3.2. Закономерности, раскрывающие вторичную структуру днк – правила американского биохимика Чаргаффа ... .

1. сумма пуриновых нуклеотидов равна сумме пиримидиновых нуклеотидов

2. содержание аденина равно содержанию тимина

3. содержание гуанина равно содержанию цитозина

4. количество 6 аминогрупп равно количеству 6 кетогрупп оснований

5. изменчива только сумма А+Т и Г+Ц

Задание 4. Определите правильность утверждений в предложении и установите наличие причинной связи между ними.

4.1. Полиадениловый участок в молекуле мРНК играет защитную роль, потому что предупреждает повреждающее действие нуклеаз на мРНК.

4.2. Синтез ДНК идет по полуконсервативному типу, потому что дочерние молекулы синтезируются заново.

Примеры ситуационных задач Задача 1.

Используя триплетную карту, предскажите аминокислотную последовательность пептидов, синтезируемых в рибосомах в присутствии следующих матриц, считая, что считывание начинается с первого триплета на левом конце.

а) GGUCAGUCGCUCCUGAUU

б) UUGGAUGCGCCAUAAUUUGCU

в) CAUGAUGCCUGUUGCUAC

г) AUGGACGAA

Задача 2.

В большинстве соматических клеток после завершения репликации хромосом 5’-концы дочерних цепей ДНК недостроены, т.к. после удаления праймеров эти фрагменты оказываются недореплицированными. В эмбриональных клетках такого не наблюдается. Как осуществляется восстановление 5’-концов дочерних цепей в быстро делящихся клетках? Опишите фермент, ответственный за достройку 5’-концов ДНК этих клеток, механизм его функционирования; объясните, почему ДНК-полимеразы ß не могут осуществить эту достройку; укажите, почему укорочение дочерних цепей не опасно для большинства клеток человека.

Самостоятельная работа студентов

Занесите в тетрадь протоколы лабораторных работ, оставляя место для расчетов и выводов.

Работа 1. Метод выделения плазмидной днк из дрожжей для последующего введения в клетки e.Coli.

Клетки Escherichia coli являются удобными объектами генно-инженерных экспериментов. Однако данные клетки не способны гликозилировать синтезируемые ими белки (в том числе и эукариотические). Но многие эукариотические белки активны лишь в гликозилированном состоянии.

Дрожжи обладают всеми признаками эукариот. В их геноме нет оперонов, транскрипцию у них ведут три типа РНК-полимераз, а мРНК имеют типично эукариотическое строение. Они содержат специфические эукариотические белки (гистоны, актин, тубулин, пептидные гормоны) и эукариотические органеллы (ядерная мембрана, митохондрии, 80S рибосомы, эндоплазматические мембраны, аппарат Гольджи, лизосомы). Каждая хромосома их несет по одной центромере, по две теломеры и по несколько ori-сайтов инициации репликации. Дрожжевые клетки могут гликозилировать синтезируемые ими белки.

У дрожжей известны три вида плазмид, которые можно использовать в качестве векторов. Это 2 и 3 (длина соответственно 2 и 3 мкм), а также митохондриальная (длина 24 мкм) ДНК.

Первая плазмида найдена во многих штаммах дрожжей. Она представляет собой кольцевую молекулу ДНК (6318 пар нуклеотидов), локализуется в ядре клетки и составляет около 3% всей дрожжевой ДНК. В природе эта плазмида не интегрируется в дрожжевые хромосомы.

Выделенную предлагаемым методом плазмидную ДНК можно использовать для трансформации E.coli.