Качественный и количественный анализ.

Для обнаружения каротиноидов в растительном сырье в исследовательской практике обычно используют аналитическую ТСХ на окиси алюминия или силикагеле. Обнаруживают каротиноиды на хроматограммах по собственной окраске или применяя общие окислительные или комплексообразующие реагенты (SbCl₃ – пятна синего или фиолетового цвета, Н₂SO₄ (конц) – синие пятна на желтом фоне).

В действующем НД на природные продукты являются предметом фармакогностического анализа используется УФ-спектроскопия (масло шиповника (ФС 42-2067-96), облепиховое масло (ФС 42-1730-95) λ_max=450±2 мм и 471±2 мм), тыквеол (масло семян тыквы) ФС 42-3651-98 λ_max= 440±2 мм.

На масло шиповника также предусмотрена реакция с SbCl₃ (быстро исчезающие зеленовато-синее окрашивание).

Количественное определение каротиноидов в растительном сырье проводят ФЭК или СФ методом в видимой области спектра.

Плоды облепихи крушиновидной свежие (ТУ 644-87) – суммы каротиноидов в пересчете на β-каротин не менее 10 мг/%

Плоды облепихи крушиновидной сухие (ТУ 64-472-88) – суммы каротиноидов не менее 40 мг/%.

Облепиховое масло – суммы каротиноидов не менее 180 мг/%

Масло шиповника – не менее 60 мг/%

Масло семян тыквы – не менее 10 мг/%.

2.Токоферолы (витамин е)

Токоферолы рассеяны во многих природных объектах, но наибольшая их концентрация содержится в растительных маслах, среди которых выделяются: масло пшеничных зародышей, кукурузное масло, соевое, хлопковое.

Токоферолы обычно определяют как производные хромана с изопреноидной цепью

Но так как гидрированный пирановый цикл также является частью изопреноидной системы молекулы, то с учетом гидрофильных заместителей бензольного кольца более точно их можно определить как дитерпеноидные производные гидрохинона.

Наибольшую биологическую активность проявляет α-токоферол, наименьшую – δ-токоферол. Биологическая функция токоферолов определяется липофильностью его углеродного скелета и легкой окисляемостью гидрохинонового фрагмента. Они являются антиоксидантами и защищают от окисления липидные фрагменты клеток.

Физико-химические свойства.

Токоферолы представляют собой масла светло-желтого цвета или неокрашенные. Они обладают оптической активностью с различной величиной удельного вращения. В связи с наличием в молекуле токоферолов длинной боковой цепи все они нерастворимы в воде, но растворимы в жирах и органических растворителях. Важным свойством токоферолов является их термостабильность, они устойчивы в присутствии кислорода даже при Т=200^оС. Токоферолы весьма медленно реагируют с едкими щелочами. Они входят в состав неомыляемых фракций жиров. На этом свойстве основано их выделение из растительных масел.

Методы выделения из сырья.

С препаративными целями токоферолы получают из растительных масел. Масла омыляют едкой щелочью и из неомыляемого остатка токоферолы экстрагируют этанолом. После отгона растворителя дальнейшую очистку и разделение токоферолов проводят хроматографическими методами.

Качественный и количественный анализ.

Качественное определение токоферолов в растительном сырье проводят с помощью ТСХ. В качестве сорбента чаще всего используется силикагель. Для обнаружения используют окисляющие реактивы, с которыми токоферолы дают хиноны различной окраски (FeCl₃ – желтые, фосфорномолибденовая кислота – синие пятна, SbCl₃ – от розового до фиолетового).

Из современных методов качественной идентификации токоферолов отметим ВЭЖХ по времени удерживания пика. Этот метод включен в НД на тыквеол (ФС 42-2405-94) и «тримикол» (масло из зародышей пшеницы) (ВФС 42-3625-99).

Для количественного определения токоферолов в лекарственных препаратах чаще используют СФ в видимой области, основанная на реакции с FeCl₃ и 1,10 фенантролином. При совмещении этого метода с предварительной ТСХ его можно использовать и для определения токоферолов в растительном сырье или суммарных неочищенных препаратах растительного происхождения.

В последние годы для количественного анализа токоферолов используется ГЖХ и ВЭЖХ.

В частности методом ВЭЖХ определяется содержание α-токоферола в «тыквеоле» (ФС 42-2405-94 не менее 4 мг/%) и «тримиколе» (ВФС 42-3625-99 суммы токоферолов не менее 170 мг/%)