Для того ,чтобы начать процесс обратной транскрипции обратная транскриптаза взаимодействует с прегеномной РНК и блокирует трансляцию прегеномной РНК. Трансляции не происходит и начинается формирование кора, в котором и происходит обратная транскрипция. пгРНК длиннее, т к участок геномной РНК при ее транскрипции прочитывается дважды, что приводит к образованию повторов на 5 и 3 концах пг РНК. Повторы довольно крупные, примерно 200нуклеотидов(R-повторы) внутри них более короткие повторы - DR1 (всего несколько нуклеотидов). Кроме того, на 5' 3'-концевого R повтора есть DR2 повтор. Рядом с короткими повторами DR1 есть эпсилон-шпилька на 3 конце. Первый акт при начале репликации – связывание полимеразы со структурой эпсилон инициирует инкапсидирование РНК в капсидный белок и формирование сердцевины вириона и одновременно инициируется процесс обратной транскрипции с образованием короткого фрагмента (-)цепи ДНК (всего несколько нуклеотидов), при этом молекула полимеразы выполняет роль затравки, через тирозин ковалентно связывается с первыми нуклеотидами ДНК, СВЯЗЬ ОСТАЕТСЯ НА ВСЕ ВРЕМЯ И ИМЕННО В ТАКОМ ВИДЕ ПОЛИМЕРАЗА ПОПАДАЕТ В ВИРУСНУЮ ЧАСТИЦУ.

Р.Прямоугольники с циферками - это повторы, по порядку слева направо: 1, 2, 1

Итак, на пгРНК строится участок, комплементарный боксу DR1, происходит прыжок полимеразы ,

она транслоцируется в область другого DR1

повтора. Обратная транскриптаза обладает РНКаза Н активностью и постепенно удаляет РНК в гетеродуплексе РНК-ДНК. По непонятным причинам остается небольшой участок прегеномной РНК, ее 5 конец.

Происходит второй прыжок полимеразы между DR2 и DR1, (они комплементарны). Т о образуется свободный 3 конец, необходимый для синтеза (+)ДНК, т е затравкой для синтеза (+)цепи ДНК является фрагмент прегеномной РНК. Ну и происходит синтез этого небольшого участка (+)ДНК с помощью полимеразы. Дальше за счет той же комплементарности (­-)ДНК образует кольцо, благодаря этому полимераза переходит на 3 конец (-)цепи и продолжается синтез (+)ДНК. (+)цепь наращивается полимеразой до тех пор, пока сердцевина вириона, в которой идет этот процесс, не связывается с L белком на мембране (он находится в составе мембранной эндоплазматической сети), это связывание ведет к небедленной остановке синтеза (+) нити. Процесс может быть растянут по времени, поэтому разные вирионы могут иметь (+)ДНК разной длины, но никогда (+)ДНК не успевает сделать полный круг. А кусочек пгРНК остается ковалентно связанным с (+)ДНК вируса и в составе вириона.

Итак, репликация идет в цитоплазме, внутри коровой частицы,

которая параллельно формируется из продуктов трансляции. В образовании этих коровых частиц участвуют шапероны клетки, более того часто сами входят в состав созревших вирусных частиц (БТШ 90).

Суммируем: частица взаимодействует с неизвестным пока рецептором, ДНК идет в ядро, там происходит изменение 5' концов, ДНК достраивается, лигируется и образуется эписома, с нее идет транскрипция, затем с прегеномной РНК в цитоплазме связывается обратная транскриптаза и идет

репликация, одноврменно при участии клеточных шаперонов

образуется кор, он связывается с HBS L на ЭПР и репликация

преркащается, при этом +цепь не успевает достроиться. Важно, что

гепатит б распространен неравномерно, очень много его в Китае.

Заражается только один тип клеток, в патогенезе важна иммунная система, 95 процентов излечивается самостоятельно с помощью цитотоксических Т-лимфоцитов. При этом больные теряют часть печени - отсюда симптомы. У 5 процентов слабый иммунный ответ и они становятся хрониками. Сейчас в мире 300млн носителей. Это огромный резервуар и среди них 10 процентов

получают рак печени.

Почему вирус онкогенный? Геном вируса способен интегрировать в клеточный геном. И при этой случайной интеграции вирус нарушает транскрипцию клеточных генов, что очень часто приводит к потере контроля над клеточным делением. Есть другая версия: при интеграции ген Х никогда не теряется, он является транскрипционным активатором, помимо своих, активирует факторы транскрипции самой клетки, ну и, соответственно, белков, которые регулируют клеточные деления.

Семейство Parvoviridae

Около 50 представителей, образуют 2

подсемейства: Parvovirinae (позвоночные) и Densovirinae (насекомые).

• Геном – линейная ssДНК

• Группа II (по Балтимору)

• Различают автономные и дефектные или

ассоциированные парвовирусы (род Dependovirus, аденосателлит AAV2).

Наиболее известный парвовирус, заражающий человека – это парвовирус В-19, он вызывает инфекционную эритему, а у младенцев – пятую болезнь, размножается в крови, костном мозге, в тканях эмбриона, около 70% людей – носители этого вируса.

• Автономные парвовирусы размножаются только в S- фазе клеточного цикла, но не способны стимулировать деление зараженной клетки, они имеют все компоненты для самостоятельного размножения.

• Ассоциированным (дефектными) парвовирусам необходим помощник – адено- или герпесвирус, в его отсутствие способны встраиваться в геном

клетки-хозяина (провирус) и таким образом спасаются(очень четко, в 19 хромосому человека и поэтому к образованию опухолей не приводит). Помощник стимулирует транскрипцию клетки.

Структурные белки крупные, сходные по аминокислотному составу, отличаются только «эн» - концевыми последовательностями.

Дальше все обсуждаем на примере AAV2.

Инвертированные повторы образуют либо Т – образные, лиюо У – образные шпильки. «У» еще называют «заячьи уши».