- •Окраска бактерий в мазках
- •Для обнаружения возбудителей используют различные методы и группы методов.
- •Окраска метиленовым синим Лефлера Методика окраски.
- •Окраска основным фуксином по Пфейферу
- •Окраска генциановым или метиловым фиолетовым
- •Окраска карболовым тионином Николя
- •Окраска акридиновым оранжевым по Дарту-Тернеру
- •Окраска по Граму Красящие растворы.
- •Красящие смеси для грамположительных бактерий:
- •Красящие смеси для грамотрицательных бактерий:
- •Методика окраски.
- •Окраска по Романовскому-Гимзе Приготовление красителя
- •Методика окраски
- •Окраска плазмодиев малярии в мазках по Романовскому-Гимза
- •Методика окраски «толстой капли».
- •Метод Френкеля
- •Флюоресцентное окрашивание мазков мокроты (метод Хагеманна) ,
- •Метод Киньуна (для срезов)
- •Метод Файта (для срезов)
- •Серебрение бактерий в мазках — метод Фонтана
- •Выявление жгутиков и ресничек Метод Леффлера
- •Метод Лайфзона
- •Метод Меллера
- •Окраска малахитовым зеленым Шеффера-Фултона
- •Метод Ожешки
- •Метод Битгера
- •Выявление возбудителей сыпного тифа и других риккетсий Выявление риккетсий в мазках (метод Маккиавелло)
- •Выявление риккетсий в срезах (метод Ника)
- •Выявление коринебактерий дифтерии
- •Выявление стрептококков
- •Выявление стафилококков
- •Выявление пневмококков
- •Выявление менингококков
- •Выявление гонококков
- •Выявление возбудителей чумы
- •Выявление анаэробных спорообразующих бактерий группы клостридии
- •Выявление возбудителей сибирской язвы
- •Выявление возбудителей кишечной инфекции
- •Выявление спирохет и других спиралевидных бактерий
- •Выявление возбудителей возвратного тифа
- •Выявление лептоспир
Выявление коринебактерий дифтерии
Лучше всего они выявляются в мазках из зева. Мазки фиксируют над пламенем горелки и окрашивают либо щелочным метиленовым синим Леффлера, либо ацетатом толуидинового синего, либо ацетатом кристаллического или метилового фиолетового. Коринебактерия грамотрицательна, ложнодифтерийные палочки при окраске по Граму обладают гораздо большей устойчивостью, чем возбудители дифтерии.
Возбудитель идентифицируют по характерным структурным особенностям: палочки имеют колбообразные вздутия на концах, что придает бактерии вид, булавы. В мазке наряду с длинными, тонкими, прямыми и слегка изогнутыми палочками можно обнаружить короткие и толстые. Характерным признаком бактерий дифтерии являются включения зерен волютина, находящихся на концах палочки. Ложнодифтерийные палочки значительно грубее, короче возбудителей дифтерии и не содержат зерен волютина. Зерна волютина окрашивают 10—15 с смесью, в состав которой входят 0,1 мл метиленового синего, 0,2 мл 96 % спирта, 5 мл ледяной уксусной кислоты, 100 мл дистиллированной воды. После окрашивания мазки ополаскивают водой, докрашивают 10—15 с в 0,2 % водном растворе основного коричневого; снова ополаскивают водой, высушивают и изучают при иммерсии.
Бактериоскопическая идентификация, возбудителя дифтерии является ориентировочной, поэтому требуется подтверждение с помощью классического бактериологического метода. Более быстрым и достаточно специфичным методом идентификации дифтерийной палочки является непрямая иммунофлюоресценция с препаратом антител против О- и К-антигенов коринебактерий дифтерии. Кроме того, разработана иммуноферментная тест-система для выявления дифтерийного токсина, которая пригодна для определения токсинообразующих коринебактерий в мазках. .
Выявление стрептококков
В мазках гноя и осадка жидкости, полученной при лаваже бронхов, в ткани эндокарда, взятой при биопсии или на вскрытии, стрептококки выявляются при окраске по Граму: они грамположительны. Однако более ярко стрептококки окрашиваются анилиновыми красителями — синькой Леффлера и др. Характерна расположение стрептококков в виде цепочек, при этом делящиеся формы лежат перпендикулярно оси цепочки, что позволяет довольно точно идентифицировать эти микроорганизмы в мазках и срезах.
Выявление стафилококков
Так же как и стрептококки, стафилококки являются грамположительными микроорганизмами, но прекрасно воспринимают анилиновые красители типа метиленового синего, синьки Леффлера и др. Характер микроколоний стафилококков в тканях и выделениях морфологически хорошо идентифицируется это округлые образования со значительным количеством делящихся форм в виде тетрад.
Выявление пневмококков
В мазках цереброспинальной жидкости, мазках осадка промывных вод, в легочной ткани, полученной на вскрытии можно выявить грамположительные диплококки, располагающиеся цепочкой, или одиночные, покрытые капсулой. Эти микроорганизмы хорошо окрашиваются по Граму или анилиновыми красителями типа метиленового синего, в срезах — с большим трудом. В связи с наличием капсулы требуется специальное окрашивание.
Выявление менингококков
Менингококки, представляющие собой диплококки без капсулы, грамотрицательны. Их выявляют в мазках цереброспинальной жидкости, нейтрофилах крови и свободно в крови, гное с оболочек мозга. Менингококки хорошо окрашиваются анилиновыми красителями типа метиленового синего. Мазки клинического материала нужно исследовать либо сразу, либо фиксировать и затем окрашивать спустя любое время. Для идентификации менингококков применяют также метод иммунофлюоресценции, но для этого необходимо наличие иммуноферментной тест-системы.