Ход работы

Материалы и оборудование: фильтровальная бумага; микроскоп и все необходимое для приготовления препаратов; спиртовки.

Берут мазок с зубного налета. Для этого с помощью ваты, накрученной на палочку, студент снимает у себя налет с внутренней стороны зубов и наносит его на чистое предметное стекло, делая по стеклу мазок.

Затем мазок сушат на воздухе при комнатной температуре или слабом нагревании, держа препарат высоко над пламенем горелки. Сильное нагревание препарата при сушке не рекомендуется, так как белки коагулируют, искажая структуру и форму клеток. До фиксации препарата следят за соблюдением расстояния от него до пламени спиртовки. Высушенный препарат фиксируют.

Берут стекло с мазком в горизонтальном положении и три-четыре раза проводят его через желтую часть пламени горелки. Очень важно не перегреть стекло. Простейший способ проверки правильности нагрева - после каждого проведения через пламя слегка коснуться стеклом руки. Если неприятного ощущения нет, то все правильно. При фиксации бактериальные клетки гибнут в результате коагуляции цитоплазмы, кроме того, они прилипают к стеклу.

После фиксации на мазок наносят одну из обычных красок, употребляемых в микроскопической технике (фуксин Пфейфера и др.).

Через 1-2 минуты краску осторожно (чтобы не смыть клетки) отсасывают фильтровальной бумагой и наносят несколько капель чистой дистиллированной воды. Если вода окрасится, ее также осторожно отсасывают и наносят свежую каплю. Это делается для того, чтобы отмыть препарат от краски, которой должны быть окрашены только микроорганизмы, но не фон (стекло). Мазок с каплей чистой (без остатков краски) воды накрывают покровным стеклом. В таком виде препарат готов для рассматривания. Микроскопируют сначала на малом, а затем на большом увеличении.

Зарисуйте при большом увеличении увиденные формы бактерий.

СПИСОК РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Грин Н., Стаут У., Тейлор Д. Биология: В 3-х т. / Под ред. Р. Сопера - М.: Мир. 1990. Т.1.- 368 с.

Лабораторная работа № 5

ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ И МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ

МИКРООРГАНИЗМОВ

Цель работы: на практике ознакомиться с культуральными и морфологическими признаками отдельных микроорганизмов; освоить технику приготовления мазка, окраски по Граму, светового микроскопирования.

1. Культуральные и морфологичекие признаки

МИКРООРГАНИЗМОВ

Процесс выращивания микроорганизмов на питательных средах называется культивированием, а развившиеся микроорганизмы - культурой (популяцией). При развитии в жидкой питательной среде культуры образуют суспензии, осадок или пленку, при развитии в плотной среде - колонии. Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросших в большинстве случаев из одной клетке.

В зависимости от того, где развивались клетки (на поверхности плотной питательной среды, в толще ее или на дне сосуда), различают:

• поверхностные колонии,

• глубинные колонии,

• донные колонии.

Исследование любого вида микроорганизма начинается с получения его в чистой культуре. Чистые культуры используют для изучения морфолого-цитологических, культуральных и физиолого-биохимических признаков клеток. Это дает возможность провести идентификацию микроорганизма и установить его таксономическое положение.

К морфолого-цитологическим признакам относят:

• форму и размер клеток (см. приложение к теме, рис. 1);

• взаимное расположение клеток;

• окрашивание по Грамму;

• способность к образованию спор и капсул;

• подвижность;

• наличие жгутиков, образование в клетках некоторых включений.

Культуральные признаки - это особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах.

Колонии, выросшие на поверхности среды, отличаются большим разнообразием и являются наиболее существенной особенностью роста микроорганизмов на плотном субстрате. При их описании учитывают признаки:

- форму колоний (см. приложение к теме, рис. 2);

- размеры колонии:

диаметр 10 мм и более - крупная;

от 1 до 10 мм - средней величины;

не превышает 1мм – точечная;

- поверхность колоний:

гладкая;

шероховатая;

складчатая;

бугристая.

- блеск и прозрачность:

прозрачная;

полупрозрачная;

непрозрачная;

блестящая;

матовая;

мучнистая;

флуоресцирующая;

влажная;

сухая;

- профиль колоний (см. приложение к теме, рис. 3);

- цвет - пигментированность колоний и субстрата под колониями:

белый;

серо-белый;

желтый и т.п.;

- край колоний (см. приложение к теме, рис. 4);

- структуру колоний (см. приложение к теме, рис. 5);

- консистенцию (касаются поверхности петлей):

плотная;

мягкая;

слизистая;

тягучая;

тестообразная;

хрупкая.