.
Работу нужно выполнять только на специально оборудованном месте на бактериологическом столе при наличии свежеприготовленных дезинфицирующих растворов.
8. Контрольные вопросы
1) Укажите особенности и виды микроскопии.
2) Дать описание конструкции и принципа работы светового микроскопа.
3) Механическая часть микроскопа.
4) Оптическая часть микроскопа.
5) Порядок работы со световым микроскопом.
6) Перечислите методы окраски микроорганизмов.
7) Виды красителей, применяемые в микробиологии.
8) Охарактеризовать технику окраски микроорганизмов по Грамму.
9. Список используемой литературы
Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. – М: Медицина, 1978. – 391 с.
Логунова Г.И., Усанова Т.И., Розентам А.Д. Лабораторно-практические работы по биотехнологии. – М, 1989. – 37 с.
Теппер Е.З. Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. – М: Колос. – 1993. – 175 с.