Семейство поксвирусов (poxviridae)

Семейство Poxviridae —крупных (300×450 нм), имеющих суперкапсид, двухцепочечных ДНК-геномных вирусов, способных инфицировать животных, птиц и насекомых. 2 подсемейства — Entomopoxvirinae (вирусы насекомых) и Chordopoxvirinae (вирусы позвоночных); 11 родов вирусов (8 инфицируют позвоночных, 3 — беспозвоночных). 2 вируса ч-ка — variolla (smallpox virus), относящийся к роду Orthopoxvirus, и molluscum contagiosum, род Molluscipoxvirus. Вирусы животных и птиц при опред. усл. могут инф. и ч-ка. Поксвирусы являются хорошими векторами, экспрессирующими чужеродные АГ и могут быть использованы при разработке новых вакцин против натуральной оспы; приемлемы для генно-инженерных работ, т.к. реплицируются в цитоплазме.

Вирусы подсемейства Chordopoxvirinae, способные инфицировать человека

Вирусы	Таксономия	Хозяин	Заражение	Вызываемые заболевания
Orthopoxvirus
Variolla virus	VARV	человек	воздушно-капельный, контактный	натуральная оспа, генерализованая инфекция
Monkeypox	MPXV	белки, обезьяны, человек	контактный	оспоподобное
Vaccinia	VACV	коровы, человек	контактный	локальные кожные поражения
Cawpox	CPXV	грызуны, коты, коровы, человек	контактный	локальные кожные поражения
Parapoxvirus
Orfvirus	ORFV	овцы, человек, жвачные	контактный	локальные кожные поражения
Bovine popular stomatitis virus	BPSV	крупный рогатый скот, человек	контактный	локальные кожные поражения
Yatapoxvirus
Yata monkey tumor virus	YMTV	грызуны, приматы, человек	трансмиссивный	локальные кожные поражения
Molluscipoxvirus
Moluscum contagiosum virus	MOCV	человек	контактный, половой	множественные узелковые поражения

Морфология. Поксвирусы — крупные кирпичеподобной формы вирусы; р-р 350×370 нм. 2 формы — внутрикл. (имеет липидсодержащую поверхностную мембрану и высвобождается из кл. путем ее разрушения) и внекл. (содержит второй липидный слой, окружающий вирион, включающий поверхностные гликопротеины, которые отсутствуют у внутрикл.форм).Сердцевина гантелеобразной формы, содержит одно или два боковых тельца, комплекс ДНК +б. 30 структурных б.

Геном. огромного р-ра — от 130 до 380 кб информации, кодирующей сотни б., образующих сердцевину, латеральные тельца и перикапсид. Геном — двухцепочечная, линейная ДНК. Концы молекулы ДНК ковалентно соединены (одноцепочечная циркулярная молекула, комплементарная самой себе на значительном протяжении). Репликация в эпителии кожи или слизистых респират. тракта, что сопровождается локальными патоморфологическими изменениями, выявляемыми при окраске по Романовскому-Гимзе (эозином с гематоксилином). Процесс репликации вируса от 37 до 75 ч. Для вируса вакцины 1224 часа. Репликация ДНК и сборка вирионов происходит в цитоплазме. ф-ты репликации ДНК, продукции мРНК (ДНК- и РНК-полимеразы, поли-А полимеразы обмена нуклеотидов, протеинкиназы, ДНК-топоизомеразы), ф-ты биосинтеза структурных б. и б., интерферирующих с факторами защиты организма. В цитоплазме выявляются электронноплотные области, содержащие вирусную ДНК и б. Предшественник ДНК упаковывается в вирион, формируя его сердцевину, и конденсирует вокруг себя б. Внутрикл. формы вирионов инфекционные, окружены липидной оболочкой. Внекл. формы имеют еще одну дополнительную липидную оболочку. В инф.кл.выявляются три области: В-область, базофильная, или тельца Гварниери (мести синтеза ДНК); А-область, ацидофильная — скопление вирионов и область протеинового матрикса. Репликация MCV в эпителии кожи сопровождается образованием эозинофильных цитоплазмат.включений гранулярного типа (тельца контагиозного моллюска).

