Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Полимеразная цепная реакция.doc
Скачиваний:
6
Добавлен:
26.08.2019
Размер:
340.99 Кб
Скачать

Цитомегаловирус (цмв)

ЦМВ может быть причиной многих серьёзных заболеваний  с  летальным исходом. Темпы роста заражения ЦМВ составляют 1% в год, при этом к пятидесятилетнему  возрасту инфицированность  людей приближается к 100% показателю. Эти факты не позволяют однозначно ответить  на вопрос о степени патогенности вируса. С одной стороны, ЦМВ редко вызывает клинически манифестные заболевания  у иммунокомпетентных людей. С другой стороны, у иммунодефицитных  пациентов  отмечено развитие таких  ЦМВ-обусловленных   заболеваний, как мононуклеоз (гетерофильнонегативный вариант), хориоретинит, ретардация ментальных функций, глухота и т.п. Как и любая  другая герпетическая инфекция при первичном инфицировании ЦМВ возникает пожизненная латенция. Реактивация  ЦМВ-инфекции  зависит от состояния иммунной системы организма, срыв которой приводит к  возможности патологического влияния вируса на организм.

Лабораторная диагностика ЦМВ-инфекции включает в себя несколько подходов:

  1. выявление инфекционных вирусных частиц или антигенов,

  2. определение вирусной ДНК,

  3. определение иммунного ответа организма,

  4. выявление прямого цитопатического действия  вируса, выделенного из   в биологических субстратов пациента,  на перевиваемую культуру клеток.

Серологические тесты на ЦМВ являются основными для установления инфицирования данным вирусом. Однако это отнюдь не является основанием для заключения о том, что болезнь действительно вызвана ЦМВ. Показано, что высокие титры анти-ЦМВ-антител обнаружены как у здоровых носителей, так  и у  больных с острым течением инфекции. Селективное определение специфических антител  против ЦМВ класса М  и G также не позволяет с полной уверенностью дифференцировать острую инфекцию, от реактивации хронической. Поэтому определение вирусных антигенов и ДНК ЦМВ становится важным тестом для диагностики заболевания этим вирусом.

Метод ПЦР широко используется для диагностики  ЦМВ в любых биологических тканях и жидкостях, в том числе и биопсийном материале, фиксированном формалином. Этот метод превышает по своей чувствительности все имеющиеся аналоги. Для увеличения диагностической и прогностической значимости разрабатываются количественные методы исследования, создаются праймеры к сверхранним, ранним  и поздним  генам вируса. Кроме того, апробируются новые технологии ПЦР основанные на  определении  РНК-зависимой ДНК-полимеразы. Это позволит выявлять мРНК реплицирующегося  ЦМВ. Во многих работах показано, что прямая детекция ДНК ЦМВ в плазме методом ПЦР коррелирует с повышенным риском развития манифестной формы ЦМВ или связанными с ней осложнениями. Кроме того, определение вирусной нагрузки ЦМВ в крови позволяет оценить эффективность противовирусной терапии.

Вирус Эпштейна-Барр (вэб)

Инфекция  названная так в честь  учёных Мишеля Эпштейна и Эвелины Барр, выделивших в 1964 г патоген из опухоли (лимфомы) Беркитта. ВЭБ широко распространённая инфекция, контаминация  которой происходит обычно в молодом возрасте. При этом ВЭБ-инфекция,  как и любая герпетическая инфекция, может протекать в форме первичного заражения или реактивации латентного процесса  (табл. 4) . Как видно из представленной  таблицы, ВЭБ - это потенциально онкогенная инфекция.

Тип инфекции

Заболевание

• Первичная инфекция

• Хроническая инфекция

• Реактивация хронической инфекции

• Инфекционный мононуклеоз

• Лимфома Беркитта

• Болезнь Ходжкина

• Синдром Дункана

• Назофарингиальная карцинома

• Лимфомы у ВИЧ-инфицированных

Таблица 4. Клинические варианты ВЭБ-ассоциированных лимфопролиферативных заболеваний

Лабораторная диагностика ВЭБ-инфекции базируется на цитологическом исследовании крови или костного мозга, серологических  исследованиях (определение гетерофильных и противовирусных антител) и ПЦР. Алгоритм лабораторной диагностики  представлен в таблице 5. Вирус ЭБ может быть обнаружен методом ПЦР в сыворотке  крови, слюне,  ткани опухоли и костном мозге. При этом важно сопоставление результатов клинических, серологических  и молекулярных обследований в определении ВЭБ-инфекции, как причины имеющегося заболевания.

Маркер ВЭБ-инфекции

Время возникновения

Клиническое значение

Гетерофильный тест

С момента развития болезни до нескольких месяцев

Острая стадия ИМ, отражает темпы реконвалесценции, дифференцирование между первичной и реактивацией хронической ВЕБ-инфекции

VСА - Ig М

С момента развития болезни до  двух месяцев

Острая стадия ИМ

ЕА - Ig G

С первой недели болезни до нескольких лет (в норме)

Острая стадия ИМ, коррелирует с тяжестью болезни, при персистировании более двух-трёх лет указывает на хроническую форму ВЭБ-инфекции

ЕВNА -Ig G

Через несколько недель после клинических проявлений с последующим пожизненным персистированием

Стадия реконвалесценции, анамнестические антитела

ДНК в плазме

До клинических проявлений болезни

Репликация вируса в организме, показание к противовирусной терапии и критерии эффективности проведенного лечения

Таблица 5. Лабораторная диагностика и клиническая значимость маркеров ВЭБ-инфекции