
- •Методические указания
- •1. Приготовление препаратов микроорганизмов
- •1.1. Приготовление препаратов живых клеток
- •1.2. Приготовление препаратов фиксированных клеток
- •1.2.1. Приготовление мазка
- •1.2.2. Высушивание мазка.
- •1.2.3. Фиксация мазка.
- •1.2.4. Окраска мазка
- •Устройство микроскопа мбр-1
- •Микробиологическая лаборатория
- •2. Подготовка микробиологической лаборатории к работе
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Аппараты, приборы, посуда и инвентарь
- •Техника безопасности на биотехнологическом
- •Лабораторная работа № 3 приготовление питательных сред для культивирования микроорганизмов
- •1. Питательные среды
- •2. Уплотнители сред
- •3. Осветление сред
- •Список рекомендуемой литературы по теме занятия:
- •Лабораторная работа № 4 морфология бактерий
- •Ход работы
- •Культуральные и морфологичекие признаки
- •2. Окраска микроорганизмов по граму
- •Ход работы
- •Приготовление мазка
- •2. Фиксация мазка
- •3. Окрашивание препарата
- •Краткая характеристика молочнокислых бактерий
- •2. Практическое использование молочнокислых бактерий
- •Ход работы
- •1. Приготовление препарата молочнокислых бактерий
- •2. Определение кислотности молока
- •Вопросы для самопроверки
- •Список рекомендуемой литературы:
- •2.Теппер е.З., Шильникова в.К. Практикум по микробиологии. М.: Колос,- 1979.-216 с. Лабораторная работа № 7 изучение биологии возбудителей маслянокислого брожения
- •1. Понятие о маслянокислом брожении
- •Культуральные и морфологические признаки
- •3. Роль в природе
- •4. Использование клостридиев в биотехнологии
- •Ход работы
- •1. Выращивание маслянокислых микроорганизмов
- •2. Микроскопирование маслянокислых микроорганизмов
- •3. Качественные реакции на масляную кислоту.
- •3.1. Получение маслянокислого железа
- •3.2. Получение масляноэтилового эфира
- •Вопросы для самопроверки
- •Краткая характеристика морфологии актиномицетов
- •2. Практическое значение актиномицетов
- •2.1. Значение актиномицетов в обеспечении плодородия почв
- •2.2. Использование представителей актиномицетов в биотехнологии
- •2.3. Актиномицеты как возбудители заболеваний
- •Ход работы
- •1. Приготовление препарата
- •2. Фиксация мазка
- •3. Окрашивание препарата
- •Список рекомендуемой литературы:
- •Лабораторная работа № 9 изучение морфологии грибов как объекта биотехнологии
- •Краткая характеристика морфологии грибов
- •2.Практическое значение грибов
- •2.1. Использование плесневых грибов в биотехнологии
- •4 . Приготовление препаратов плесневых грибов
- •Ход работы
- •Приготовление препаратов дрожжей и их изучение ход работы
- •Морфология простейших
- •2. Простейшиекак возбудители заболеваний
- •Простейшие как объект биотехнологии
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Микроскопирование аэробных целлюлозоразрушающих микроорганизмов.
- •Список рекомендуемой литературы
- •Лабораторная работа № 13 изучение морфологии азотфиксирующих микроорганизмов
- •Свободноживущие азотфиксаторы
- •2.Симбиотические азотфиксаторы
- •Ход работы
- •Микроскопирование свободноживущих азотфиксирующих
- •Изучение морфологии симбиотических азотфиксирующих
- •Цель работы: ознакомиться с микробиологическими методами исследования почвы.
- •Ход работы
- •Отбор и подготовка почвенного образца для микробиологического анализа
- •2. Техника посева
- •Общие представления о микробиологических методах
- •2. Посев на плотные среды
- •3. Методы количественного учета микроорганизмов
- •3.1. Подсчет клеток в счетных камерах
- •3.2. Подсчет клеток в капиллярах Перфильева
- •Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках
- •3.4. Подсчет клеток на мембранных фильтрах
- •Определение количества клеток высевом на плотные
- •Определение количества клеток высевом в жидкие среды
- •4. Микробиологические методы исследования воды
- •4.1. Отбор проб воды
- •4.2. Методы определения микробного числа
- •Ход работы
- •Цель работы: ознакомиться с основными микробиологическими методами исследования воздуха.
- •Метод оседания
- •Аспирационные методы
- •Ход работы
Культуральные и морфологические признаки
клостридиев
Бактерии рода клостридиев являются облигатными анаэробами. На поверхности твердого субстрата они образуют плотные выпуклые колонии правильной формы, непрозрачные, кремового или белого цвета.
Молодые клетки имеют палочковидную цилиндрическую форму, прямую или слегка изогнутую с закругленными концами. Большинство видов - грамположительные, подвижные. Движение осуществляется с помощью жгутиков. По мере старения клетки теряют подвижность, накапливая запасное вещество типа крахмала (гранулезу), и переходят к спорообразованию. Диаметр спор, как правило, превышает диаметр клетки, поэтому клетка со спорой внутри может принимать форму веретена или барабанной палочки.
3. Роль в природе
С жизнедеятельностью клостридиев связаны процессы разложения (гниения) азотсодержащих остатков (белков, нуклеиновых кислот) в анаэробных условиях, а также разложение таких растительных материалов как клетчатка, пектины и грибной хитин. Маслянокислые микроорганизмы приносят вред, вызывая порчу картофеля и овощей, вспучивание сыров, прогоркание молока, порчу консервов и силоса.
4. Использование клостридиев в биотехнологии
Бактерии рода Clostridium являются промышленными продуцентами масляной кислоты, ацетона, бутанола. Наиболее часто используемым видом являются бактерии С. acetobutilicum.
Ход работы
Материалы и оборудование: пробирки; водяная баня; электроплитка; клубень картофеля; мел; р-р Люголя; микроскоп и все необходимое для приготовления препаратов; 5%-н раствор FeCl3; 96%-н этиловый спирт; крепкая серная кислота; спиртовки.
1. Выращивание маслянокислых микроорганизмов
Хорошее развитие типичных форм маслянокислых микробов удается получить на среде с картофелем.
Сырой неочищенный картофель нарезают мелкими кубиками, заполняют ими 1/3 высокой пробирки, добавляют немного мела (для нейтрализации масляной кислоты), заливают водопроводной водой на 2/3 и помещают в водяную баню при температуре 80° на 15 - 20 мин (для пастеризации). В среду не вносят ни почву, ни маслянокислых микробов, так как на кожуре картофеля всегда есть их споры. Пробирки плотно закрывают и помещают в термостат.
Через 2-5 суток картофель всплывает вследствии бурно идущего газообразования. Культуральную жидкость используют для исследования морфологии маслянокислых микроорганизмов и качественного определения продуктов брожения.
2. Микроскопирование маслянокислых микроорганизмов
Изучение маслянокислых бактерий проводят в «раздавленной» капле.
Для этого каплю сброженной жидкости (лучше из среднего слоя) наносят на предметное стекло, добавляют каплю раствора Люголя и покрывают покровным стеклом. Микроскопируют с объективами 40Х.
При микроскопировании обычно обнаруживают С. pasteiirianum, С. butyricum., C. felsineum. Обращают внимание на образовавшиеся у этих микроорганизмов споры, сильно преломляющие свет, и на клетки, содержащие гранулёзу, окрашенные в синий цвет.
Зарисовать микроорганизмы, относящиеся к группе маслянокислых.