- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
Грипп птиц, классическая чума птиц — острая инфекционная вирусная болезнь птиц, характеризующаяся поражением органов пищеварения, дыхания, высокой летальностью. Различные штаммы вируса гриппа птиц могут вызывать от 10 до 100 % гибели среди заболевших и поражать одновременно от одного до трёх видов птиц. Природным резервуаром вируса являются мигрирующие птицы, чаще всего дикие утки. В диких популяциях птиц, в отличие от домашних, высока устойчивость к вирусу гриппа. Впервые грипп птиц был выявлен в Италии более ста лет назад.
Возбудитель. Вирусы гриппа имеют размер 80-120нм, для них характерен полиморфизм, т.к. имеют спиральный тип симметрии. НК однонитчатая, фрагментированная. У типов А и В – 8 фрагментов, у типа С 4 фрагмента. Наличие фрагментированной РНК облегчает природную изменчивость вируса, а при совместном культивировании вирионов может быть обмен фрагментами, что приводит к появлению новых вариантов вируса гриппа. Фрагменты представлены –нитями РНК, каждый фрагмент несет разную информацию. У них есть фермент РНК-зависимая РНК-полимераза (транскриптаза), которую называют внутренним белком, который тесно связан с РНК вируса.
Антигенная структура: Вирионы содержат внутренние и наружные белки. Есть белки – капсомеры (NP‑антигены), полимеразные белки (P1, P2, P3). Белок, выстилающий внутреннюю поверхность суперкапсидной оболочки – мембранный (матриксный) белок. Белки типоспецифичны, по ним все штаммы вируса гриппа подразделяются на 3 типа А, В, С. Наружные белки представлены гликопротеидами внешней оболочки: гемагглютинин и нейраминидаза. Они являются приспособлением для адсорбции и проникновения вируса в клетку, они же играют роль протективного антигена, против которого вырабатываются вируснейтрализующие антитела. Гемагглютинин (ГА) представляет собой молекулы белка третичной структуры в форме палочек длиной 14нм и шириной 4нм. Состоит он из 15 АК. Таких палочек на поверхности вириона от 300 до 450. ГА лучше всего склеивает эритроциты человека и кур. Нейраминидаза – фермент, который очищает нейраминовую (сиаловую) кислоту от сиалосодержащего субстрата. В составе нейраминидазы от 30 до 40% углеводов. Отдельная субъединица нейраминидазы выглядит как барабанная палочка или гриб. Установлено 10 антигенных разновидностей нейраминидазы. КАЖДЫЙ КОНКРЕТНЫЙ ШТАММ ИМЕЕТ 1 ТИП ВНУТРЕННИХ NP и M-антигенов, 1 РАЗНОВДНОСТЬ Га (ИЗ 17) и 1 РАЗНОВИДНОСТЬ НЕЙРАМИНИДАЗЫ, а их различное сочетание обусловливает разнообразие типов и вариантов вируса гриппа.
У вирусов гриппа типа А имеются субтипы (16-14 по ГА и 9-10 по нейраминидазе)
А H1N1 – свиной грипп, тип А, 1 тип Га,1 тип нейраминидазы.
А H5N1 – птичий грипп
Тип вируса А имеет широкий спектр хозяев, поражает человека, млекопитающих и птицу. Типы В и С встречаются у человека, реже у свиней и морских млекопитающих.
Культивирование вируса гриппа
Лучшая биологическая модель – 10-11 дневные куриные эмбрионы. Их заражают в аллантоисную (амниотическую) полость, гибель через 18-36 часов. У павших эмбрионов выявляют кровоизлияния на теле, о присутствии вируса судят по РГА.
Второй способ культивирования: в культуре клеток человека, телят, поросят. О присутствии вируса в зараженных культурах судят по РГА и РГАд.
Можно заражать лабораторных животных, но из-за риска заражения людей метод почти не используется.
Устойчивость
Хорошо сохраняется при низких температурах, при комнатной температуре до 3 суток. Вирус чувствителен к УФ облучению. При температуре 550С инактивируется в течение часа, а при 60 градусах – за 10 мин, при 65-70 – за 3 минуты. Препараты хлора, формальдегида, щелочь, креолин инактивируют вирус в обычных концентрациях.
Лабораторная диагностика
Затруднена, так как целый ряд вирусов в чистом виде и в ассоциации с хламидиями, микоплазмами вызывают похожую клиническую картину.
Патматериал: выделения со слизистой носа, смывы со слизистой носа от больных животных, бронхиальный экссудат, кусочки легких от павших животных, кровь или труп целиком.
Экспресс методы: ПЦР, РГА, РИФ, риноцитоскопия. По возможности используют электронную микроскопию.
Вирусологические методы: выделяют на куриных эмбрионах, культуре клеток, хорьках, белых крысах, мышах. От кур можно заражать цыплят (36-72 часа).
Идентифицируют выделенный изолят с помощью РИФ, РТГА, ИФА.
Ретроспективная серодиагностика – исследование сывороток крови в РТГА, с помощью ИФА, РНГА, РН.
Специфическая профилактика: разработаны живые вирус-вакцины с учетом субтипа. Разработана инактивированная вакцина против гриппа птиц. Вакцина против гриппа птиц инактивированная эмульгированная Флупротект против типа A H5N1.
Больных животных не лечат.