- •Факультет ветеринарної медицини
- •1. Правила відбору патологічного матеріалу.
- •2. Упаковка та транспортування вірусовмістного матеріалу.
- •3. Консервація відібраних вірусовмісних матеріалів.
- •Упаковка та транспортування вірусовмісного матеріалу
- •Зміст напису на етикетці
- •Консервація відібраних вірусовмісних матеріалів.
- •Додаткові речовини
- •1. Загальна характеристика підрозділів вірусологічної лабораторії.
- •Техніка безпеки при роботі з інфекційним матеріалом в лабораторії.
- •Техніка безпеки при роботі з інфекційним матеріалом
- •Т ри основні правила
- •Журнал вірусологічних досліджень.
- •Журнал обліку виявлених вірусів та терміну їх знищення.
- •Журнал обліку руху виробничих або музейних штамів вірусів. При роботі з вірусовмісними матеріалами потрібно:
- •Заняття №3 Методи знищення та інактивації вірусів
- •Дезинфекція у вірусологічній лабораторії
- •Методи обробки посуду для вірусологічних досліджень. Дезинфекція у вірусологічній лабораторії
- •Методи обробки посуду для вірусологічних досліджень
- •Завдання:
- •Методи долабораторної діагностики вірусовмісного матеріалу.
- •Загальна схема діагностики вірусовмісних матеріалів
- •Загальна схема діагностики вірусовмісних матеріалів
- •Заняття №5 Підготовка вірусовмісного матеріалу для досліджень.
- •Строки відбору патологічного матеріалу при вірусних інфекціях
- •Порядок роботи з патологічним матеріалом:
- •Загальна схема підготовки патологічного матеріалу до роботи
- •Характеристика основних етапів підготовки матеріалу
- •1. Розведення патологічного матеріалу.
- •2. Центрифугування.
- •3.Обробка антибіотиками.
- •4. Бактеріологічне дослідження одержаної суспензії.
- •Заняття №6 Живильні середовища для культур клітин
- •Характеристика складових частин поживних середовищ
- •Заняття №7 Методики роботи з культуРами клітин.
- •Загальні відомості про культури клітин.
- •Переваги і недоліки культур клітин.
- •Тривалість використання культур клітин різних типів.
- •Орган чи тканина, взяті безпосередньо з макроорганізму
- •Підготовка культур до роботи
- •Заняття 8 Реакція дифузної преципітації
- •Загальна характеристика реакції дифузної преципітації
- •Підготовка компонентів рдп.
- •Виготовлення 1 - 1,5 % агарового гелю.
- •2. Виготовлення вірусного антигену для рдп.
- •3. Виготовлення сироваток для рдп.
- •Методика постановки рдп
- •Постановка рдп на предметному склі
- •Заняття №9 визначення титру вірусів.
- •1. Поняття про титр вірусів.
- •2. Одиниці виміру титру і типи пошкоджень тест-об’єктів.
- •3. Методики визначення титру вірусів. Поняття про титр вірусів
- •Одиниці виміру титру вірусів
- •Одиниці виміру титру.
- •Визначення титру в одиницях локальних пошкоджень.
- •Заняття №10 мЕтодики постановки реакції гемаглютинації
- •Використання реакції гемаглютинації у вірусології.
- •Реакції затримки гемаглютинації (рзга) та непрямої гемаглютинації (рнга). Використання реакції гемаглютинації у вірусології
- •Реакції затримки гемаглютинації (рзга) та непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Методика постановки реакцій непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Методика постановки головного досліду рнга.
- •Для перевірки якості рнга потрібно одночасно із розкапуванням компонентів реакції поставити контролі різних типів (табл.10.3).
- •Методика постановки реакції затримки гемаглютинації (рзга)
- •Література
Міністерство аграрної політики і продовольства України
ЖИТОМИРЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ агроекологічний університет
Факультет ветеринарної медицини
Кафедра мікробіології, вірусології та епізоотології
МЕТОДИЧНА РОЗРОБКА
до лабораторних занять
з курсу
“Ветеринарна вірусологія”
для студентів
ОКР «Магістр», «Бакалавр»
Житомир 2011
Методична розробка до лабораторних занять з курсу “Ветеринарна вірусологія” підготована доцентом, к.б.н. Солодкою Л.О.
Затверджено на засіданні кафедри мікробіології, вірусології та епізоотології «_____________»_____________ 2011 р., протокол №______
Зав. кафедрою, професор Галатюк О.Є.
Затверджено на засіданні методичної комісії факультету ветеринарної медицини “_____” _______________ 2011 р., протокол №______
Голова методичної комісії
факультету ветеринарної медицини, професор Довгій Ю.Ю.
ЗМІСТ
Заняття №1. Правила відбору та транспортування вірусовмісного матеріалу…………………………...........................................………………….4
Заняття №2. Правила роботи з вірусовмісними матеріалами у лабораторії............................................................................................................. 9
Заняття №3. Методи знищення та інактивації вірусів………………………………………………………….............................12
Заняття №4. Методика дослідження патологічного матеріалу у вірусологічній лабораторії………….........................................................……17
Заняття №5. Підготовка вірусовмісного матеріалу до досліджень……………………………………………………........…………….21
Заняття № 6. Живильні середовища для культур клітин...........................26
Заняття № 7. Методика роботи з культурами клітин..................................34
Заняття № 8. Реакція дифузної преципітації................................................ 40
Заняття № 9. Визначення титру вірусів...................45
Заняття № 10. Методики постановки реакцій гемаглютинації
……………..............................…51
Література……………………………………………………………………….56
Заняття №1
Правила відбору та транCпортування вірусовмісного матеріалу.
1. Правила відбору патологічного матеріалу.
2. Упаковка та транспортування вірусовмістного матеріалу.
3. Консервація відібраних вірусовмісних матеріалів.
Правила відбору патологічного матеріалу
Патологічний матеріал необхідно відібрати при появі чітких ознак хвороби або не пізніше, ніж через 2 годин після загибелі чи вимушеного забою тварини (рис.1.1).
З міна терміну відбору зразків призведе до:
Контамінації патматеріалу кишечною мікрофлорою |
|
Зменшення кількості або інактивації вірусу в пат матеріалі |
Причина – зменшення бар’єрної ролі кишечника |
|
Причина - дія захисних механізмів у хворої, посмертна аутостерилізація у мертвої тварини. |
Неможливості накопичення вірусу в лабораторних дослідженнях |
|
Неможливості остаточної ідентифікації збудника |
|
Неможливості постановки точного діагнозу |
Рис. 1.1. Наслідки зміни термінів відбору вірусвмістних зразків.
Ветеринарному лікарю, який має відбирає патологічний матеріал, необхідно звертати увагу не тільки на час відбору зразка, але й на інші обставини, зв’язані із тропізмом збудника (табл.1.1):
вхідні ворота інфекції;
шляхи розповсюдження вірусу в організмі тварини;
місця найбільш інтенсивного розмноження вірусу в організмі тварини;
шляхи виділення збудника в навколишнє середовище.
Табл. 1.1. Місця відбору патологічного матеріалу при різних типах вірусних інфекцій.
Тип вірусної інфекції |
Патологічний матеріал |
Респіраторна |
Мазки та змиви з носу та глотки, соскоби трахеї, носоких перегородок, шматки легенів від трупів та вимушено забитих тварин. |
Ентеровірусна (вісцеротропна) |
Кал, слизова оболонка тонкого кишечнику |
Нейротропна |
Шматки головного або спинного мозку |
Дермотропна |
Шматки ураженої шкіри |
Антропна |
Кров, паренхіматозні органи |