Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Руководство по БХ для МБ.doc
Скачиваний:
117
Добавлен:
24.08.2019
Размер:
13.81 Mб
Скачать

Порядок выполнения работы

Споласкивают рот, в чистую пробирку собирают 2-3 мл слюны, которую разводят в 5 раз.

В две пронумерованные пробирки приливают по 5 капель разведенной слюны. В 1 пробирку добавляют 10 капель 1% раствора крахмала, во 2- 10 капель 1% раствора сахарозы. Обе пробирки помещают на 10 минут в термостат или водную баню при температуре 38оС, после чего содержимое пробирок делят на 2 части, с одной проделывают реакцию на крахмал, с другой реакцию Фелинга.

Качественная реакция на крахмал

К исследуемой жидкости добавляют 1-2 капли раствора Люголя. При наличии крахмала отмечают появление темно-синего окрашивания.

Реакция Фелинга

К 10 каплям исследуемой жидкости прибавляют 10 капель реактива Фелинга и нагревают. В присутствии глюкозы и мальтозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди.

Полученные результаты занесите в таблицу:

п/п

Субстрат

Фермент

Температура

Реакция на крахмал с йодом

Реакция Фелинга

Выводы

1.

2.

Сделайте вывод о субстратной специфичности фермента.

Работа 3. Термолабильность ферментов.

Ферменты при нагревании до 60-80о утрачивают свои свойства биологических катализаторов. Степень инактивирования зависит от длительности теплового воздействия. При низких температурах ферменты хорошо сохраняются, но скорость ферментативного катализа снижается. В термолабильности ферментов можно убедиться на примере действия ферментов слюны: амилазы и мальтозы.

Порядок выполнения работы

В чистую пробирку отливают небольшое количество разведенной слюны (2-3мл) и кипятят ее в течение 5-8 минут, после чего охлаждают. В 3 пронумерованные пробирки наливают по 10 капель 1% раствора крахмала. В 1-ю пробирку добавляют 10 капель слюны, разведенной в 5 раз, во 2-ю – 10 капель прокипяченной слюны, в 3-ю – 10 капель воды (в качестве контроля). Все пробирки помещают в термостат или водяную баню при температуре 38о на 10 минут. После этого проделывают качественные реакции на крахмал и реакцию Фелинга на продукты расщепления.

Реакция на крахмал. К 5 каплям исследуемого раствора приливают 1 каплю раствора йода в йодистом калие. В присутствии крахмала появляется синее окрашивание. Полученные результаты занесите в таблицу:

п/п

Субстрат

Фермент

Темпе-ратура

Реакция на крахмал с йодом

Реакция Фелинга

Выводы

Сделайте вывод о термолабильности ферментов.