- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
По типу острой инфекции (вирулентной). Вирус адсорбируется на клетке, проникает в неё, активно репродуцируется, клетка разрушается, вирус входит за пределы клетки. В культуры клеток наблюдается ЦПД (цитопатогенное действие). ЦПД проявляется в виде округления, вакуолизации, образования гигантских клеток - симпластов;
По типу хронической инфекции (латентной). Вирус проникает в клетку, репродуцируется, медленно выходит за пределы клетки. Клетка не разрушается, внешних изменений не наблюдается. Обнаружение:
Используют микроскопические методы – световая микроскопия для обнаружения телец-включений, люминесцентная (МФА, метод прямого флуорохромирования), электронная микроскопия;
Выявляют НК вирусов – окраска по Браше и Фельгену, ПЦР;
РГА, РГАД: в культуру клеток, зараженную вирусом, вносят 1% взвесь эритроцитов. Если в культуре содержится вирус, то эритроциты прилипнут к поверхности культуры клеток. Если вируса нет – они будут плыть по поверхности;
Бляшкообразование в зараженной культуре клеток. Бляшка образуется в культуре в результате деятельности 1й вирусной частицы. Чтобы выявить такую бляшку, культуру, зараженную вирусом, покрывают агаровым покрытием. В агар добавляют краситель, появляются очаги мертвых неокрашенных клеток;
Иммунологические методы исследования, основанные на взаимодействии антител с антигенами;
Используют явление интерференции вирусов – подавления 1го вируса другим. Явление экзальтации - явление усиления 1го вируса под действием другого.
По типу опухолевой трансформации. Опухолевая трансформация клеток, вызывается онкогенными или опухолеродными вирусами. В культуре клеток появляются микроопухоли, очаги многослойного роста. Вирус проникает в клетку, происходит интеграция геномов вируса и клетки с помощью фермента обратной транскриптазы, она превращается в опухолевую, начинает делиться;
Структурные белки входят в состав зрелых внеклеточных вирионов и выполняют ряд функций: 1) защита НК от внешних повреждающих воздействий; 2) взаимодействие с мембраной чувствительных клеток в ходе 1го этапа заражения; 3) взаимодействие с вирусной НК в ходе и после её упаковки в капсид; 4) способность к разрушению в ходе освобождения нуклеиновой кислоты и др. Белки капсидные, белки суперкапсидной оболочки, матриксные (промежуточного слоя), белки вирусных сердцевин.
Неструктурные белки – белки, кодируемые вирусным геномом, но не входящие в вирион. Регуляторы экспрессии вирусного генома, предшественники вирусных белков, нефункциональные пептиды, ингибиторы клеточного биосинтеза и ингибиторы разрушения клеток, вирусные ферменты.
НК являются носителями наследственности и определяют инфекционные свойства.
Липиды входят в состав суперкапсида. Липидный компонент стабилизирует структуру вирусной частицы, липиды обеспечивают взаимодействие пепломеров, изолируют внутренние слои вирионов от гидрофильных веществ, содержащихся во внешней среде.
Углеводы. В составе гликопротеидов и гликолипидов. Обеспечивают сохранение конформации белковой молекулы и обусловливает защиту молекулы от протеаз.
K, Na, Ca, Mg, Fe принимают участие в формировании связей в молекулах вирусного белка и НК.
Ферменты, участвующие в репликации вирусных НК. ДНК-зависимая РНК-полимераза (осуществляет транскрипцию ранних РНК с ДНК). РНК-зависимая РНК-полимераза. У бактериофагов (лизоцим и аденозинтрифосфатаза) – для проникновения в клетку.
Нейраминидаза – разрушает нейраминовую кислоту в составе клеточных стенок.
Интеграция геномов у онкогенных вирусов.