
- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
49 Вирус гриппа человека и животных.
Грипп занимает 1е место по частоте и по количеству случаев. Грипп – остро протекающее высококонтагиозное заболевание, характеризующееся повышением температуры тела, интоксикацией организма, общим угнетением, катаральным воспалением верхних дыхательных путей и нередко конъюнктивы глаз. У птицы отмечается также поражение ЖКТ.
Долгое время считали, что гриппом болеют только люди, однако было давно подмечено, что во время тяжелых эпидемий гриппа у человека появлялись ОРЗ среди животных и птиц, по клиническому проявлению напоминающие грипп.
Первые штаммы вируса гриппа были выделены от свиней в США в 1931 году ученым Шоупом. В СССР впервые были выделены вирусы гриппа от человека в 1936 году (Смородинцевым, Зильбером), а от животных вирусы гриппа были выделены в 60-70гг прошлого века. До этого были такие задания как ЗКВДП (заразный катар верхних дыхательных путей), инфекционный бронхит КРС, чума птиц. Позднее было установлено, что причиной всех этих болезней является вирус гриппа.
Наиболее изучен грипп у свиней, лошадей и птиц. Из лабораторных животных восприимчивы хорьки, хомяки, белые мыши. Серые крысы являются носителями вируса гриппа.
Возбудитель. Вирусы гриппа имеют размер 80-120нм, для них характерен полиморфизм, т.к. имеют спиральный тип симметрии. НК однонитчатая, фрагментированная. У типов А и В – 8 фрагментов, у типа С 4 фрагмента. Наличие фрагментированной РНК облегчает природную изменчивость вируса, а при совместном культивировании вирионов может быть обмен фрагментами, что приводит к появлению новых вариантов вируса гриппа. Фрагменты представлены –нитями РНК, каждый фрагмент несет разную информацию. У них есть фермент РНК-зависимая РНК-полимераза (транскриптаза), которую называют внутренним белком, который тесно связан с РНК вируса.
Антигенная структура: Вирионы содержат внутренние и наружные белки. Есть белки – капсомеры (NP‑антигены), полимеразные белки (P1, P2, P3). Белок, выстилающий внутреннюю поверхность суперкапсидной оболочки – мембранный (матриксный) белок. Белки типоспецифичны, по ним все штаммы вируса гриппа подразделяются на 3 типа А, В, С. Наружные белки представлены гликопротеидами внешней оболочки: гемагглютинин и нейраминидаза. Они являются приспособлением для адсорбции и проникновения вируса в клетку, они же играют роль протективного антигена, против которого вырабатываются вируснейтрализующие антитела. Гемагглютинин (ГА) представляет собой молекулы белка третичной структуры в форме палочек длиной 14нм и шириной 4нм. Состоит он из 15 АК. Таких палочек на поверхности вириона от 300 до 450. ГА лучше всего склеивает эритроциты человека и кур. Нейраминидаза – фермент, который очищает нейраминовую (сиаловую) кислоту от сиалосодержащего субстрата. В составе нейраминидазы от 30 до 40% углеводов. Отдельная субъединица нейраминидазы выглядит как барабанная палочка или гриб. Установлено 10 антигенных разновидностей нейраминидазы. КАЖДЫЙ КОНКРЕТНЫЙ ШТАММ ИМЕЕТ 1 ТИП ВНУТРЕННИХ NP и M-антигенов, 1 РАЗНОВДНОСТЬ Га (ИЗ 17) и 1 РАЗНОВИДНОСТЬ НЕЙРАМИНИДАЗЫ, а их различное сочетание обусловливает разнообразие типов и вариантов вируса гриппа.
У вирусов гриппа типа А имеются субтипы (16-14 по ГА и 9-10 по нейраминидазе)
А H1N1 – свиной грипп, тип А, 1 тип Га,1 тип нейраминидазы.
А H5N1 – птичий грипп
Тип вируса А имеет широкий спектр хозяев, поражает человека, млекопитающих и птицу. Типы В и С встречаются у человека, реже у свиней и морских млекопитающих.
Культивирование вируса гриппа
Лучшая биологическая модель – 10-11 дневные куриные эмбрионы. Их заражают в аллантоисную (амниотическую) полость, гибель через 18-36 часов. У павших эмбрионов выявляют кровоизлияния на теле, о присутствии вируса судят по РГА.
Второй способ культивирования: в культуре клеток человека, телят, поросят. О присутствии вируса в зараженных культурах судят по РГА и РГАд.
Можно заражать лабораторных животных, но из-за риска заражения людей метод почти не используется.
Устойчивость
Хорошо сохраняется при низких температурах, при комнатной температуре до 3 суток. Вирус чувствителен к УФ облучению. При температуре 550С инактивируется в течение часа, а при 60 градусах – за 10 мин, при 65-70 – за 3 минуты. Препараты хлора, формальдегида, щелочь, креолин инактивируют вирус в обычных концентрациях.
Лабораторная диагностика
Затруднена, так как целый ряд вирусов в чистом виде и в ассоциации с хламидиями, микоплазмами вызывают похожую клиническую картину.
Патматериал: выделения со слизистой носа, смывы со слизистой носа от больных животных, бронхиальный экссудат, кусочки легких от павших животных, кровь или труп целиком.
Экспресс методы: ПЦР, РГА, РИФ, риноцитоскопия. По возможности используют электронную микроскопию.
Вирусологические методы: выделяют на куриных эмбрионах, культуре клеток, хорьках, белых крысах, мышах. От кур можно заражать цыплят (36-72 часа).
Идентифицируют выделенный изолят с помощью РИФ, РТГА, ИФА.
Ретроспективная серодиагностика – исследование сывороток крови в РТГА, с помощью ИФА, РНГА, РН.
Специфическая профилактика: разработаны живые вирус-вакцины с учетом субтипа. Разработана инактивированная вакцина против гриппа птиц. Лошадей иммунизируют инактивированной вакциной против гриппа лошадей. Вакцина против гриппа птиц инактивированная эмульгированная Флупротект против типа A H5N1.
Больных животных не лечат.