- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
Вирусы – строгие внутриклеточные паразиты, поэтому для их культивирования нужна живая клетка. В условиях лаборатории используют 3 вида биологических моделей для культивирования вирусов.
Лабораторные животные;
Куриные эмбрионы;
Культуры клеток
Культивирование вирусов в организме лабораторных животных является самым старым методом. Не является лучшим методом, потому что работа с животными небезопасна, их нужно содержать в определенных условиях, кормить и т.д. Лабораторные животные используются:
Для индикации вирусов, т.е. для обнаружения;
Для выделения и накопления вируссодержащего материала (нередко – слепые пассажи);
Для идентификации (например, они являются тест-объектами для постановки реакции нейтрализации);
Для титрования вирусов, т.е. для определения количества вируса в материале;
Для получения вирусных антигенов и некоторых противовирусных вакцин, например, на кроликах – лапинизированные вакцины;
Для постановки иммунобиологических реакций:
Используется для дифференциации вирусов африканской и европейской чумы свиней. Берут 2 группы поросят, животных одной группы иммунизируют против европейской чумы свиней, животных второй группы не вакцинируют. Через 24-48 часов животных обеих групп заражают суспензией из исследуемого патологического материала. Если погибнут все животные, значит в материале содержится вирус африканской чумы свиней, если вакцинированные животные выживут, а невакцинированные погибнут – значит, в материале содержится вирус классической чумы свиней (европейской).
Реакция серозащиты. Аналогична предыдущей. Берут 2 группы животных, животным 1й группы вводят иммунную сыворотку против предполагаемого вируса, второй группе ничего не вводят. Затем животных обеих групп заражают суспензией из исследуемого материала. Если иммунизированные животные выживут – значит, они защитили животное от вируса, и по антителам сыворотки определяют вид вируса. Контрольная группа должна погибнуть.
Реакция нейтрализации. Подопытным животным вводят смесь иммунной сыворотки с вируссодержащим материалом, а второй – ВСМ без сыворотки. Если животные 1й группы выживут, второй – погибнут, значит, антитела сыворотки нейтрализовали вирус, и по ним определяют вид вируса.
Требования, предъявляемые к животным при постановке биопробы
Животные должны быть здоровыми, одинаковой массы тела. Они должны быть чувствительны к данному вирусу.
Категории животных:
Традиционные (конвенциональные) животные
Белые мыши, морские свинки, кролики, белые крысы.
Животные, контролируемые по генотипу
Линейные животные (инбредные) – полученные в результате близкородственного спаривания.
Гибридные животные – те же линейные, только полученные в результате скрещивания животных 2х разных линий
Мутантные животные – животные, имеющие определенные признаки, полученные в результате мутагенного действия каких-то факторов (бесшерстные мыши).
Животные, контролируемые по микрофлоре
Гнотобиоты – безмикробные животные.
Монобиоты – 1 вид микробов, два вида – дибиоты.
Гнотофоры – только полезная микрофлора.
СПФ-животные – свободные от патогенных факторов.
Домашние животные - Собаки, кошки, котята, щенки. Их в основном используют для выделения вирусов плотоядных животных.
Сельскохозяйственные животные - Телята, поросята, ягнята. Их используют в том случае, если вирусы не выделяются на других биологических моделях.
Новые животные - Золотистые хомячки. Используют для выявления онкогенных вирусов.
Птицы - Куры, цыплята – для постановки биопробы
Миниатюрные животные - Свиньи, лошади, коровы, у нас в стране – в основном минипиги – миниатюрные поросята (до 9 кг), миниатюрная сибирская свинья.