
- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
При подозрении на вирусное заболевание врач обязан направить в лабораторию патологический материал.
При наличии характерных клинических признаков;
При получении отрицательных результатов бактериологического исследования;
При проведении лечебных мероприятий с помощью антибиотиков и специфических препаратов в случае отсутствия лечебного эффекта.
Основные правила взятия патологического материала.
Соблюдать меры личной безопасности и профилактики, брать материал обязательно нужно в спецодежде: 2 пары перчаток, прорезиненный фартук, халат, колпак, марлевая повязка;
Материал берут с соблюдением правил асептики, чтоб не загрязнить его, стерильными инструментами в стерильную посуду и пользоваться стерильными консервантами;
Материал должен быть свежим. С момента взятия патматериала до начала исследования допускается в летнее время не более 2х часов, зимой – не более 4х;
Материал на вирусное заболевание должен быть взят в самом начале болезни, потому что в большинстве случаев вирусные болезни осложняются бактериальной инфекцией.
Выбор патологического материала зависит от места локализации (тканевого тропизма) предполагаемого вируса. В зависимости от тканевого тропизма вирусы подразделяются на следующие группы:
Эпителиодерматропные вирусы – вирусы, поражающие кожу и слизистые оболочки (оспа, везикулярные болезни). На исследование направляют содержимое пустул, афт, везикул, лучше вместе со стенками. Для посмертной диагностики вырезают пораженные участки кожи или слизистой оболочки.
Энтеротропные вирусы – вирусы, поражающие органы пищеварения (парбавирусный энтерит, трансмиссивный гастроэнтерит свиней). При жизни на исследование направляют фекалии, при повышенной температуре можно направить кровь (вирусемия). Для посмертной диагностики вырезают пораженные участки кишечника и вместе с фекалиями направляют в лабораторию для исследования.
Пневмотропные вирусы – вирусы, поражающие органы дыхания (вирус гриппа, парагриппа). При жизни – носовые истечения, при повышенной температуре рекомендуют направить на исследование кровь. Для посмертной диагностики в лабораторию направляют кусочки легкого, трахею.
Нейротропные вирусы – вирусы, поражающие нервную систему (вирус Ауески – псевдобешенство, бешенство). Для исследования отправляют голову или головной мозг (посмертно), при жизни можно направить соскоб с роговицы.
Пантропные вирусы – поражают кровеносную и кроветворную систему (лейкоза КРС, чумы свиней)
В некоторых случаях в лабораторию направляют трупы грызунов (например, при подозрении на болезнь Ауески). Туляремия и лептоспироз вызывают гибель грызунов, нужно дифференцировать.
Иногда в лабораторию направляют членистоногих, собранных с животного. Они могут играть роль в передаче вируса (арбовирусные инфекции) – клещи, москиты, слепни могут передавать различные энцефалиты.
В вирусологической практике не всегда удается выделить вирус. Например, при инфекционном ринотрахеите КРС трудно выделить вирус. В этом случае прибегают к исследованию сывороток крови.
Для иммунологических методов исследования нередко направляют парные пробы сывороток, т.е. взятые 2 раза – в начале болезни и через 2-3 недели, лучше у одного и того же животного. Сыворотки проверяют с помощью серологических реакций (выявляют антитела). Диагноз ставят по увеличению титра антител в 2-4 раза. Это ретроспективная диагностика («запоздалая»).
Иногда не удается иметь свежий материал, его рекомендуется законсервировать.
Методы консервирования
Лучший консервант – холод. Чтобы понизить температуру льда, можно добавить этанола или соли;
50% раствор глицерина, вазелиновое масло – реже;
Вещества, оказывающие губительное действие для бактерий – антибиотики (пенициллин – на Г+, стрептомицин – на Г-, нистатин – на грибки). Берут от 100 до 1500 единиц действия на кубик патматериала.
Дальше упаковывают, пишут сопроводительный документ. Подбирают нарочного – человека, который должен доставить патматериал в лабораторию. В лаборатории заносят в журнал, передают в вирусологический отдел.