Патогенез. Вирус вначале реплицируется локально, затем распространяется лимфогенно. При первичной виремии переносится в паренхиматозные органы — печень и селезенку. После репродукции в кл.этих органов огромные кол-ва вирионов вновь возвращаются в кр. систему и вторичная виремия сопровождается поражением почек, легких, ЖКТ, кожи и др. органов. Вторичная репродукция ведет к формированию классической для натуральной оспы сыпи на коже и слизистых, развитию макулопапулезных поражений. Особенно на лицевой части головы. Эти поражения — оспины — остаются в виде своеобразных отметин на всю жизнь. Характерными клиническими проявлениями являются головная боль, лихорадка, мышечная боль, поражения ЦНС,множественные очаги поражений, сопровождающихся геморрагиями, отеками и некрозом кл. Возможно бактер.суперинф. 2 штамма вируса натуральной оспы — variolla major — классический и — variolla minor или алястрим.

Геном поксвирусов кодирует множество б., взаимодействующих с кл. Эти б. индуцируют неспециф. механизмы противовирусной защиты хозяина или важные молек.-кл. механизмы патогенеза. Как правило активируют СК, стимулировать образование ИФ, ФНО, ИЛ-1.

Пути передачи. Вирус натуральной оспы исключительно антропонозный. Источник инф.— больной ч-к. Инфицирование воздушно-капельным и контактным путями, через поврежденную кожу или слизистые. Наибольшую опасность представляют больные в первые 810 суток высыпаний. Однако опасность инфицирования сохраняется до отпадения корок. Вирус контагиозного моллюска передается половым и контактным путями, посредством полотенец, бассейна.

Заболевания.Классическая форма оспы (Variolla major). Инк.период натур.оспы 515 суток. Могут быть молниеносные формы. Продром. период 24 суток, стадия высыпаний — 45 суток, формирование пустул (нагноения) — 710 суток, выздоровление 2030 сут. По ст.тяжести выделяют тяжелую (геморрагическую, сливную), средней тяжести и легкую (без сыпи и вариолоид) формы. Особенной чувствительностью к вирусу натур.оспы обладают лица с нарушенной ф-цией ИС и первичными ИДС. Летальность 30%.

Вариолез (Variolla mitigata) — (вариолоид) — это атипичное течение натур. оспы у привитых с неполноценным им-том (5% привитых). Хар-ся коротким и легким течением..

Алястрим (Variolla minor) — легкая форма заболевания, протекающая с наличием экзантематозных высыпаний и низкой летальностью (менее 1%).

Эрадикация натуральной оспы. В нач. 20-го века заболеваемость натуральной оспой в РБ составляла 300400 случаев на 100 000 населения. Благодаря созданию вакцины и внедрению в практику системы иммунопроф-ки натуральная оспа была ликвидирована в 1928 году.. Последний случай заболевания был зарегистрирован в 1977 г. в Сомали. В 1980 г. ВОЗ официально подтвердила ликвидацию оспы. В наст. время вирус натуральной оспы хранится в двух лабораториях — в центре по борьбе с инфекциями в США (CDC, Атланта) и НИИ вирусологии «Вектор» в России (Новосибирск). Вместе с тем, остается опасность новой интрадукции вирусов оспы в популяции ч-ка. Эта опасность исходит из возможности перехода вируса обезьян на популяцию ч-ка. За последние годы известны многократные случаи оспоподобных заболеваний ч-ка, обусловленных этим вирусом (более 60 человек, до 9-ти пассажей).

