Монорецепторные агглютинирующие сыворотки. Диагностикумы.
Диагностика:
Сероидентификация – определение неизвестного АГ (с пом. серологич. р-ции с извест. АТ) (3 п.)
АГ – х
АТ – известн. (в виде диагностической сыворотки)
Диагностическая сыворотка – от иммунизированных кроликов – гипериммунизация кролика убитыми вакцинами из соотв. культур – введение АГ в нарастающих дозах (в виде вакцины – убитые МКБ).
Титр диагностической сыворотки – мин. кол-во сыворотки или ее макс. разведение, при кот. происходит агглютинация со специфическим АГ.
Серодиагностика – определение неизвестных АТ (5 п.)
АТ – х (в сыворотке крови больного)
АГ – известн. (в виде диагностикума)
Диагностикум – АГ в виде убитых нагреванием МКБ – РА или АГ, асдорбир. На частицах – РНГА
Диагностический титр – то, эмпирически установленное разведение сыворотки, при кот. р-ция считается (+).
Реакция агглютинации и ее варианты: бактериальная ра, рнга, коагглютинация, латексагглютинация.
РА – простая серологическая реакция – (от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.
Реакция проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например, бактерий), "склеенных" антителами.
Фазы агглютинации:
Специфическая быстрая (комплекс АГ+АТ)
Неспецифическая медленная (АГ+АТ осаждается в присутствии электр-та)
В агглютинации АГ корпускулярный (кроме РНГА) (целые МКБ #), разводим сыворотку физ. р-ром.
Микроагглютинация (ориентировочная) на стекле
К капле агглютинирующей сыворотки (разведение 1 : 20) добавляют взвесь бактерии, выделенных от больного. Образуется хлопьевидный осадок.
Чаще для сероидентификации.
Развернутая в пробирках.
К разведениям сыворотки добавляют диагностикум. 1. Агглютинация с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. 2. Агглютинация с Н - диагностикумом (бактерии, убитые формалином)- крупнохлопчатая и протекает быстрее.
Хлопья крупнозернистые – есть жгутики
Мелко зернистые – нет жгутиков
Чаще для серодиагностики, для опред. титра диагностической сыворотки.
РНГА (РПГА) – АГ молекулярный или очень мелкие корпускулы (вирусы риккетсии)– адсорбирован на эритроцитах барана / каолине(бела глина) / латексе / угле (носитель АГ) (Первая фаза идет, вторую фазу не увидеть, чтобы увидеть, укрупняют)
Эритроцитарный гриппозный/риккетсиозный/туберкулезный.
Эр.с АГ + АТ à комплекс АГ+АТ ((+) зонтик)
Если АГ и АТ не специфичны à р-ция (-) - пуговка (эритроциты оседают в виде столбика)
Р
НГА
ставят в пластиковых планшетках или в
пробирках с разведениями сыворотки
крови больного, к которым добавляют
эритроцитарный диагностикум.
Реакция коагглютинации: применяют для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный диагностикум). (сероидентификация) Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных.
В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба
Фото (????)
Отличия РА от РП:
АГ: корпускул. / молекул.
Разводим: сыворотку / АГ
Рез-т: Хлопья / равномерное помутнение, кольца или дуги