Жидкостная хроматография Молекулярно – адсорбционная хроматография.
Сущность. Основана на различии в адсорбционной способности компонентов в анализируемой смеси.
Для проведения анализа необходимо хроматографическую колонку заполнить адсорбентом.
В качестве адсорбентов обычно используют: мел, гипс, крахмал, оксид алюминия, целлюлозу, селикагель, оксид цинка и другие.
Требования к адсорбентам:
должен быть инертным по отношению к анализируемой смеси
должен быть однородным по своему составу
должен обладать адсорбционной способностью к компонентам сложной смеси
должен иметь частицы определенного размера.
Молекулярно – адсорбционной хроматографией можно: выделять одно вещество из смеси, разделять сложные смеси и проводить качественный и количественный анализы.
Качественной характеристикой является время начала выхода элемента из хроматографической колонки.
Количественной характеристикой является время прохождения элемента через хроматографическую колонку.
Проведение анализа.
Через хроматографическую колонку заполненную адсорбентом пропускают анализируемую смесь, например состоящую из трех компонентов (А + В + С), причем компонент А – очень хорошо адсорбируется на данном адсорбенте, компонент В – не очень хорошо адсорбируется на данном адсорбенте, компонент С – плохо адсорбируется на данном адсорбенте.
А + В + С
Первичная
хроматограмма
В верхнем слое адсорбента будет смесь всех компонентов, в среднем слое будет смесь из двух компонентов (В + С), т.к. компонент А поглотится адсорбентом в верхнем слое. В среднем слое останется компонент В, а компонент С выйдет из колонки. Таким образом можно выделить и то не полностью только тот компонент который хуже всего адсорбируется на данном адсорбенте.
А
+ В + С
В + С
С
Для более полного разделения сложной смеси на компоненты, через хроматографическую колонку пропускают элюент – вещество которое будет поочередно вымывать компоненты из колонки.
А + В + С + элюент
Вторичная хроматограмма
А
В верхнем слое адсорбента будет компонент А, в среднем слое будет компонент В, а первым из колонки выйдет компонент С.
В
С
Качественный анализ:
Берут серию растворов различных по природе и пропускают каждый раствор поочередно через хроматографическую колонку, при этом засекая время начала выхода раствора из колонки. Затем пропускают анализируемый раствор через колонку, также засекая время начала выхода из колонки. О природе вещества судят по близости значений между анализируемым и стандартными растворами.
Количественный анализ бесцветных растворов.
Готовят серию стандартных растворов (растворов с известной концентрацией) и поочередно пропускают каждый раствор через хроматографическую колонку, при этом засекая время прохождения раствора через колонку. Затем пропускают контрольный раствор через колонку, также засекая время прохождения раствора через колонку. По полученным данным строят график в координатах (זּ - с) (время прохождения раствора через колонку – концентрация стандартных растворов) и по графику определяют концентрацию контрольного раствора.
זּ
זּх
Сх С
Количественный анализ окрашенных растворов.
Готовят серию стандартных растворов (растворов с известной концентрацией) и поочередно пропускают каждый раствор через хроматографическую колонку, при этом замеряя высоту получившейся окрашенной зоны. Затем пропускают контрольный раствор через колонку, также замеряя высоту получившейся окрашенной зоны. По полученным данным строят график в координатах (h - с) (высота окрашенной зоны – концентрация стандартных растворов) и по графику определяют концентрацию контрольного раствора.
h
hх
С х С