15. Микроскопия

Микроскопическое исследование основано на взаимодействии вещества исследуемого объекта с излучением различной природы в микроскопах, позволяющих получать увеличенное изображение мелких объектов или их деталей, невидимых невооруженным глазом.

Разрешающей способностью микроскопа называется способность оптического прибора давать раздельные изображения двух близких друг к другу деталей или точек.

Разрешающая способность микроскопа обусловлена длиной волны излучении, проходящего через исследуемый объект /или отлагаемого им/ и оптическую систему микроскопа.

На схеме представлены методы микроскопических исследований.

МИКРОСКОПИЯ

Световая

Электронная

в проходящем свете

в отраженном свете

просвечи-вающаяся

сканирующая

светлопольная прямая

темнопольная косвенная

флуоресцентная

фазово-контрастная

В зависимости от природы излучения и его длины волны микроскопия подразделяется на световую и электронную.

Световая микроскопия в свою очередь подразделяется по характеру взаимодействия излучения с веществом исследуемого объекта на микроскопию в проходящем свете по типу светлого и темного полей, микроскопию флуоресцентную /или люминесцентную/, микроскопию фазово-контрастную. Возможности световой микроскопии возрастают при использовании в блоке с микроскопом видео- и компьютерной техники.

Электронная микроскопия подразделяется на просвечивающую и сканирующую /или растровую/ электронную микроскопию.

Рабочие диапазоны светового и электронного микроскопов приведены в табл. 15.1.

Таблица 15.1

Примерные диапазоны применения различных методов исследования растительных объектов

Объект исследования	Шкала размеров объектов	Методы исследования
Организмы	1м 10см 1см 10мм 1мм 100мкм 10мкм 1мкм	\\\ /// \\\\\\ Визуальные методы !!!!!!!!!!!! Световая микроскопия _ ///////// _ Электронная микроскопия \\\ Рентгенострук- турный анализ
Органы
Ткани
Клетки
Органоиды /органеллы/
	100нм 10нм 1нм 0,1нм 0,01нм 0,001нм
Биомолекулы

Наиболее, распространенные световые микроскопы: микроскопы биологические /МБР-1, МБИ-3, МБИ-6, «Биолам»/, бинокулярные /БМ-56, "Ортоплан»/, стереоскопический /МБС-1/.

Предел разрешения светового микроскопа определяется длиной световой волны, равной от 0,4мкм для фиолетового цвета до 0,7мкм для темно-красного цвета, и шириной конуса световых лучей в оптической системе по формуле:

Разрешение = 0,61 λ (n-Sin0) ,

где λ - длина волны света, мкм; n - рефракция среды; - угол ширины конуса световых лучей, собираемых линзами объектива с точки исследуемого объекта.

Вопросы для самоконтроля

1. Какие методы микроскопических исследований вы знаете?

2. Что такое разрешающая способность микроскопа?

3. На какие виды подразделяется световая микроскопия?

4. На какие методы подразделяется электронная микроскопия?

5. Как определяется предел разрешения светового микроскопа?

Тест по теме

Каким методом Вы прежде всего стали бы исследовать клетки растений:

1. Световой микроскопией?

2. Электронной микроскопией?

3. Рентгеноструктурным анализом?