
- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
Диарея КРС (болезнь слизистых оболочек, пневмоэнтерит, инфекционный энтерит КРС).
Характеризуется эрозивно-язвенным воспалением слизистой оболочки ротовой полости, пищеварительного тракта, реже – носовой полости. У животных отмечается катаральный фибринозно-некротический или геморрагический энтерит. Может быть кашель, конъюнктивит, реже – изъязвление кожи мошонки, вымени, области межкопытной щели. Развивается хромота. Повышается температура, появляется диарея, слюнотечение, слизисто-гнойные истечения из носа. У коров возможны аборты в разные периоды стельности. Вирус легко преодолевает плацентарный барьер. У молодняка в результате изнурительных поносов болезнь, как правило, заканчивается летально. У родившихся в неблагополучных хозяйствах телят обнаруживают вируснейтрализующие антитела в 70-90% случаев.
Кроме телят могут болеть ягнята, козлята, буйволята, косулята, оленята. В последние годы отмечается «стертое» течение болезни. Отмечается естественное бессимптомное течение у свиней. Человек не болеет.
История открытия вируса:
Впервые заболевание было выделено в 1946 году ученым Олофсоном. К настоящему времени зарегистрирована во многих странах мира. В нашей стране регистрируется с 1967 года (в Удмуртии в 1972 году).
Свойства вируса
Вирус мелкий, 30-50 нм в диаметре, но встречаются частицы диаметром 40-60 нм. Сферическая форма вирионов, тип симметрии кубический (икосаэдр). Геном представлен однонитчатой РНК (+нить). Нить состоит из 3х фрагментов. Как и все флавивирусы – сложноустроенный вирус, имеет суперкапсидную оболочку.
Устойчивость – чувствителен к жирорастворителям, быстро инактивируется при значении pH = 3 (за 5 дней). Наиболее устойчив в слабощелочной среде, в культуральной среде при температуре -15 градусов сохраняется больше года, а в патматериале больше 6 месяцев. Хорошо сохраняется при отрицательных температурах, при -15-20С сохраняется от 6мес до года.
Антигенная структура вируса слабо изучена. В составе вириона имеется 4 структурных протеина. Основной – нуклеокапсидный, и 3 оболочечных гликопротеина. 2 из 3х оболочечных антигенов индуцируют выработку вируснейтрализующих антител в организме. Вирус диареи КРС имеет антигены, общие с вирусом чумы свиней и вирусом пограничной болезни овец. Выделяемые штаммы вируса диареи отличаются по вирулентности, по тканевому тропизму, по патогенности для куриных эмбрионов и ЦПД.
Культивирование:
В организме естественно восприимчивых животных (телят). Лабораторные животные нечувствительны. У кроликов может быть повышение температуры и бессимптомное течение;
Культивируют в культурах из ПЭК, ЛЭК, семенников КРС (Тестикулы Бычка = ТБ), макрофагов и лейкоцитов, и в перевиваемых линиях клеток (ПСЭК = перевиваемая из селезенки эмбриона коровы). В последние годы всё чаще используют линию клеток КСТ (коронарных сосудов телят). На этой культуре быстрее развивается WGL? Вирус накапливается в высоких титрах. Развивается зернистость цитоплазмы, окгругление клеток и отторжение их от стекла. Все штаммы вируса диареи КРС подразделяются на цитопатогенные и не цитопатогенные. Некоторые не вызывают ЦПД. Выявляют вирус в таком случае в РИФ.
Некоторые штаммы удается адаптировать к куриным эмбрионам после нескольких пассажей через желточный мешок.
При заражении животных вирусом диареи КРС отмечается длительное вирусоносительство (до 200 дней). Больные животные выделяют вирус с истечениями из носа, глаз, фекалиями. Слюной, мочой и спермой.
Лабораторная диагностика вирусной диареи
Патматериал: делают соскобы с пораженных слизистых оболочек, направляют кровь на исследование – прижизненная. У убитых с диагностической целью животных направляют кусочки легкого, селезенки, бронхиальные и брыжеечные лимфоузлы, пораженные участки слизистых оболочек носа и рта, трахеи и пищеварительного тракта.
Экспресс-методы:
РИФ – диагностический набор на вирусную диарею, парагрипп-3, ИРТ и РС-инфекцию. Для экспресс-диагностики используют ДНК-зонды и ПЦР. С помощью ПЦР выявляют вирус даже в молоке.
Вирусологические методы:
Выделение – см. выше. Во всех сомнительных случаях ставят биопробу на телятах.
Выделенный изолят идентифицируют в РН или используют РИФ и ИФА. Можно ПЦР. РДП менее чувствительная. РНГА (если есть такая возможность).
Серологическая диагностика – ИФА, РН, РНГА. РСК, РДП не нашли применения. Лучше исследовать парные пробы сывороток. Увеличение титра антител должно быть в 4 и более раза.
Методы специфической профилактики и терапии
Профилактика:
Комбовак – вакцина инактивированная против вирусной диареи, парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, РС-инфекции, рота- и коронавирусной инфекций.
Вирус-вакцина. Сухая, культуральная, против вирусной диареи КРС.
Методы специфической терапии не разработаны, можно использовать кровь и сыворотку реконвалесцентов.