Заняття

Тема. Збудники зоонозних бактеріальних інфекцій - сибірки, бруцельозу.

МЕТА (загальна): уміти провести та оцінити мікробіологічну діагностику зоонозних інфекцій.

Теоретичні питання:

1.Особливо небезпечні інфекції. Режим роботи зі збудниками цих захворювань.

2. Біологічні властивості збудників бруцельозу.

3.Мікробіологічна діагностика бруцельозу.

4.Біологічні властивості збудника сибірки – B.anthracis.

5.Мікробіологічна діагностика сибірки.

6.Специфічна профілактика особливо небезпечних інфекцій.

ПРАКТИЧНА РОБОТА СТУДЕНТІВ

1. Поставити реакцію термокольцеприципітації по Асколі з метою виявлення сибіркового антигену в досліджуваному екстракті.

2. Вивчити демонстраційні препарати та оформити протокол.

1. Прибрати робоче місце та підписати протокол у викладача.

Алгоритм практичної роботи:

Робота 1.Виконайте реакцію у відповідності з наданою схемою. Зверніть увагу на послідовність внесення компонентів реакції в пробірку та особливості внесення екстракту.

Таблиця 1 – СХЕМА ПРОВЕДЕННЯ РЕАКЦІЇ ТЕРМОКОЛЬЦЕПРИЦИПІТАЦІЇ ПО АСКОЛІ

	Дослід	КА	КС
Досліджуваний екстракт	0,5	--	--
Стандартна сибіркова імунна сироватка	0,5	--	0,5
Екстракт	--	0,5	--
Фізіологічний розчин	--	--	0,5
Облік результатів	?	+	--

КА – контроль антигену (досліджуваного екстракту),

КС – контроль стандартної сироватки.

Реакція відбувається при кімнатній температурі в перші хвилини після проведення.

Якщо в контрольних пробірках результат співпадає з даними таблиці, врахуйте результат реакції у першій пробірці і зробіть висновок про відсутність або присутність антигенів B.antracis у досліджуваному екстракті.

Робота 2 . Переглянути демонстрацію та оформити протокол.

ДЕМОНСТРАЦІЯ

МІКРОПРЕПАРАТИ

Bacillus anthracis, фарбування за Грамом.

Грам позитивні паличкоподібні бактерії наче з обрубаними кінцями

розташовуютьсяу вигляді ланцюжків (в матеріалі від хворого ланцюжки короткі, в

чистій культурі довгі). В препаратах, приготованих з матеріалу, взятого від хворого

або з поживного середовища, в складі котрого були білкові добавки, видно капсулу,

котра може оточувати не тільки окрему клітину, але й цілий ланцюжок. Спора,

котра формується при несприятливому впливі на клітину навколишнього

середовища, розміщується центрально. Діаметр спори не перевищує поперечного

розміру бактерії, на цій основі збудник віднесений до роду Bacillus – цей рід

включає в себе спороутворюючі бактерії з дрібними спорами. Спора не дозволяє

фарбам проникати в середину клітини при більшості методів фарбування, тому ви

спостерігаєте її як просвіт вцентрі клітини. При використанні метода фарбування

Циля-Нільсена спора фарбується фуксином Циля в червоний колір; цитоплазма

бактерій як структура, не стійка до дії кислот, набуває синього кольору.

ДІАГНОСТИКУМИ

Бруцельозний

Бруцельозний єдиний (для реакції Райта і Хеддельсона) діагностикум, який складається з завису вбитих бруцел в 12% розчині натрію хлориду, зафарбований аніліновим барвником у синій колір.

АЛЕРГЕНИ

Антраксин сибірковий алерген.

Алергодіагностики сибірки базується на здатності організму хворого відповідати місцевою алергічною реакцією шкіри на введення антраксину. Шкірну пробу ставлять на внутрішній поверхні передпліччя. Результат оцініють через 24-48 годин. Реакція вважається позитивною при наявності через 24 години гіперемії і інфільтрата на шкірі діаметром не менше 8 мм. Результати шкірної проби з антраксином необхідно оцінювати тільки в комплексі з клініко-епідеміологічними даними.