Тема: Микробиологическая диагностика менингококковых инфекций
Цель занятия:
1. Знать правила взятия и транспортировки в лабораторию исследуемого материала.
2. Знать схемы микробиологического исследования и уметь использовать микробиологические методы для диагностики менингококковой инфекции.
3. Изучить диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Ход работы:
Задание 1. Правила взятия и транспортировки в лабораторию исследуемого материала.
Для бактериологического анализа обычно используют спинномозговую жидкость, взятую при люмбальной пункции или при пункции боковых желудочков мозга. Взятие спинномозговой жидкости проводят как можно раньше, желательно до начала антибактериального лечения. Проба отбирается со строгим соблюдением правил асептики. Спинномозговую жидкость доставляют в лабораторию в изотермических сосудах и немедленно исследуют: 1) анализируют количественными цитологическим и биохимическим методами; 2) проводят микробиологические исследования микроскопическим, бактериологическим и серологическим методами.
Исследуемый материал из носоглотки берут изогнутыми проволочными тампонами. Носоглоточную слизь берут с задней стенки носоглотки с помощью стерильного ватного тампона, намотанного на изогнутый под углом 45° конец проволоки, вводя тампон за мягкое небо. При исследовании слизи применяют только бактериологический метод.
От трупа исследуемый материал (гной с мозговых оболочек, из кожных поражений и др.) изучают только микроскопическим методом.
Задание 2. Знать схемы микробиологического исследования и уметь использовать микробиологические методы для диагностики менингококковой инфекции.
Морфология Neisseria meningitidis. Микроскопия исследуемого материала.
Для приготовления мазка из спинномозговой жидкости ее центрифугируют 5 минут при 3500 об/мин и из осадка делают мазки. Если присланная жидкость мутная, мазки готовят без центрифугирования. Промикроскопируйте и зарисуйте предложенный материал:
Окрашенный препарат Электронная микроскопия
Возможные варианты окрашенных препаратов:
l) N. meningitidis в чистой культуре, окраска по Граму и метиленовой синькой; 2) N. meningitidis в спинномозговой жидкости, окраска метиленовой синькой; 3) РИФ - люминесцентная микроскопия мазков N. memngitidis в спинномозговой жидкости при обработке флуоресцирующей противоменингококковой сывороткой .
Обнаружение грамотрицательных диплококков бобовидной формы, обращенных вогнутой стороной друг к другу и находящихся в лейкоцитах, свидетельствует о менингококковой этиологии менингита.
Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции проводится с использованием микроскопического, бактериологического и серологического методов (схема № 1).
В предложенной схеме представлены основные этапы этих исследований.
Схема № 1. Микробиологическое исследование при менингококковой инфекции
Ликвор, кровь,
гной,
экссудат, носоглоточная слизь
Кровь,
Ликвор
Сыворотка
крови
Обнаружение
антигена (экспресс диагностика)
Первичный
посев на среды:
1.
шоколадный агар
2.
сывороточный агар 3.селективные
среды с антибиотиками
Окраска
по Граму,
Метиленовой
синькой,
РИФ
Обнаружение
антител:
