Высокоэффективная хроматография.

Так как хроматографические методы анализа имеют очень широкое распространение, то возникла необходимость в автоматизации этих процессов. Сейчас очень большим спросом пользуется высокоэффективная хроматография – хроматография, в которой за счет использования специальной аппаратуры осуществляется быстрый и высокочувствительный анализ компонентов смеси с высокой эффективностью разделения.

В основе высокоэффективной жидкостной хроматографии лежат хроматографические методы которые выполняются вручную используя либо хроматографическую колонку либо хроматографическую бумагу или пластинку.

К преимуществам можно отнести: высокую скорость, высокую разделяющую способность, возможность проведения анализа с очень небольшим количеством вещества, низкий предел обнаружения (10^-9%), высокая чувствительность, возможность многократного использования колонок.

Высокоэффективная хроматография применяется для разделения, а также для качественного и количественного определения предельно близких по структуре веществ.

Анализируемая смесь вводится с помощью микрошприца в хроматографическую колонку. Далее с помощью детектора (анализатора) проводится или идентификация вещества (т.е. определение природы), или определение содержание вещества (т.е. определение концентрации), или разделение компонентов смеси.

Далее результат передается на регистрирующее устройство. Чаще всего это самописец. Самописец позволяет регистрировать электрический сигнал. Записанные таким образом хроматограммы, расшифровывают с целью проведения качественного и количественного анализа.

• Качественной характеристикой высокоэффективной жидкостной хроматографии является время удержания компонента в хроматографической колонке, т.е. расстояние пройденное пером самописца от начала координат до середины пика.

זּ

זּ

сигнал

• К оличественной характеристикой высокоэффективной жидкостной хроматографии является площадь пика на хроматограмме.

זּ

S S

сигнал

Лабораторная работа № 1 Определение цветного состава красителей методом тонкослойной хроматографии

Необходимые приборы и реактивы.

1. Растворы красителей

2. Тонкослойная пластина

3. Чашка Петри

4. Капилляр стеклянный

Выполнение работы.

На тонкослойную пластинку карандашом аккуратно наносят тонкую стартовую линию. На стартовую линию капилляром наносят по одной капле различных красителей и контрольный (анализируемый) раствор. В чашку Петри наливают немного элюента – раствора гидроксида натрия и опускают край пластинки так, чтобы элюент не касался капель красителей.

Капиллярными силами гидроксид натрия поднимается вверх и тянет за собой красители. Вследствие различной адсорбционной способности красители проходят по адсорбенту различный путь. В анализируемом растворе, содержащем смесь красителей, происходит их разложение и образуются зоны с различной окраской.

Сравнивая цвета анализируемого раствора с чистыми красителями, определяют состав анализируемой смеси.

ВЫВОД: