Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Руководство по БХ для МБ.doc
Скачиваний:
113
Добавлен:
24.08.2019
Размер:
13.81 Mб
Скачать

Работа 2. Нингидриновая реакция.

Принцип метода. Реакция основана на способности альфа-аминокислот при взаимодействии с нингидрином подвергаться дезаминированию. При этом отщепленная аминогруппа участвует в образовании мурексидного комплекса сине-фиолетового цвета.

Техника выполнения работы. В пробирку поместите 4 капли 1 % раствора глицина и 2 капли 0,1 % раствора нингидрина. Содержимое пробирки осторожно нагрейте до появления сине-красной окраски.

Химизм реакции:

Работа 3. Реакция глицина с формальдегидом.

В пробирку поместите 5 капель 1 % раствора глицина и добавьте 1 каплю индикатора метилового красного. Раствор окрашивается в желтый цвет (нейтральная среда). К полученной смеси добавьте равный объем формалина. Отметьте появление красной окраски (кислая среда). Данная реакция под названием "формольное титрование" используется для количественного определения карбоксильных групп в α-аминокислотах. Напишите реакцию взаимодействия глицина с формальдегидом.

Работа 4. Реакция глицина с азотистой кислотой.

В пробирку поместите 5 капель 1 % раствора глицина и равный объем 5 % раствора нитрита натрия. Добавьте 2 капли концентрированной уксусной кислоты и осторожно взболтайте смесь. Наблюдайте выделение газа. Реакция используется для количественного определения аминогрупп в аминокислотах. Напишите реакцию взаимодействия глицина с азотной кислотой.

Работа 5. Амфотерные свойства α-аланина.

1. В пробирку поместите 5 капель 1 % раствора альфа-аланина и добавьте по каплям 0,1 % раствор хлороводородной кислоты, подкрашенный индикатором конго в синий цвет, до появления розово-красной окраски.

2. В пробирку поместите 5 капель 1 % раствора α-аланина и по каплям добавьте 0,1 % раствор гидроксида натрия, подкрашенный фенолфталеином, до исчезновения окраски.

Работа 6. Биуретовая реакция.

Принцип метода. Реакция основана на способности пептидной группы белков и полипептидов образовывать с ионами меди в щелочной среде комплексные соединения фиолетового цвета.

Реакция позволяет обнаружить наличие пептидной группы -CO-NH- в исследуемом веществе и, следовательно, является универсальной реакцией для обнаружения веществ белковой природы. Свое название реакция получила от производного мочевины биурета, который дает в данных условиях то же окрашивание, что и белок. Окрашивание появляется за счет образования медной комплексной соли (см. реакцию).

Техника выполнения работы. В две пробирки поместите по 5 капель раствора яичного белка и желатины. В обе пробирки добавьте по 10 капель раствора едкого натра и по одной капле раствора сульфата меди. В обеих пробирках появляется красно- или сине-фиолетовое окрашивание.

Работа 7. Ксантопротеиновая реакция (Мульдера).

При подщелачивании возникает хиноидная структура, окрашенная в оранжевый цвет.

Реакция основана на способности циклических аминокислот фенилаланина,триптофана, гистидина и тирозина, содержащих бензольное кольцо, при взаимодействии с концентрированной азотной кислотой образовывать нитропроизводные желтого цвета. В щелочной среде нитропроизводные циклических аминокислот превращаются в соответствующие соли хиноидной структуры, окрашенные в оранжевый цвет. При взаимодействии азотной кислоты с тирозином реакция нитрования протекает по выше представленному уравнению.

В одну пробирку поместите 5 капель 1% раствора яичного белка , в другую- 1% раствора тирозина. В обе пробирки добавьте по 3 капли концентрированной азотной кислоты. Нагрейте до кипения (осторожно!). Отметьте появление желтого окрашивания. Содержимое пробирок охладите под краном, к охлажденному раствору прибавляйте по каплям 10 % раствора едкого натра до тех пор, пока не начнется переход окраски.