Иммунитет. Техника вариоляции заключалась в чрезкожном или интраназальном инфиц. здорового индивидуума детритом сухих отпадающих корок участков оспенных поражений, содержащих вирус натуральной оспы. Этот способ иммунизации хар-ся низкой летальностью (12%) и более легким течением заболевания. Однако массового применения не нашел. Эдвард Дженнер создал вакцинацию вирусом коровьей оспы. В 1796 г. он таким образом публично иммунизировал мальчика Джеймса Фиппса, а затем инфицировал его вирулентным вирусом натуральной оспы и показал тем самым развитие резистентности организма ребенка к последнему. Протективный эффект вируса вакцины объясняется наличием перекрестнореагирующих АГ в составе этих близкородственных патогенов. В последующем стали готовить р-р, содержащий вирус вакцины, каплю р-ра наносили на поверхность кожи в области плеча правой руки и скарифицировали ее. Вирус внедрялся в поврежденный участок кожи, реплицировался локально, вызывал воспалительную реакцию, поражение кожи и образование рубца. В результате развивался им-тет против вируса натуральной оспы. Основная форма им-та протективный ГИО, обусловленный биосинтезом вирусспециф IgM и IgG.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования. Об установлении случая натуральной оспы необходимо сообщить в министерство здравоохранения и ВОЗ. Пациент должен быть помещен в условия, соответствующие уровню биологической безопасности 4 (УББ-4). Лица, контактировавшие с больным, должны быть изолированы. В био.материале вирус остается инфекц. в течение неск. недель. Объекты исследования биопсия кожных макуло-папулезных и везикулезно-пустулезных высыпаний, ж-ть из участков повреждения, корки. Материал помещают в пробирки, содержащие поддерживающую питат. среду. Пробы био- материала хранят при 4С, но предпочтительнее — при 70С.

Методы исследованийДля вирусологической диагностики используют заражение 12-дневных куриных эмбрионов и культуры кл. Vero. В процессе репродукции в хорионаллантоисной оболочки образуются хар-ные повреждения в виде бляшек (оспины). При культивировании на культуре кл.Vero - ЦПД.

Гистологическое исследование биоптатов - гиперплазия эпидермиса, пенетрация кератиноцитов в дерму. Пр-ты окрашиваются гематоксилином и эозином. Методом световой микроскопии окрашенных мазков выявляют тельца Пашена-Гварниери (овальные околоядерные ацидофиьные включения). Реакция ИФА для выявления вирусных АГ в мазках-отпечатках. Электронная микроскопия — хороший и быстрый метод выявления поксвирусов (р-ры от 140230 до 210380).

Серологическая диагностика используется в качестве ретроспективного метода. 4кратное увел. титров АТ в пер. острой фазы и фазы реконвалесценции - диагностический критерией. Может использоваться ИФА и блоттинг.

Мол.-биол. анализ с помощью ПЦР и секвенирование ДНК генома вирусов ; повышает эффективность диагностики.

Профилактика и лечение

Для иммунопроф-ки используют живые вакцины. Состояние невосприимчивости развивается через 710 дней после иммунизации, а протективный иммунитет сохраняется в течение 35 лет. В соответствии с декларацией ВОЗ о ликвидации натуральной оспы вакцинация людей против нее с 1980 г. прекращена повсеместно. В связи с угрозой биотерроризма США планируют к концу 2002 г. изготовить более 200 млн. доз вакцины. В целях экстренной иммунопроф-ки и иммунотерапии может применяться противооспенный Ig. Метисазон — основной противооспенный химиопрепарат.

СЕМЕЙСТВО ГЕРПЕСВИРУСОВ (HERPESVIRIDAE) сложные ДНК-геномных вирусы, паразитов ч-ка, жив-ных, вызывают острые и хронич., инфекц. и опухолевые заболевания. Диаметр 150200 нм. 3 подсемейства герпесвирусов: Alphaherpesvirinae, Betaherpesvirinae, Gammaherpesvirinae.